5個藥用菊花品種類型主要化學成分的動態累積

成明超　李丹霞　王康才　李淑艷　郭慶海　陳志祥

摘要：研究藥用菊花紅心13號、NJK-2、優單6號、似貢2號、大花6號等品種類型木犀草苷、綠原酸、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧酸、揮發油、多糖等成分在花期的動態積累過程，為藥用菊花最佳采收期的確定提供依據。采用高效液相色譜法（HPLC）測定杭白菊5個品種類型花序6個開放程度的木犀草苷含量、綠原酸含量、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧酸含量，采用蒸餾法測定揮發油含量，采用分光光度法測定菊花多糖含量。結果表明，除似貢2號外，其余品種類型綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量最大值均出現于80%開放，即藥用菊花普遍采收時期；而似貢2號綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量最大值出現于胎菊時期。5個品種類型綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量最小值都出現在100%開放時；多糖和揮發油的含量則不同品種有較大差異，但總體呈現隨著開放程度增加而逐步下降的趨勢。

關鍵詞：藥用菊花；花期；木犀草苷；綠原酸；3，5-O-雙咖啡酰基奎寧酸；菊花多糖；揮發油；動態累積

中圖分類號： R284.1文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2014）01-0213-03

收稿日期：2013-05-27

基金項目：江蘇省科技支撐計劃（編號：BE2012353）；蘇北科技發展計劃（編號：BN2012081）。

作者簡介：成明超（1962—），男，江蘇濱海人，高級農藝師，主要從事農作物新品種新技術推廣、農產品安全檢測、農業機械推廣等農業相關工作。E-mail：bhxgqh@163.com。

通信作者：王康才，博士，教授，碩士生導師，主要從事中藥材資源的開發利用。E-mail：njwkc2002@126.com。藥用菊花為菊科菊屬植物菊（Chrysanthemum morifolium Ramat.）的干燥頭狀花序，藥茶兼用，具有散風清熱、平肝明目、清熱解毒的功效[1]，含有揮發油、黃酮類、綠原酸、多糖、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧酸等多種成分。《中華人民共和國藥典：一部》（2010年版）以綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧酸作為質量標準中的指標成分，并以高效液相色譜法測定其含量[1]。目前，對藥用菊花的研究主要集中于化學成分、藥理以及產地之間的鑒別等方面，對同一產地不同品種類型藥用菊花產品器官主要化學成分指標累積動態規律的報道較少。本研究在前期研究的基礎上，以杭白菊5個品種類型為材料，研究其不同開放程度的花序中揮發油、黃酮類、綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧酸、多糖的積累動態，以期為杭白菊最佳采收期的確定、綜合開發利用、質量評價等提供技術依據。

1材料與方法

1.1材料

紅心13號、NJK-2、優單6號、似貢2號、大花6號等材料為筆者所在課題組前期研究過程中選育的杭白菊（Chrysanthemum morifolium ‘Hangbaiju）品種類型，經南京農業大學園藝學院中藥材科學系王康才教授鑒定。每個栽培類型按花序不同開放程度（表1）分5次采摘。采收后12 h內將花序置于烘箱105 ℃殺青3 min，之后60 ℃烘干至恒重，打粉過100目篩，置于干燥器中備用。

表1藥用菊花花序開放程度標準

編號1花序開放程度1植物學性狀11未開放1舌狀花、管狀花都未開放，蕾期2120%開放1舌狀花開放10%，管狀花未開放，胎菊期3140%開放1舌狀花開放30%，管狀花開放10%4160%開放1舌狀花開放50%，管狀花開放30%5180%開放1舌狀花開放70%，管狀花開放50%，盛花期61100%開放1舌狀花、管狀花都全部開放

1.2方法

1.2.1綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧酸的含量測定依照《中華人民共和國藥典》（2010版）的方法。

1.2.2總黃酮含量測定標準溶液的制備：精確稱取蕓香苷標準品22.0 mg，用30%乙醇溶解，并轉入50 mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻即得濃度為0.44 mg/mL的標準溶液。

供試品溶液的制備：精確稱取過60目篩的樣品粉末約 1 g，加入70%乙醇20 mL，稱重，于60 ℃條件下超聲提取 30 min，稱重，補足重量，離心，取上清液作供試品。準確移取2 mL供試品溶液，加入5% NaNO2溶液0.3 mL，振蕩搖勻，放置6 min；加入10% Al（NO3）3溶液0.3 mL，振蕩搖勻，放置 6 min；加入4% NaOH溶液4 mL，用30%乙醇定容至10 mL，搖勻，放置15 min，測定總黃酮含量。

1.2.3揮發油含量測定精確稱取一定粉碎度的菊花 100 g，置于2 000 mL圓底燒瓶中浸泡10 h。參照《中華人民共和藥典：一部》（2010年版）附錄XD并作改進，加一定量飽和氯化鈉溶液與數粒玻璃珠，振搖混合后，連接揮發油測定器與回流冷凝管，自冷凝管上端加水至充滿揮發油測定器的刻度部分并溢流入燒瓶時為止；再從冷凝管上端加入2 mL石油醚，將燒瓶置于電熱套中加熱至沸，調溫并保持微沸，連續提取13 h后停止加熱，放置片刻，開啟測定器下端活塞將水緩緩放出；收集揮發油，無水硫酸鈉脫水，50 ℃水浴3 h揮去石油醚，得到淡黃色揮發油，精確稱重，計算提取率。

揮發油提取率=菊花中揮發油含量/菊花重量×100%

1.2.4菊花多糖的測定換算因素的測定：稱取過60目篩的菊花粉末10 g，用60 mL石油醚（60～90 ℃沸程）在70 ℃下回流脫脂2次，每次1 h，除去單糖和低聚糖；將殘渣加80 mL水90 ℃水浴提取2次，合并提取液，濃縮至 150 mL，加適量活性炭（約1%）脫色，過濾；濾液加5倍體積95%乙醇，靜置后抽濾，沉淀以100 mL水溶解，重復沉淀1次；沉淀以95%乙醇、無水乙醇、丙酮、乙醚多次洗滌，60 ℃干燥，得菊花多糖。稱取菊花多糖50.0 mg，置于100 mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻作儲備液。精確吸取儲備液 0.5 mL，加水至2 mL，按與測定標準曲線同樣的方法測定吸光度，并按f = m/（C×D）計算換算因素。式中，m為多糖重量（μg）；C為多糖液中葡萄糖濃度（μg/mL），D為多糖稀釋倍數。

樣品測定：精確稱取樣品粉末0.2 g，用80%乙醇浸泡過夜，再于索氏提取器中用80%乙醇回流2 h，殘渣揮去溶劑后繼續用水回流2 h，反復洗至250 mL容量瓶中，定容，搖勻成為樣品液。測定時精確吸取樣品液2.0 mL，按測定標準曲線的方法測其吸光度，按回歸方程求出供試液中葡萄糖含量，再按下式計算樣品中多糖含量。多糖含量=（C×D× f）/m×100%。式中：C為樣品液中葡萄糖的濃度（μg/mL），D為稀釋倍數，f為換算因素，m為樣品質量（μg）。

2結果與分析

2.15個杭白菊品種類型綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量累積規律

由表2可知，5個杭白菊品種類型不同開放程度綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量差異顯著。除似貢2號外，其余品種類型綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量最大值均出現于盛花期，即藥用菊花普遍采收時期；而似貢2號綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量最大值出現于胎菊期。5個品種類型綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量最小值，都出現在時期6（100%開放），說明過晚采收會影響菊花化學成分含量。表25個杭白菊品種類型不同開放程度綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量

2.25個杭白菊品種類型揮發油及菊花多糖積累規律

由圖1可知，5個杭白菊品種類型揮發油的積累除紅心

13號和NJK-2外均呈現先升高后降低的趨勢并于胎菊期（時期2）達到峰值。不同品種類型間揮發油含量存在差異，胎菊期大花6號揮發油含量較其他品種類型有一定優勢。

由圖2可知，除優單6號、大花6號菊花多糖含量于蕾期（時期1）達到最高外，其他品種類型菊花多糖的積累均在胎菊期（時期2）達到峰值，呈“7”形；不同品種類型間菊花多糖含量存在差異，其中似貢2號胎菊期（時期2）多糖含量較其他品種類型有較明顯的優勢。

3結論與討論

雖然藥用菊花高度雜合，其主要化學成分積累呈現較大不同，但不同品種類型菊花各項化學成分積累動態仍呈現一定的規律：大多數品種類型綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖

啡酰基奎寧、總黃酮的含量呈先上升后下降的趨勢，自蕾期開始逐漸增加，到80%開放程度時達到最高點，隨后降低。似貢2號中綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量胎菊期最高，之后隨著花器官開放而降低。綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧為藥典規定成分，黃酮類物質為藥用菊花品質評判的重要依據，因此在80%開放時采收，可以使藥用菊花中綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮達到最佳利用效力。

5個藥用菊花品種類型揮發油的積累除紅心13號和NJK-2外均呈現先升高后降低的趨勢并于胎菊期（時期2）達到峰值，多糖含量除優單6號、大花6號在蕾期（時期1）達到最高外，其他品種類型菊花多糖的積累均在胎菊期（時期2）達到峰值。大花6號多糖積累和似貢2號揮發油積累表現出一致性，均呈現先升高后降低的趨勢并于胎菊期（時期2）達到最大值。多糖和揮發油為影響茶用菊花口感的重要因素。本試驗中所有品種類型多糖、揮發油的最大值均出現于胎菊期或蕾期。因此，藥用菊花于胎菊期或蕾期采收口感較佳，但是考慮到藥用菊花藥典的規定，以胎菊期采收較適宜。

因藥用菊花與茶用菊花在品質要求上有所不同，本試驗結果顯示不同品種類型菊花各項化學成分積累動態有一定差異，茶用菊花與藥用菊花品質要求及分別于何時采收品質最佳的不同仍需要進一步研究。

本試驗所得的主要化學成分含量隨花朵開放程度變化的規律與前人的研究結果不同。胡碧波等研究發現杭白菊木犀草苷含量采摘初期變化不明顯，采摘后期呈下降趨勢[2]。楊俊等研究發現杭白菊綠原酸含量在整個采摘周期中無明顯變化[3]。蒲婧哲等研究發現5個杭菊栽培品種均在花朵70%開放期時綠原酸含量達到最高[4]。孫淑芳等研究發現杭白菊4個主栽品種綠原酸含量在花蕾期最高，胎菊期次之；木犀草苷含量胎菊期最高，幼菊期次之[5]。盛蒂等研究發現紅心白菊綠原酸含量在40%花朵開放程度時最高[6]。這些差異可能是由品種、生長環境、采收時間、加工方法、測定方法等因素造成的。雖然大多藥菊品種的成分累積呈現一定的規律性，胎菊期是較為合適的采收期，但是藥用菊花品種繁雜，針對不同品種的最適采收期仍需做進一步研究。

參考文獻：

[1]中華人民共和國藥典委員會. 中華人民共和國藥典：一部[M]. 北京：化學工業出版社，2010.

[2]胡碧波，蔣惠娣，楊俊，等. HPLC法測定不同采收期杭白菊中木犀草素及其苷的含量[J]. 浙江大學學報：醫學版，2004，33（1）：29-32.

[3]楊俊，蔣惠娣，戈震，等. 杭白菊綠原酸及其他成分的含量在采摘期中的動態變化[J]. 中國藥學雜志，2003，38（11）：833-836.

[4]蒲婧哲，張青云. 杭菊中綠原酸含量花期動態積累研究[J]. 安徽醫藥，2007，11（6）：522-523.

[5]孫淑芳，沈學根，張新鳳，等. 采收期對杭白菊4個主栽品種功效成分的影響[J]. 中國中藥雜志，2011，36（21）：2945-2949.

[6]盛蒂，朱蘭保.不同栽培類型、不同開放程度菊花中總黃酮和綠原酸含量研究[J]. 食品工業科技，2012，33（2）：157-159.

樣品測定：精確稱取樣品粉末0.2 g，用80%乙醇浸泡過夜，再于索氏提取器中用80%乙醇回流2 h，殘渣揮去溶劑后繼續用水回流2 h，反復洗至250 mL容量瓶中，定容，搖勻成為樣品液。測定時精確吸取樣品液2.0 mL，按測定標準曲線的方法測其吸光度，按回歸方程求出供試液中葡萄糖含量，再按下式計算樣品中多糖含量。多糖含量=（C×D× f）/m×100%。式中：C為樣品液中葡萄糖的濃度（μg/mL），D為稀釋倍數，f為換算因素，m為樣品質量（μg）。

2結果與分析

2.15個杭白菊品種類型綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量累積規律

由表2可知，5個杭白菊品種類型不同開放程度綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量差異顯著。除似貢2號外，其余品種類型綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量最大值均出現于盛花期，即藥用菊花普遍采收時期；而似貢2號綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量最大值出現于胎菊期。5個品種類型綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量最小值，都出現在時期6（100%開放），說明過晚采收會影響菊花化學成分含量。表25個杭白菊品種類型不同開放程度綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量

2.25個杭白菊品種類型揮發油及菊花多糖積累規律

由圖1可知，5個杭白菊品種類型揮發油的積累除紅心

13號和NJK-2外均呈現先升高后降低的趨勢并于胎菊期（時期2）達到峰值。不同品種類型間揮發油含量存在差異，胎菊期大花6號揮發油含量較其他品種類型有一定優勢。

由圖2可知，除優單6號、大花6號菊花多糖含量于蕾期（時期1）達到最高外，其他品種類型菊花多糖的積累均在胎菊期（時期2）達到峰值，呈“7”形；不同品種類型間菊花多糖含量存在差異，其中似貢2號胎菊期（時期2）多糖含量較其他品種類型有較明顯的優勢。

3結論與討論

雖然藥用菊花高度雜合，其主要化學成分積累呈現較大不同，但不同品種類型菊花各項化學成分積累動態仍呈現一定的規律：大多數品種類型綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖

啡酰基奎寧、總黃酮的含量呈先上升后下降的趨勢，自蕾期開始逐漸增加，到80%開放程度時達到最高點，隨后降低。似貢2號中綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量胎菊期最高，之后隨著花器官開放而降低。綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧為藥典規定成分，黃酮類物質為藥用菊花品質評判的重要依據，因此在80%開放時采收，可以使藥用菊花中綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮達到最佳利用效力。

5個藥用菊花品種類型揮發油的積累除紅心13號和NJK-2外均呈現先升高后降低的趨勢并于胎菊期（時期2）達到峰值，多糖含量除優單6號、大花6號在蕾期（時期1）達到最高外，其他品種類型菊花多糖的積累均在胎菊期（時期2）達到峰值。大花6號多糖積累和似貢2號揮發油積累表現出一致性，均呈現先升高后降低的趨勢并于胎菊期（時期2）達到最大值。多糖和揮發油為影響茶用菊花口感的重要因素。本試驗中所有品種類型多糖、揮發油的最大值均出現于胎菊期或蕾期。因此，藥用菊花于胎菊期或蕾期采收口感較佳，但是考慮到藥用菊花藥典的規定，以胎菊期采收較適宜。

因藥用菊花與茶用菊花在品質要求上有所不同，本試驗結果顯示不同品種類型菊花各項化學成分積累動態有一定差異，茶用菊花與藥用菊花品質要求及分別于何時采收品質最佳的不同仍需要進一步研究。

本試驗所得的主要化學成分含量隨花朵開放程度變化的規律與前人的研究結果不同。胡碧波等研究發現杭白菊木犀草苷含量采摘初期變化不明顯，采摘后期呈下降趨勢[2]。楊俊等研究發現杭白菊綠原酸含量在整個采摘周期中無明顯變化[3]。蒲婧哲等研究發現5個杭菊栽培品種均在花朵70%開放期時綠原酸含量達到最高[4]。孫淑芳等研究發現杭白菊4個主栽品種綠原酸含量在花蕾期最高，胎菊期次之；木犀草苷含量胎菊期最高，幼菊期次之[5]。盛蒂等研究發現紅心白菊綠原酸含量在40%花朵開放程度時最高[6]。這些差異可能是由品種、生長環境、采收時間、加工方法、測定方法等因素造成的。雖然大多藥菊品種的成分累積呈現一定的規律性，胎菊期是較為合適的采收期，但是藥用菊花品種繁雜，針對不同品種的最適采收期仍需做進一步研究。

參考文獻：

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[6]盛蒂，朱蘭保.不同栽培類型、不同開放程度菊花中總黃酮和綠原酸含量研究[J]. 食品工業科技，2012，33（2）：157-159.

樣品測定：精確稱取樣品粉末0.2 g，用80%乙醇浸泡過夜，再于索氏提取器中用80%乙醇回流2 h，殘渣揮去溶劑后繼續用水回流2 h，反復洗至250 mL容量瓶中，定容，搖勻成為樣品液。測定時精確吸取樣品液2.0 mL，按測定標準曲線的方法測其吸光度，按回歸方程求出供試液中葡萄糖含量，再按下式計算樣品中多糖含量。多糖含量=（C×D× f）/m×100%。式中：C為樣品液中葡萄糖的濃度（μg/mL），D為稀釋倍數，f為換算因素，m為樣品質量（μg）。

2結果與分析

2.15個杭白菊品種類型綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量累積規律

由表2可知，5個杭白菊品種類型不同開放程度綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量差異顯著。除似貢2號外，其余品種類型綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量最大值均出現于盛花期，即藥用菊花普遍采收時期；而似貢2號綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量最大值出現于胎菊期。5個品種類型綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量最小值，都出現在時期6（100%開放），說明過晚采收會影響菊花化學成分含量。表25個杭白菊品種類型不同開放程度綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量

2.25個杭白菊品種類型揮發油及菊花多糖積累規律

由圖1可知，5個杭白菊品種類型揮發油的積累除紅心

13號和NJK-2外均呈現先升高后降低的趨勢并于胎菊期（時期2）達到峰值。不同品種類型間揮發油含量存在差異，胎菊期大花6號揮發油含量較其他品種類型有一定優勢。

由圖2可知，除優單6號、大花6號菊花多糖含量于蕾期（時期1）達到最高外，其他品種類型菊花多糖的積累均在胎菊期（時期2）達到峰值，呈“7”形；不同品種類型間菊花多糖含量存在差異，其中似貢2號胎菊期（時期2）多糖含量較其他品種類型有較明顯的優勢。

3結論與討論

雖然藥用菊花高度雜合，其主要化學成分積累呈現較大不同，但不同品種類型菊花各項化學成分積累動態仍呈現一定的規律：大多數品種類型綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖

啡酰基奎寧、總黃酮的含量呈先上升后下降的趨勢，自蕾期開始逐漸增加，到80%開放程度時達到最高點，隨后降低。似貢2號中綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮的含量胎菊期最高，之后隨著花器官開放而降低。綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧為藥典規定成分，黃酮類物質為藥用菊花品質評判的重要依據，因此在80%開放時采收，可以使藥用菊花中綠原酸、木犀草苷、3，5-O-雙咖啡酰基奎寧、總黃酮達到最佳利用效力。

5個藥用菊花品種類型揮發油的積累除紅心13號和NJK-2外均呈現先升高后降低的趨勢并于胎菊期（時期2）達到峰值，多糖含量除優單6號、大花6號在蕾期（時期1）達到最高外，其他品種類型菊花多糖的積累均在胎菊期（時期2）達到峰值。大花6號多糖積累和似貢2號揮發油積累表現出一致性，均呈現先升高后降低的趨勢并于胎菊期（時期2）達到最大值。多糖和揮發油為影響茶用菊花口感的重要因素。本試驗中所有品種類型多糖、揮發油的最大值均出現于胎菊期或蕾期。因此，藥用菊花于胎菊期或蕾期采收口感較佳，但是考慮到藥用菊花藥典的規定，以胎菊期采收較適宜。

因藥用菊花與茶用菊花在品質要求上有所不同，本試驗結果顯示不同品種類型菊花各項化學成分積累動態有一定差異，茶用菊花與藥用菊花品質要求及分別于何時采收品質最佳的不同仍需要進一步研究。

本試驗所得的主要化學成分含量隨花朵開放程度變化的規律與前人的研究結果不同。胡碧波等研究發現杭白菊木犀草苷含量采摘初期變化不明顯，采摘后期呈下降趨勢[2]。楊俊等研究發現杭白菊綠原酸含量在整個采摘周期中無明顯變化[3]。蒲婧哲等研究發現5個杭菊栽培品種均在花朵70%開放期時綠原酸含量達到最高[4]。孫淑芳等研究發現杭白菊4個主栽品種綠原酸含量在花蕾期最高，胎菊期次之；木犀草苷含量胎菊期最高，幼菊期次之[5]。盛蒂等研究發現紅心白菊綠原酸含量在40%花朵開放程度時最高[6]。這些差異可能是由品種、生長環境、采收時間、加工方法、測定方法等因素造成的。雖然大多藥菊品種的成分累積呈現一定的規律性，胎菊期是較為合適的采收期，但是藥用菊花品種繁雜，針對不同品種的最適采收期仍需做進一步研究。

參考文獻：

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[6]盛蒂，朱蘭保.不同栽培類型、不同開放程度菊花中總黃酮和綠原酸含量研究[J]. 食品工業科技，2012，33（2）：157-159.