竇 勤,閆 明,彭曉明,斯拉甫·艾白,李建梅*( 1.新疆維吾爾自治區維吾爾醫藥研究所,烏魯木齊 830049;2.新疆維吾爾醫方劑學實驗室,烏魯木齊 830049)
白癜風是一種臨床上常見的獲得性的色素脫失性皮膚病,發病率約為4%,病因尚不清楚,雖然白癜風的治療藥物很多,但有效而不良反應少的藥物仍然較少[1]。在維吾爾醫治療白癜風的諸多方劑中,本文遴選出具有代表性的復方制劑驅白艾力勒思亞散,通過酶學細胞實驗篩選對小鼠B16細胞增殖、酪氨酸酶活性以及黑素生成的影響。酪氨酸酶活性是研究色素障礙性疾病的靶點[2-3],維吾爾醫對白癜風的治療積累了不少成功經驗,本實驗采用小鼠B16黑素瘤細胞為模型,研究驅白艾力勒思亞散乙醇提取物對小鼠B16細胞的細胞增殖活性、酪氨酸酶活性以及黑素生成量的影響,探討其治療白癜風的作用機制。
1.1儀器 倒置顯微鏡(LaiKa公司);自動酶標儀(MODEL550 BIO-RAD)。
1.2試藥 胎牛血清和RPMI1640培養基,均由美國Gibco公司提供;二甲基亞砜(DMSO)、聚乙二醇辛基苯基醚(TritonX-100)、 L-多巴、四甲基偶氮唑藍 (MTT),購自美國Sigma公司;1640培養基(含2種抗生素:100 μg·mL-1鏈霉素、100 U·mL-1青霉素)。驅白艾力勒思亞散由新疆維吾爾自治區維吾爾醫藥研究所自制;選擇甲氧沙林(8-MOP)作為陽性對照藥,該藥由重慶華邦制藥股份有限公司生產,實驗時用二甲基亞砜溶解成低、中、高(10,50,100 μmol·L-1)3個濃度。
1.3細胞株 中國科學院上海細胞研究所提供(小鼠B16黑素瘤細胞株)。
2.1乙醇提取物的制備 取適量驅白艾力勒思亞散在烘箱中適溫焙干后,粉碎過篩,稱取過篩后的粉末10 g,置于容器內,加入100 mL體積分數90%乙醇溶液,密封,均勻浸泡。……