頭頸部鱗狀細胞癌組織中有絲分裂阻滯缺陷蛋白2的表達變化

張 峰，王 丹

(聊城市第二人民醫院，山東臨清252600)

研究［1］發現，幾乎在所有人類腫瘤中能發現非整倍體腫瘤細胞，它與大多數腫瘤的發生、進展有密切關系，這種非整倍體狀態稱為染色體不穩定性。在正常染色體分裂中，有絲分裂阻滯缺陷蛋白2(MAD2)能確保紡錘體微管與染色體動粒準確連接，是有絲分裂檢查點調控的重要基因之一，能確保染色體正常分離，如果MAD2表達異常，會導致染色體異常分離，形成非整數倍體，導致腫瘤的發生或進展［2］。目前在多種腫瘤中研究發現MAD2表達異常下調［3～6］。本研究利用免疫組化SP法對頭頸部鱗狀細胞癌腫瘤組織中的MAD2進行了檢測，觀察其表達變化，并探討其意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2009年1月～2011年1月聊城市第二人民醫院收治的頭頸部鱗狀細胞癌患者101例，男59例，女42例;年齡28～61歲。腫瘤位于頜下區8例、頸前區21例、頸動脈鞘區18例、鼻咽部43例、頸背部11例。病理檢查證實為鱗狀細胞癌;臨床分期為T1期62例、T2期29例、T3期6例、T4期4例;有淋巴結轉移者58例。手術切除腫瘤組織、距離腫瘤邊界1 cm的正常肌肉組織作為腫瘤旁組織。選擇同期頭頸部組織活檢正常的患者49例(男28例、女21例，年齡26～63歲)，取其頭頸部肌肉組織作對照。

1.2 MAD2檢測方法 采用免疫組化SP法檢測MAD2，檢測試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司。上述各組織標本用10%甲醛固定，石蠟包埋，4 μm厚連續切片，常規HE染色觀察(腫瘤組織切片選取實性組織部分制作組織芯片，保證用于免疫組化染色的切片腫瘤細胞數＞70%)，然后常規脫蠟、梯度酒精入水、免疫組化染色。染色完成后24 h內在光鏡下閱片，光鏡下選取10個視野，MAD2定位于細胞核和(或)細胞質，呈棕黃色均勻細顆粒。陽性細胞百分比＜5%為陰性、≥5%為陽性。

1.3 統計學方法 采用SPSS14.0統計學軟件。計數資料比較用χ2檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

腫瘤組織、腫瘤旁肌肉組織、正常頭頸部肌肉組織中MAD2的陽性表達率分別為90.1%(91/101)、53.5%(54/101)、46.9%(23/49);前者與后兩者相比，P 均 ＜0.05;后兩者相比，P ＞0.05。有、無淋巴結轉移的頭頸部鱗狀細胞癌患者腫瘤組織中MAD2陽性表達率分別為 98.3%(57/58)、81.4%(35/43)，兩者相比，P ＜0.05。

3 討論

細胞分裂是活細胞繁殖的基本過程，其中染色體正常分離是其中最重要的一個環節，分離過程是在多個檢查點共同監控下完成的，此監控系統能有效識別紡錘體微管與染色體動粒的連接，從而確保整個過程正常有序［7］。MAD2是監控系統中檢查點的重要成分，MAD2異常表達會導致酸化和去磷酸化調節機制失常，從而引起細胞有絲分裂的阻滯，最終使細胞形成多倍體，而多倍體細胞往往會導致腫瘤的發生［8］。目前已在卵巢癌、肝癌、鼻咽癌、前列腺癌等腫瘤中發現MAD2呈異常表達［9］。

有學者［10］認為MAD2的表達不同于其他癌癥基因或抑癌基因，其表達并非只會高或低，而是在不同腫瘤或腫瘤發展的不同階段表現為過高或過低，這兩種情況均會導致染色體分離異常。本研究結果顯示，頭頸部鱗狀細胞癌患者的腫瘤組織、腫瘤旁組織及正常頭頸部肌肉組織中MAD2的陽性表達率逐漸下降，腫瘤組織中MAD2呈異常高表達，未發現有低表達者。有研究［11］發現，MAD2與胃黏膜病變密切相關，隨著病情加重MAD2的表達水平增高，其中胃癌組織中MAD2的表達水平明顯高于胃不典型增生組織，這一結果與本研究結果類似。

此外，本研究還發現，有淋巴結轉移的頭頸部鱗狀細胞癌患者的腫瘤組織中MAD2陽性表達率明顯高于無淋巴結轉移者，說明MAD2能在一定程度上反映腫瘤的侵襲情況，對頭頸部鱗狀細胞癌的進展評估有一定參考價值。有研究［12］發現，在胃癌、卵巢癌組織中MAD2的表達與腫瘤分化也有密切關系。這可能是MAD2異常導致檢查點缺損，其異常表達越明顯，產生的非整倍體細胞就會越多，周圍環境變化使非整倍體細胞逃避了凋亡，從而演變出更具侵襲性的惡性腫瘤細胞［13］，但目前尚無直接證據，需進一步研究證實。

本研究對所有患者隨訪3年發現，術后生存周期為1 a及2 a者其腫瘤組織中MAD2表達陽性率高于3 a者，說明MAD2與腫瘤治療預后可能有一定關聯，是否可作為預后評估參考指標還有待于進一步研究。

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