粘蛋白MUC1在膀胱移行細胞癌中的表達研究

李 娟，趙桂桂

（鄭州華信學院， 河南 鄭州 451150）

粘蛋白MUC1在膀胱移行細胞癌中的表達研究

李 娟，趙桂桂

（鄭州華信學院， 河南 鄭州 451150）

目的：檢測粘蛋白MUC1在膀胱移行細胞癌和膀胱良性病變及正常膀胱組織中的表達,探討其在膀胱移性細胞癌診斷、預后和治療中的意義.方法：采用免疫組化S-P方法和彩色醫學圖文分析系統，對40例膀胱移行細胞癌組織，14例腺性膀胱炎組織（對照組）和17例正常膀胱組織（對照組）粘蛋白MUC1表達進行檢測分析；所有數據均用SPSS13.0統計軟件包進行統計學處理.結果：MUC1在膀胱移行細胞癌組織中表達高于正常膀胱組織，兩者差異性有顯著性意義(P＜0.05)；與病人年齡、性別、結石、感染、首發或復發等無明顯相關(P＞0.05).結論：從正常膀胱粘膜組織到腺性膀胱炎再向膀胱癌的演進過程中MUC1的表達具有增多的趨勢，MUC1 是反應膀胱粘膜上皮細胞代謝活躍的增生特征，而不是惡性變的標志.

膀胱腫瘤；MUC1；免疫組織化學

近年來，我國部分城市腫瘤發病率報告顯示膀胱癌發病率有增高趨勢[1].腫瘤的浸潤和轉移是更為復雜的分 子生物學變化過程.癌細胞的浸潤和轉移過程中會遇到一系列的組織屏障,腫瘤細胞穿過組織屏障后,在自分泌移動因子和旁分泌移動因子的作用下移動,到達其他器官和組織繼續生長[2].MUC1是一種多形態的高糖基化、高相對分子質量的跨膜糖蛋白.MUC1在粘膜表面可產生潤滑作用,對保護上皮免受外界理化因素侵襲起到很重要的屏障作用,隨著對 MUC1研究的逐漸深入，專家們發現 MUC1是一種具有多種功能的分子，在調節細胞間的相互作用，參與信號轉導以及腫瘤的侵襲轉移發生、發展和調節機體免疫反應中起著重要的作用[3].為了進一步探討膀胱移行細胞癌發生、發展及轉移的根本原因，本研究針對MUC1在膀胱移行細胞癌中的表達進行了相關探討.

材料與方法

1 材料

1.1 標本

40例膀胱移行細胞癌（BTCC）標本來自新鄉醫學院第一、三附屬醫院和河南省人民醫院；所有患者均進行手術治療；膀胱腫瘤患者中，男性 29例，女性 11例，年齡 24-82歲，平均 56.12歲；所有病例經醫院病理診斷為膀胱移行細胞癌，設為 BTCC組.同時收集 14例腺性膀胱炎標本及 17例正常膀胱組織（包括膀胱炎）作為對照組.對照組中：男性13例，女性 18例，年齡 20-82歲，平均 54.5歲.所有材料均經過 10%緩沖甲醛固定，石蠟包埋，所有病例切片均經過復查，再次診斷分級、分期.

1.2 切片處理

研究用標本在光鏡下再次確診，進行組織學分級.所用蠟塊放置冰箱 24h后均切成 2-3um切片(載玻片提前經多聚 -L-賴氨酸防脫片處理)，在 70℃烤箱烤 10h取出備用.

2 免疫組織化學方法

2.1 試劑：鼠抗人 MUC1單克隆抗體；通用型免疫組織化學超敏 S-P試劑盒；S-P試劑盒；PBS緩沖液.

2.2 陽性對照:MUC1用試劑說明書中推薦的乳腺癌組織切片作為陽性對照，結果陽性.

2.3 陰性對照：用 PBS緩沖液替代抗孵育切片，結果陰性. 2.4 結果判定標準 MUC1的組織表達以細胞漿內靠近包膜側出現棕黃色顆粒為陽性細胞，取 10個高倍鏡視野每個視野計數 100個細胞，每個視野下出現陽性細胞多于 5個為陽性表達，小于5個或沒有出現視為陰性表達.

3 統計學處理

應用 SPSS 13.0 for Windows統計軟件包進行統計學分析,MUC1的表達與臨床病理分級、分期及部分生物學參數之間的關系采用四格表 χ2進行檢驗,其檢驗水準 a=0.05，P<0.05認為具有統計學意義.

結果

1 粘蛋白MUC1的表達

MUC1染色以細胞漿或細胞膜內出現棕黃色顆粒為陽性細胞.BTCC組40例中MUC1陽性表達率為82.5%(33/40)；腺性膀胱炎組陽性表達率為64.3%(9/14)；正常組織組陽性表達率為23.5%(4/17).在淺表組、浸潤組中的陽性表達率分別為62.5%，92.7%.MUC1的陽性表達率在腫瘤組和腺性膀胱炎組間的差異性無顯著性意義(P>0.05)；MUC1的陽性表達率在正常組和腺性膀胱炎組間的差異性有顯著性意義(P<0.05)；在與膀胱移行細胞癌相關的幾種臨床生物學特征統計中，年齡組中大于 50歲與小于 50歲的陽性表達率分別是 88.9%，78.7%，二者差異性無顯著性意義(P>0.05)，吸煙組與非吸煙組陽性表達率分別為 90.2%，66.7%，二者差異性有顯著性意義(P<0.05)；合并感染或結石組與單純腫瘤組異常表達率分別為 88.9%，90.2%，二者差異性無顯著性意義(P>0.05).

MUC1在膀胱移行細胞癌（病理分級）及對照組中的表達

討論

1 MUC1的作用及在腫瘤發病及侵襲中的作用

MUC1胞外段決定著 MUC1特異性的空間結構和免疫原性，是細胞表面最先與機體免疫系統接觸的膜表面分子之一[4].MUC1在正常上皮組織中起著重要作用：MUC1可能參與和選擇素的相互作用,促進細胞-細胞間的相互作用,有利于胚泡植入的發生[5].Uehara等報道 MUC1基因轉錄后可發生選擇性剪切，形成多種剪切體，雖然對于 MUC1基因轉錄后發生選擇性剪切的機制目前仍不清楚，但這種選擇性剪切可能與細胞的癌變有一定的關系[6].另外，血管生成在腫瘤的發展和轉移過程中發揮著重要作用，目前已發現在一些腫瘤中 MUC1與血管生成因子自發表達相關，從而影響腫瘤后續的一系列生物學行為.

2 MUC1在膀胱移行細胞癌中的表達及意義

研究證明，在膀胱移行細胞癌中 MUC1發生質與量的改變，并伴隨著一系列的結構和功能改變.MUC1在腫瘤組陽性表達率是 82.5%，在腺性膀胱炎組陽性表達率是64.3%，兩組間差異性無顯著性意義(p>0.05)；正常組陽性表達率是 23.5%，與腺性膀胱炎組和腫瘤組之間的差異性均無顯著性意義(p<0.05)，實驗結果提示 MUC1從正常膀胱粘膜組織到腺性膀胱炎再向膀胱癌的演進過程中其表達有增多的趨勢，MUC1是反應膀胱粘膜上皮細胞代謝活躍的增生特征，而不是惡性變的標志.

3 MUC1在腫瘤治療中的作用

在上皮細胞惡性轉化過程中,MUC1發生質與量的改變,其基因轉錄產物亦發生異常選擇性剪接而形成新的抗原表位.由于 MUC1在腫瘤細胞上異常表達,使之具有區別于正常 MUC1的腫瘤特異性抗原,而成為腫瘤生物學治療的新靶點[7].此外 MUC1的多肽骨架中含有許多連續重復序列，可非MHC(主要組織相容性復合體)限制性活化細胞毒性 T淋巴細胞(CILs)、特異性殺傷腫瘤細胞，故可設計含有一定數量連續重復序列的肽作為瘤苗來誘發針對腫瘤細胞的特異性細胞免疫應答，從而消除了糖基化對肽鏈表位免疫原性的影響.Murray等將 188Rc標記 C595單抗，此種復合物具有較高的免疫活性和特異性，體內外實驗證實能特異定位在膀胱癌組織，可用于膀胱癌特異性靶向治療[8].

總之，隨著 MUC1在泌尿系腫瘤診斷和治療的研究不斷增多，MUC1在腫瘤的生物學特性、診斷和治療方面扮演著重要角色，充當著腫瘤標志物和免疫治療靶標的雙重身份.由于 MUC1的基因定位已明確，以 MUC1為靶點的基因治療將是未來的發展方向.通過基因調節手段改變 MUC1在早期癌癥的表達有可能影響到細胞的粘附和極性，從而降低癌轉移的危險.與 MUC1相關的腫瘤疫苗具有良好的應用前景.

〔1〕張薇，項永兵，劉振偉，等.1973-1999 年上海市區老年人惡性腫瘤發 病趨勢分析 [J]. 中華 老 年 醫 學 雜 志,2005,24 (9):701-704.

〔2〕夏術階.膀胱腫瘤實驗研究的發展現狀與展望[J].中華實驗外科雜志,2004,219(3):263-264.

〔3〕Julian J,Carson DD.Formation of MUC1 metabolic Complex is conserved in tumor-derived and normal epithelialcells [J].Biochem Biophys Res Commun, 2002,17，293(4):1183-1190.

〔4〕Werdelin O,Meldal M,Jensen T,et al.Processing of glycans on glycoprotein and gly-colpeptide antigens in antigen-presenting cells[J].Proc Natl Acad Sci USA, 2002,99(15):9611-9613.

〔5〕Carson DD,Julian J,Lessey BA,et al.MUC1 is a scaffold for selectin ligands in the human uterus[J].Front Biosci, 2006,11(4):2903-2908.

〔6〕OConner JC,Julian J,Lim SD,et a1.MUC1 expression in human prostate cancer cell lines and primary tumors[J]. Prostate Cancer Prostatic Dis,2005,8(1):36-44.

〔7〕Simms MS,Murray A,Denton G,et al.Bishop MC Production and characterisation of a C595 antibody-99m Tc conjugate for immunoscintigraphy of bladder cancer[J].U rol Res,2001,29(1):13-19.

〔8〕Murray A,Simms MS,Scholfield DP,et al.Production and characterization of 188Re- C595 antibody for radioimmunotherapy of transitional cell bladder cancer[J]. Nucl Med,2001,42(5):726-732.

R737.14

A

1673-260X（2014）08-0063-02