吡諾克辛鈉液對H2O2誘導的人晶狀體上皮細胞凋亡的抑制作用

王新 李寶華 張明昌 張向東

已知白內障是由于人眼接受外源性紫外線照射和內源性體內產生的氧自由基等導致的晶狀體上皮細胞DNA的損傷超越修復能力，以致細胞凋亡所引起的[1]。尤其是老年人晶狀體上皮細胞DNA的損傷常年積累導致晶狀體上皮細胞凋亡的幾率更高；因此，白內障為老年人最常見的眼病，全球致盲人數可達1800萬之多[2]。本研究探討吡諾克辛鈉液對H2O2誘導的晶狀體上皮SRA01/04細胞凋亡的抑制作用。分析應用氧化應激抑制藥對白內障的預防作用。

1 材料與方法

1.1培養的細胞來源細胞SRA01/04購自中國醫學科學院腫瘤醫院生物檢測中心細胞庫。SRA01/04細胞用含體積分數為10%FBS(TBD公司，天津)的低糖DMEM(Sigma公司，美國)培養基常規培養；培養條件為37 ℃、體積分數5%CO2、飽和濕度。細胞記數后稀釋成30×106L-1的細胞懸液，用吸管吸出單細胞懸液接種于新的培養瓶里。當細胞鋪滿瓶底達80%以上處于對數生長期時，進行傳代培養，當細胞達到一定數量時即可進行實驗。

1.2主要試劑及儀器吡諾克辛鈉液(武漢五景藥業有限公司)、低糖DMEM培養基(Sigma公司，美國)、Bcl-2鼠單抗(SantaCruz公司，美國)、Bax鼠單抗(SantaCruz公司，美國)、Caspase-3的兔多抗(Zymed，美國)；圖像分析儀(上海山富科技儀器廠)。

1.3實驗分組將培養的人晶狀體上皮細胞SRA01/04使用一次性六孔無菌培養皿培養(30×106L-1的細胞懸液，每孔2 mL)。隨機分為3組，每組2個復孔，分別為：先加藥組，即先在細胞培養液內加入吡諾克辛鈉液300 μL培養23.5 h后，再加0.5 μmol·L-1H2O2培養30 min；后加藥組，即在細胞培養液內先加入0.5 μmol·L-1H2O2，30 min后再加吡諾克辛鈉液300 μL培養23.5 h；……