瘦素基因在甲狀腺相關眼病眶脂肪及體外分化眶脂肪細胞中的表達△

唐建 羅清禮

甲狀腺相關眼病(thyroid associated ophthalmopathy，TAO)是以眼外肌和眶脂肪組織增多為特征的自身免疫性疾病。眼眶脂肪組織增多不但與突眼程度相關，而且能分泌多種脂肪細胞因子。眼眶組織中的前脂肪成纖維細胞屬于成纖維細胞的一個亞型，在體外培養的適當條件下能分化為脂肪細胞[1]，在脂肪組織增生中起著重要作用。瘦素(Leptin)作為特異性的脂肪細胞因子，由Zhang等[2]于1994年發現其基因定位并命名，通過受體及多種神經肽通路發揮生物學效應，除了作用于下丘腦來控制攝食、能量消耗外，還具有調節炎癥反應、促進細胞增殖等作用。本研究利用手術時獲得的TAO患者和正常人眼眶脂肪組織樣本，以及體外培養的TAO患者與正常人眼眶前脂肪成纖維細胞誘導分化得到的脂肪細胞，采用實時熒光定量PCR檢測Leptin mRNA的表達情況，探索其在TAO發病機制中的意義。

1 材料與方法

1.1組織來源TAO患者的眼眶脂肪組織取自眼眶減壓術中，共8例8眼，所有患者均符合TAO的診斷標準[3]，排除其他免疫性、腫瘤性疾病；正常人眼眶脂肪組織取自13例(13眼)去眼袋術中，亦排除其他免疫性、腫瘤性疾病。入選的TAO患者和正常人群性別比例、年齡、身體質量指數間差異均無統計學意義(均為P>0.05，見表1)。本研究通過本院醫學倫理委員會的批準，組織取樣獲得患者的同意并簽署知情同意書。

表1 入選的TAO患者與正常人群的基線比較

1.2主要試劑與儀器TrizolTMRNA分離液(美國Gibco公司)，DMEM/F12培養液(美國Gibco公司)，酶聯免疫檢測儀(美國Thermolab公司)，CO2培養箱(美國Forma Scientific公司)，GeneAmp PCR System 9600(美國PE公司)，FTC2000實時熒光定量PCR儀(加拿大楓嶺公司)。