參花膠囊的HPLC指紋圖譜研究及4種成分含量測定

肖會敏，何 悅，黨 珍，謝艷華，王四旺(第四軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院新藥研究中心，西安 710032)

參花膠囊由紅花、丹參、菊花等中藥組成，主要用于活血化瘀、行氣止痛等。處方中主要活性成分有：丹參中的丹參酮類、丹酚酸類[1-3]，川芎中的川芎嗪、阿魏酸等[4]，紅花中的紅花黃色素、羥基紅花黃色素A等[5-6]，赤芍中的單萜及單萜苷類化合物、苷類等[7]，菊花中的黃酮類化合物和綠原酸等[8]，山楂中的黃酮類、黃烷及其聚合物類、三萜類和有機(jī)酸類等[9]，甘草主要活性成分含有多種黃酮類化合物、三萜類化合物以及香豆素類、氨基酸、多種生物堿和多種有機(jī)酸等[10-11]。本處方采用醇提與水提等工藝制成。為表征本處方中的主要活性成分，作者采用高效液相色譜(HPLC)法對該制劑進(jìn)行分析，參照文獻(xiàn)方法[12]進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；同時，對參花膠囊中的4種成分即綠原酸、羥基紅花黃色素A、迷迭香酸、丹酚酸B進(jìn)行定量分析。

1 儀器與試藥

1.1儀器 島津高效液相色譜儀，型號Prominence UFLC，配LC-20AD雙泵，SPD-M20A二極管陣列檢測器，SIL-20ACHT自動進(jìn)樣器，CTO-20A柱溫箱，LC/Labsoluion色譜工作站(日本島津公司)；BSA124S電子分析天平(德國賽多利斯公司)；KQ-300DE數(shù)控超聲波發(fā)生器(昆山超聲儀器有限公司)。

1.2試藥 乙腈、甲醇，色譜級(美國Fish公司)；超純水，由美國Millipore純水儀制備(美國millipore公司)；丹酚酸B、迷迭香酸、綠原酸、羥基紅花黃色素A對照品均購自中國藥品生物制品檢定研究院；參花膠囊(批號20090908，20090918，20090928，20130601，20130602，20130603，20130604，20130605，20130606，20130607)，第四軍醫(yī)大學(xué)藥物研究所研制。

2 指紋圖譜測定方法與結(jié)果

2.1色譜條件 色譜柱：Kromasil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相：乙腈(A)-5.0 g·L-1磷酸水溶液溶液(B)，梯度洗脫：0～15 min，A 5%→21%；……