戈林泉 王芳 吳進(jìn)才
摘要:產(chǎn)卵試驗(yàn)結(jié)果表明,撲虱靈能刺激2齡稻縱卷葉螟幼蟲產(chǎn)卵。幼蟲體重和蛹重的試驗(yàn)結(jié)果表明,田間試驗(yàn)中除2齡期施用吡蟲啉37.5 g/hm2(有效成分用量)的幼蟲體重顯著高于對(duì)照外,其他處理的幼蟲體重與對(duì)照之間差異均不顯著;但水泥池試驗(yàn)中處理組蛹的平均重量顯著低于對(duì)照。2種選擇性種農(nóng)藥處理后的5齡稻縱卷葉螟幼體內(nèi)保幼激素含量顯著低于對(duì)照,蛻皮激素含量除撲虱靈180 g/hm2(有效成分用量)處理顯著高于對(duì)照外,其他各處理與對(duì)照相比差異均不顯著。說明撲虱靈能刺激稻縱卷葉螟繁殖與蛻皮激素和保幼激素含量有關(guān),該結(jié)果更好地解釋了農(nóng)藥誘導(dǎo)稻縱卷葉螟再猖獗的生理生化機(jī)制。
關(guān)鍵詞:稻縱卷葉螟;選擇性農(nóng)藥;產(chǎn)卵;保幼激素;蛻皮激素
中圖分類號(hào): S435.112+.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A文章編號(hào):1002-1302(2014)01-0102-04
收稿日期:2013-05-26
基金項(xiàng)目:國家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(編號(hào):200903051)。
作者簡介:戈林泉 (1978—),男,博士,講師,主要從事昆蟲分子生態(tài)與害蟲綜合治理研究。E-mail:lqge1027@163.com。
通信作者:吳進(jìn)才,男,博士,教授,博士生導(dǎo)師,主要從事昆蟲生態(tài)及害蟲再猖獗研究。E-mail:jinciawu 1952@sina.com。稻縱卷葉螟(Cnaphalocrocis medinalis Güenée)原為局部偶發(fā)性害蟲,1970年以后成為常發(fā)性害蟲[1]。自20世紀(jì)90年代中后期以來,該害蟲在我國稻區(qū)尤其是長江中下游的江蘇、浙江等地區(qū)頻繁大發(fā)生,2003年超歷史性大猖獗,從而造成近年來糧食大幅度減產(chǎn),影響糧食生產(chǎn)安全。稻縱卷葉螟致種群周期性漲落的原因通常包括蟲源基數(shù)、氣候條件、耕作制度、品種演變及與生育期吻合性等[2-5]。農(nóng)藥誘導(dǎo)害蟲再猖獗發(fā)生已有許多報(bào)道,其中最典型的是農(nóng)藥誘導(dǎo)褐飛虱再猖獗[6-17]。有研究表明,吡蟲啉刺能激螨類[18]、三化螟生殖[19-20]。20世紀(jì)90年代以后大面積推廣農(nóng)藥撲虱靈,稍后又推廣吡蟲啉,這是否與稻縱卷葉螟的大發(fā)生有關(guān)還不清楚,選擇性農(nóng)藥能否誘導(dǎo)稻縱卷葉螟再猖獗,至今國內(nèi)外尚無報(bào)道。因此,本試驗(yàn)擬通過2種選擇性農(nóng)藥撲虱靈和吡蟲啉對(duì)稻縱卷葉螟成蟲產(chǎn)卵及其生理生化指標(biāo)的影響進(jìn)行研究,為稻縱卷葉螟的綜合治理提供理論基礎(chǔ)。
1材料與方法
1.1蟲源
田間和水泥池(半田間)試驗(yàn)蟲源采自江蘇省無錫市南泉鎮(zhèn)試驗(yàn)田。
1.2農(nóng)藥與水稻品種
供試水稻品種為江蘇大面積推廣種植的武運(yùn)粳7號(hào)。本試驗(yàn)的2種選擇性農(nóng)藥為10%吡蟲啉可濕性粉劑(江蘇鎮(zhèn)江農(nóng)藥廠)、25%撲虱靈可濕性粉劑(江蘇常州農(nóng)藥廠)。
1.3選擇性農(nóng)藥對(duì)稻縱卷葉螟產(chǎn)卵量的影響
1.3.1水泥池試驗(yàn)水稻秧苗5葉期時(shí)移裁至水泥池中,于分蘗盛期接剛孵化出的幼蟲5頭/穴,每盆共20頭。噴藥處理設(shè)撲虱靈有效成分用量180 g/hm2(高濃度,B1)、112.5 g/hm2 (中濃度,B2)、60 g/hm2(低濃度,B3);吡蟲啉有效成分用量37.5 g/hm2(高濃度,B4)、15.0 g/hm2(低濃度,B5)。第1次用藥為2009年8月10日(2齡期,C1),第2次用藥為8月15日(4齡期,C2),每個(gè)品種設(shè)置平行的對(duì)照(不用藥)。接蟲后用紗網(wǎng)罩住水泥池,當(dāng)幼蟲發(fā)育至蛹期,從水稻上將蛹剝出,待成蟲羽化后配對(duì)放于罐頭瓶中,用蜂蜜喂養(yǎng)2 d,讓成蟲在瓶內(nèi)產(chǎn)卵直至成蟲死亡,并計(jì)錄產(chǎn)卵總數(shù)。
1.3.2田間試驗(yàn)噴藥處理、用藥時(shí)間處理同“1.3.1”,將水750 kg/hm2均勻噴霧,小區(qū)面積0.01 hm2。將老熟幼蟲從田間采回室內(nèi)飼養(yǎng),待其羽化后配對(duì),讓成蟲在瓶內(nèi)產(chǎn)卵直至成蟲死亡,并計(jì)錄產(chǎn)卵總數(shù)。
1.4選擇性農(nóng)藥對(duì)蛹重和幼蟲體重的影響
將采回的蛹在電子天平上(精確到0.000 1 g)按個(gè)體稱重,每處理重復(fù)20次。取采自田間的對(duì)照和2齡期噴霧處理后的5齡幼蟲,在電子天平上(精確到0.000 1 g)按個(gè)體稱重,每處理重復(fù)10次。
1.5激素含量的測定
1.5.1蛻皮激素的測定蛻皮激素(MH)測定方法根據(jù)惠玉虎等方法[21]略有改進(jìn),取采自田間的對(duì)照和2齡期噴霧處理后的5齡幼蟲,在電子天平上(精確到0.000 1 g)按個(gè)體稱重,每處理和對(duì)照重復(fù)7次。用勻漿器勻漿,加95%乙醇浸提,超聲振蕩30 min,8 000 r/min離心5 min,提取上清液,重復(fù)3次,取上清液并合并,超低溫保存?zhèn)溆谩I蠙C(jī)前用高純N2吹干,用流動(dòng)相V乙腈 ∶V水= 75 ∶25 定容,以高效液相色譜法測定,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查得蛻皮激素的含量。
1.5.2保幼激素的測定保幼激素測定方法根據(jù)戴華國等方法[22]略有改進(jìn),取采自田間的對(duì)照和2齡期噴霧處理后的5齡幼蟲,在電子天平上(精確到0.000 1 g)按個(gè)體稱重,每處理和對(duì)照重復(fù)8次。用勻漿器勻漿,加入一定量的提取液(1 ∶1 甲醇乙醚混合液)充分研磨,轉(zhuǎn)移全部液體,超聲振蕩 3 min 左右,加入一定量的正己烷繼續(xù)超聲振蕩10 min,8 000 r/min 離心5 min,提取上清液,以正己烷提取離心3次,取上清液并合并,超低溫保存?zhèn)溆谩I蠙C(jī)前用高純N2吹干,用流動(dòng)相V乙腈 ∶V水=75 ∶25定容,以高效液相色譜法測定,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查得保幼激素的含量,每個(gè)處理和對(duì)照3次重復(fù)。
1.6數(shù)據(jù)處理
所有數(shù)據(jù)進(jìn)行同質(zhì)性檢驗(yàn)后再分析[23]。產(chǎn)卵數(shù)、幼蟲體重、蛹重、激素滴度采用三因素方差分析,多重比較采用PLSD法[24],當(dāng)P<0.05表示平均數(shù)之間存在顯著性差異。
2結(jié)果與分析
2.12種選擇性農(nóng)藥對(duì)稻縱卷葉螟產(chǎn)卵量的影響
水泥池試驗(yàn)結(jié)果(表1)表明,除B3C2成蟲產(chǎn)卵量比對(duì)照顯著增加94.6%外,其他處理與對(duì)照差異均不顯著[F=086 田間試驗(yàn)結(jié)果(表1)表明,B1C1、B2C1組成蟲產(chǎn)卵量顯著高于對(duì)照1 385.5%、2 042.1%[F=2.18>F0.05=1.95,df =(10,79)]。撲虱靈處理后的成蟲產(chǎn)卵量高于吡蟲啉處理后的成蟲產(chǎn)卵量。2齡期施用撲虱靈的成蟲產(chǎn)卵量比4齡期的成蟲產(chǎn)卵量高94.8%,田間施用撲虱靈的齡期對(duì)稻縱卷葉螟成蟲產(chǎn)卵的影響與水泥池的影響不同,這可能與大田的其他因素影響有關(guān)。2、4齡期田間施用吡蟲啉的成蟲產(chǎn)卵量與對(duì)照差異均不顯著。 表12種選擇性農(nóng)藥對(duì)稻縱卷葉螟生殖的影響 處理組合1平均產(chǎn)卵量(粒/頭)田間1水泥池B1C11107.71±43.6a166.21±44.3abB1C2155.31±73.4bc177.11±67.6abB2C11155.31±68.2a156.41±67.3bB2C2167.31±136.9abc191.11±62.3abB3C1160.81±118.5abc161.01±49.7abB3C2143.61±59.3bc1111.71±82.1aB4C1129.41±40.8bc155.31±98.3bB4C2154.91±121.8bc148.41±52.1bB5C116.51±7.3c171.51±69.9abB5C2142.91±81.8bc155.51±61.5bCK17.251±7.6c157.41±37.3b注:同列數(shù)據(jù)后標(biāo)有不同的小寫字母者表示在5%水平上差異顯著。下同。 2.22種選擇性農(nóng)藥對(duì)稻縱卷葉螟幼蟲發(fā)育和蛹重的影響 2.2.1對(duì)幼蟲生長發(fā)育的影響田間試驗(yàn)結(jié)果(圖1)表明,在2齡期時(shí),用撲虱靈中、高、低濃度處理后的幼蟲平均體重分別比對(duì)照增加了7.91%、3.42%、-2.58%;用吡蟲啉低、高濃度處理后的幼蟲平均體重分別比對(duì)照減少了8.89%、11.13%。但是,無論是施用撲虱靈還是施用吡蟲啉,稻縱卷葉螟5齡幼蟲平均體重與對(duì)照差異均不顯著。 2.2.2對(duì)蛹重的影響田間試驗(yàn)結(jié)果(表2) 表明,B5C1蛹重與對(duì)照相比顯著增加[F=1.08 2.32種選擇性農(nóng)藥的使用對(duì)幼蟲激素的影響 試驗(yàn)結(jié)果(表3)表明,除了180 g/hm2撲虱靈處理的稻縱卷葉螟蛻皮激素含量顯著高于對(duì)照外,其他處理與對(duì)照差異均不顯著[F=0.88 3結(jié)論與討論 近年來稻縱卷葉螟的大猖獗,用傳統(tǒng)的耕作制度、品種及水稻適宜生育期與稻縱卷葉螟的吻合分析結(jié)果很難解釋。雖然這期間也大致能在中小尺度空間找出耕作制度、品種更換與稻縱卷葉螟發(fā)生程度的相關(guān)性,但總體來說近幾年耕作制度并沒有大范圍實(shí)質(zhì)性變化。在耕作制度基本穩(wěn)定的情況下,也有學(xué)者從氣候條件分析稻縱卷葉螟種群數(shù)量的變動(dòng)[2-5]。用氣候條件來分析世代間或世代內(nèi)種群變動(dòng)有科學(xué)依據(jù),或者說氣候要素的脈沖效應(yīng)可能影響某一世代或某一年害蟲的發(fā)生,如2003年7月15日至8月5日的 22 d 內(nèi)江蘇泰州地區(qū)平均氣溫29.3 ℃,比常年高1.4 ℃,其中日最高溫度超過35 ℃的時(shí)間有8 d,在這種特殊的高溫天氣條件下,該地區(qū)3代稻縱卷葉螟仍表現(xiàn)出“蛾多、卵多、蟲多、危害重”的特點(diǎn)[5]。但按以往的經(jīng)驗(yàn),該市3代稻縱卷葉螟發(fā)生期間,遇35 ℃以上的高溫天氣時(shí)一般表現(xiàn)為“蛾多、卵少”或“卵多、蟲少”。從大尺度背景來說,氣候條件也很難解釋這次螟蟲大猖獗的原因。因此,螟蟲猖獗可能有其他未發(fā)現(xiàn)的誘導(dǎo)因素,或是誘導(dǎo)因素與其他因素綜合作用的結(jié)果。據(jù)報(bào)道,吡蟲啉能刺激二點(diǎn)螨(Tetranychus urticae)[18]、三化螟繁殖[19-20]。本研究結(jié)果表明,撲虱靈能刺激稻縱卷葉螟產(chǎn)卵,但田間試驗(yàn)和水泥池試驗(yàn)結(jié)果(表1)不一致,這可能與大田的其他影響因素有關(guān)。 本研究結(jié)果還表明,在田間試驗(yàn)中用2種選擇性農(nóng)藥處理稻縱卷葉螟2齡幼蟲后,稻縱卷葉螟5齡幼蟲的平均體重與對(duì)照相比差異不顯著(圖1),說明2藥劑對(duì)幼蟲的生長發(fā)育影響不明顯。大田試驗(yàn)中除了B5C1蛹重顯著高于對(duì)照外,其他處理與對(duì)照差異均不顯著。水泥池試驗(yàn)結(jié)果表明,除B3C2與對(duì)照差異不顯著外,其他所有處理蛹重顯著低于對(duì)照(表2)。田間試驗(yàn)與水泥池試驗(yàn)的蛹重不同,可能與大田的其他影響因素有關(guān)。農(nóng)藥處理對(duì)稻縱卷葉螟幼蟲激素影響結(jié)果表明,除了180 g/hm2撲虱靈處理的5齡幼蟲蛻皮激素含量顯著高于對(duì)照外,其他處理與對(duì)照差異不顯著;而保幼激素含量(除了37.5 g/hm2 吡蟲啉處理以外)顯著低于對(duì)照(表3)。產(chǎn)卵試驗(yàn)結(jié)果表明,撲虱靈能刺激稻縱卷葉螟繁殖可能與蛻皮激素和保幼激素有關(guān),是否與幼蟲體重和蛹重直接相關(guān),還有待于進(jìn)一步研究。Wang等研究發(fā)現(xiàn),在三化螟2、4齡期噴施撲虱靈和吡蟲啉,其5齡幼蟲體重、蛹和保幼激素含量顯著高于對(duì)照,能刺激三化螟產(chǎn)卵[20]。有研究報(bào)道,鱗翅目昆蟲在預(yù)成蟲或蛻皮后,卵黃原蛋白的合成受保幼激素和蛻皮激素的啟動(dòng)[25]。
農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)中引入農(nóng)藥后,除了對(duì)害蟲產(chǎn)生直接的影響外,還必然通過影響系統(tǒng)中其他因子進(jìn)而表現(xiàn)出對(duì)害蟲的間接作用。藥劑使用后影響水稻生理生化,即改變了植株?duì)I養(yǎng)而有益于稻縱卷葉螟的生長發(fā)育,使成蟲產(chǎn)卵量增加。該途徑在褐飛虱再猖獗研究中有過報(bào)道[19,26-29]。有報(bào)道表明,植物體內(nèi)糖含量高有利于二化螟的發(fā)生[30-31]。害蟲再猖獗是生產(chǎn)上面臨的一個(gè)重大問題,其影響因素相當(dāng)復(fù)雜。有關(guān)農(nóng)藥誘導(dǎo)稻縱卷葉螟再猖獗的機(jī)制,本試驗(yàn)僅從藥劑處理后對(duì)害蟲部分生理生化指標(biāo)的改變進(jìn)行初步研究,是否與農(nóng)藥使用后稻株?duì)I養(yǎng)的改變有直接關(guān)系及其再猖獗的分子機(jī)制等還有待于進(jìn)一步研究。
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