石珂 趙璐 游志鵬 張倩 汪昌運
糖尿病視網膜病變(diabetic retinopathy,DR)是全球主要的不可逆致盲性眼病之一,據調查在美國有410萬成年人患有DR[1]。目前已公認高血糖是DR重要的起始因素,體內長期高血糖環境會損傷視網膜中視桿細胞等光感受器細胞。視桿細胞負責暗視覺,其損傷將嚴重影響患者的視功能[2],如何抑制糖尿病患者視桿細胞等神經細胞的損害已成為目前研究的熱點。根皮素是一種葡萄糖轉運蛋白-1(glucose transporter-1,GLUT1)抑制劑,早在1986年已有學者發現根皮素可以抑制葡萄糖轉運入肝[3],目前已證實GLUT1是葡萄糖通過血-視網膜屏障的唯一載體[4]。我們設想利用根皮素限制GLUT1轉運葡萄糖進入視網膜而降低視網膜組織含糖量,可能對視桿細胞等神經元有一定的保護作用。本研究通過腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立糖尿病小鼠模型后予以根皮素,而后檢測并比較暗適應視網膜電圖(electroretinogram,ERG)振幅和視網膜外核層厚度,以判斷根皮素對糖尿病小鼠視網膜視桿細胞功能和形態的影響。
1.1主要試劑和儀器復方托吡卡胺滴眼液(日本參天制藥株式會社),重組牛堿性成纖維細胞生長因子眼用凝膠(珠海億勝制藥公司)。STZ、根皮素和葡萄糖含量測定試劑盒(美國Sigma-Aldrich公司),蛋白質含量測定試劑盒(美國Bio-Rad公司),檸檬酸緩沖液(北京天根生化科技有限公司),電子分析天平(上海精科天平廠),視網膜電圖儀(美國Diagnosys公司),光譜分析儀(德國Spectro公司),生物顯微鏡(日本奧林巴斯株式會社)。
1.2實驗動物與分組健康8周齡無眼疾近交系雄性C57BL/6小鼠18只,體質量20~30 g,打上耳釘編號后根據隨機數字表隨機選取分為正常對照組、糖尿病對照組和根皮素治療組,每組6只。……