乙型肝炎病毒標(biāo)志物與HBV-DNA定量相關(guān)性分析

孫淑杰，翟慶玲，王 輝

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院 肝病中心，北京100050)

HBV感染是全球性的公共衛(wèi)生問題，據(jù)WHO報(bào)道，全球約20億人曾感染過HBV，其中3.5億人為慢性感染者，每年約有100萬人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝細(xì)胞癌。我國(guó)是乙型肝炎的高流行區(qū)，人群HBV攜帶者約為10%，HBV攜帶者超過1.2億[1，2]。為了探討HBV血清學(xué)標(biāo)志物與HBV-DNA定量?jī)烧咧g的相關(guān)性，我們運(yùn)用兩種方法同時(shí)檢測(cè)乙肝病毒感染者血清，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本來源2012年1月-2013年1月我院門診及住院患者，進(jìn)行乙肝兩對(duì)半及HBV-DNA定量檢測(cè)的共650例。將上述患者根據(jù)乙肝血清標(biāo)志物分為HBsAg、HBeAg、抗-HBc(“大三陽(yáng)”)一組；HBsAg、抗-HBe，抗-HBc(“小三陽(yáng)”)一組；HBsAg、抗-HBc一組；抗-HBs，抗-HBe，抗-HBc一組；抗-HBe、抗-HBc一組。

1.2儀器和試劑采用上海浩源生物科技有限公司的乙型肝炎病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光定量PCR法)，用Roche Light Cycler480實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀檢測(cè)HBV-DNA；HBV血清學(xué)標(biāo)志物ELISA法檢測(cè)使用上海科華生物工程股份有限公司生產(chǎn)的試劑盒。所用儀器為安圖生物公司PHOMO酶標(biāo)儀。化學(xué)發(fā)光法應(yīng)用ARCHITECT i2000全自動(dòng)免疫檢驗(yàn)系統(tǒng)，以及美國(guó)雅培公司配套試劑。

1.3檢測(cè)方法乙肝血清標(biāo)志物的檢測(cè)：門診患者采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)，住院患者采用化學(xué)發(fā)光法。HBV-DNA的檢測(cè)：采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法，嚴(yán)格按照PCR儀和試劑說明書操作，陽(yáng)性結(jié)果>1×103copies/ml。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

我們將650例患者進(jìn)行HBV血清標(biāo)志物和HBV-DNA定量檢測(cè)，本次研究顯示，乙肝血清標(biāo)志物各模式中HBsAg，HBeAg，抗-HBc組HBV-DNA含量最高平均 3.48×107，陽(yáng)性率為96.2%；218例HBsAg，抗-HBe，抗-HBc陽(yáng)性模式中其HBV-DNA陽(yáng)性率為48.6%，HBV-DNA定量值1.62×105；133例HBsAg、抗-HBc陽(yáng)性模式中其HBV-DNA陽(yáng)性率為37.6%,結(jié)果詳見表1。

表1 不同乙肝血清標(biāo)志物模式與HBV DNA定量結(jié)果對(duì)比分析

3 討論

我國(guó)是乙型肝炎病毒感染的高流行區(qū)，不僅人群感染率高，而且有些HBV感染可能由于外周耐受等影響轉(zhuǎn)變?yōu)槁愿腥尽；颊卟粌H受病情折磨，還要承受來自社會(huì)方面的輿論壓力，準(zhǔn)確的診斷對(duì)于

及時(shí)治療和改善預(yù)后具有重要意義。

根據(jù)結(jié)果顯示，不同感染模式下，HBV DNA含量表現(xiàn)是不同的，HBsAg、HBeAg、抗-HBc陽(yáng)性(“大三陽(yáng)”)平均值較高，均在1.0×107copies/ml以上；陽(yáng)性率為96.2%，與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道較一致[3]。其次為HBsAg，抗-HBe，抗-HBc陽(yáng)性感染模式，平均值在 1.0×105copies/ml以上。HBV DNA的存在是HBV感染最直接、最靈敏和最特異的檢測(cè)指標(biāo)。也是判定HBV感染者病毒是否復(fù)制和當(dāng)前有無傳染性的主要標(biāo)志。HBeAg陽(yáng)性，體內(nèi)HBV復(fù)制活躍，血清含有高水平的HBV DNA，檢測(cè)率達(dá)96.2%。HBsAg陽(yáng)性，HBV DNA測(cè)定常常陽(yáng)性。HBeAg陰性而抗-HBe和抗-HBc陽(yáng)性者，僅表明病毒復(fù)制減弱，但并未完全消失，血清HBV DNA陽(yáng)性率仍可達(dá)48.6%，這與劉毅等報(bào)道[4]一致，抗-HBe陽(yáng)性并不一定代表肝臟疾病處于靜止?fàn)顟B(tài)，HBV DNA復(fù)制可能仍在進(jìn)展，患者仍具有傳染性。因此HBV DNA檢測(cè)是評(píng)價(jià)HBV傳染性的最可靠方法。

通過基因檢測(cè)可以判斷病原體的有無和量的多少，至于病原體進(jìn)入人體后，機(jī)體作出了何種反應(yīng)、程度如何、反應(yīng)的結(jié)果等等，基因檢測(cè)對(duì)此不能作出較全面的回答；而血清標(biāo)志物的檢測(cè)反映的是免疫學(xué)的變化。因此，HBV血清標(biāo)志物檢測(cè)與HBV DNA定量檢測(cè)相互結(jié)合，將為乙肝的臨床診斷，治療方案的選擇和療效監(jiān)測(cè)提供較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

[1]Sun Z,Xiang W,Guo Y,et al.Inhibition of hepatitis B virus(HBV) by LNA-mediated unclear interference with HBV DNA transcription[J].Biochem Biophys Res Commun,2011,409(3):430.

[2]中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)，中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì).慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)[J].中華肝臟病雜志，2011，19(1)：13.

[3]羅慧琴，王志剛，李 玲，等.乙肝患者血清標(biāo)志物與前S1抗原及HBV-DNA相關(guān)性分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013,34(24):3338.

[4]劉 毅，王 波，黃小川，等.乙型肝炎血清免疫標(biāo)志物與病毒核酸含量的相關(guān)性研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2013，17(12)：2187.