HPLC-ELSD法測(cè)定含三七中成藥的皂苷成分的含量

王 芮，郭 華(.解放軍307醫(yī)院藥學(xué)部，北京 0007；2.軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院門診部，北京 00850)

三七皂苷是中藥三七的主要成分，具有擴(kuò)張血管、降低心肌耗氧量、抑制血小板凝集、延長(zhǎng)凝血時(shí)間、降血脂、清除自由基、抗炎、抗氧化等藥理作用[1]。按照《中國(guó)藥典》(2010年版)含三七的中成藥共61個(gè)，劑型包含膠囊劑、片劑、丸劑、顆粒劑、合劑、搽劑、散劑、貼膏劑、滴丸劑、錠劑、氣霧劑、栓劑12種[2]。本文主要在文獻(xiàn)方法[3-7]的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步優(yōu)化并建立含三七中成藥中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和Rb1的含量測(cè)定方法，以期對(duì)中成藥中的三七成分進(jìn)行更好地質(zhì)量控制。

1 儀器與試藥

1.1儀器 Aglient 1100高效液相色譜儀：配有自動(dòng)脫氣機(jī)，四元泵，自動(dòng)進(jìn)樣器，DAD檢測(cè)器，Chemstation 3D工作站，35900E數(shù)模轉(zhuǎn)換連接盒；蒸發(fā)光檢測(cè)器ELSD2000 (Alltech，America)。

1.2試藥 乙腈為色譜純，由Fisher公司提供，水為純凈水。三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院。待測(cè)含三七的中成藥樣品為市售。

2 方法與結(jié)果

2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性 色譜柱：Grace Previl C18(250 mm×4.6 mm， 5 μm)，以乙腈為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相B，色譜條件為：0～15 min (A∶B 17∶83)→30～60 min (A∶B 30∶70)。ELSD檢測(cè)器：漂移管溫度107 ℃，噴霧管溫度107 ℃，氣流3.0 L·min-1，不分流。理論板數(shù)按人參皂苷R1計(jì)算應(yīng)不低于5 000。

2.2供試品溶液的制備 取成藥適量，研細(xì)，過(guò)60目篩，取粉末約1.0 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲提取0.5 h后，用甲醇補(bǔ)足缺失質(zhì)量，搖勻?yàn)V過(guò)，棄去初濾液，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。

2.3對(duì)照品溶液的制備 精密稱取三七皂苷R1對(duì)照品、人參皂苷Rg1對(duì)照品和人參皂苷Rb1對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL含三七皂苷R1 0.1 mg、人參皂苷Rg1 0.4 mg和人參皂苷Rb1 0.4 mg的混合對(duì)照品溶液，即得。……