新生兒缺氧缺血性腦病食欲素、神經激肽A和神經元特異性烯醇化酶檢測的臨床意義

張楠 李清華 李文輝 張中馥

·論著·

新生兒缺氧缺血性腦病食欲素、神經激肽A和神經元特異性烯醇化酶檢測的臨床意義

張楠 李清華 李文輝 張中馥

目的探討新生兒缺氧缺血性腦病食欲素、神經激肽A和神經元特異性烯醇化酶檢測的臨床意義。方法新生兒缺氧缺血性腦病患者63例，根據《新生兒HIE診斷依據和臨床分度》分為輕度(n=29)、中度(n=18)、重度組(n=16)，取同期健康新生兒20例作為對照組。檢測4組食欲素、神經激肽A和神經元特異性烯醇化酶水平。結果新生兒缺氧缺血性腦病組食欲素、神經激肽A、神經元特異性烯醇化酶水平與對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)。輕度組食欲素、神經元特異性烯醇化酶水平與對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)，中、重度組食欲素、神經激肽A、神經元特異性烯醇化酶水平與對照組、輕度組比較差異有統計學意義(P<0.05)。重度組食欲素、神經激肽A、神經元特異性烯醇化酶水平與中度組比較，差異有統計學意義(P<0.05)。結論新生兒缺氧缺血性腦病患兒檢測食欲素、神經激肽A和神經元特異性烯醇化酶水平對預測病情及判斷治療效果有重要意義。

缺氧缺血性腦病；神經激肽A；食欲素

新生兒缺氧缺血性腦病是指新生兒因圍產期窒息產生的患兒腦的缺氧缺血性損害，可導致新生兒腦損傷，如癲癇、腦癱等神經功能損傷，且病情進展迅速，致殘率和病死率高、嚴重影響患兒的生活質量，并對家庭造成嚴重的影響。其發病機制復雜，因此選取恰當的臨床檢測指標，對預測病情及判斷治療效果有重要意義[1-3]。食欲素由下丘腦的側部及后部分泌，可以影響食欲、睡眠并對覺醒狀態的大腦和相關神經遞質有重要作用。神經激肽A是速激肽族神經肽的一種，其具有調節體內多種生理功能如痛覺、睡眠及神經系統本身的分化和發育。神經元特異性烯醇化酶具有高度的組織特異性，可以反映灰質變化。本研究選取我院新生兒缺氧缺血性腦病新生兒，對其食欲素、神經激肽A和神經元特異性烯醇化酶水平進行研究，探討其在新生兒缺氧缺血性腦病中的研究價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2012年5月至2013年6月收治的新生兒缺氧缺血性腦病患者63例作為研究對象，患兒均符合中華醫學會兒科學會相關標準[4]，其中男32例，女31例；胎齡37～42周，平均胎齡(38.5±1.3)周；出生體重2 500～4 220 g，平均出生體重(3 230±520)g；順產42例，剖宮產21例。根據《新生兒HIE診斷依據和臨床分度》[4]分為輕度(n=29)、中度(n=18)、重度組(n=16)。輕度組中男15例，女14例；胎齡38～41周，平均胎齡(38.4±1.2)周；出生體重2 500～4 200 g，平均出生體重(3 250±500)g；順產20例，剖宮產9例。中度組中，男9例，女9例；胎齡37～42周，平均胎齡(39.5±2.3)周；出生體重2 600～4 000 g，平均出生體重(3 330±515)g；順產12例，剖宮產6例。重度組中，男8例，女8例；胎齡37～41周，平均胎齡(38.7±1.6)周；出生體重2 700～4 350 g，平均出生體重(3 340±550)g；順產10例，剖宮產6例。選取同期我院健康新生兒20例作為對照組，其中男12例，女8例；胎齡39～42周，平均胎齡(39.1±2.2)周；出生體重2 700～4 200 g，平均出生體重(3 400±500)g；順產14例，剖宮產6例。4組受檢新生兒性別比、胎齡、平均出生體重、順產剖宮產比間差異無統計學意義(P >0.05)。

1.2 入選與排除標準

1.2.1 入選標準：①有明確導致胎兒宮內窘迫的異常產科病史，有嚴重胎兒宮內窘迫表現，或在分娩過程中有明顯窒息史；②出生時有重度窒息，Apagar評分1 min≤3分，延續至5 min時仍≤5分，和/或出生時臍動脈血氣pH≤7.0；③出生后不久有神經系統癥狀，持續24 h以上；

1.2.2 排除標準：排除感染、電解質紊亂、先天畸形、產傷、先天性心肺疾患等。

1.3 檢測方法 抽取新生兒出生后24、72 h股靜脈血2 ml/管，共3管。

1.3.1 食欲素：選取德國ELISA Kit for Orexin試劑盒，由上海欣裕生物科技有限公司提供。室溫血液自然凝固10～20 min，離心20 min左右，3 000 r/min。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。采用酶聯免疫檢測方法測定，嚴格按照說明書進行操作，30 min內在波長450 nm的酶標儀上讀取各孔讀數，根據標準曲線讀取相應的含量值。

1.3.2 神經激肽A：人神經激肽 A(NKA)酶聯免疫吸附測定試劑盒由武漢伊艾博科技有限公司提供，標本請于室溫放置 2 h后于1 000 g/min，離心 20 min，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。先用PBS洗滌，去除多余血液，勻漿化后放在20 mlPBS中于-20℃放置過夜，第2天，經過2次反復凍融破膜，將勻漿物5 000 g/min，離心 5 min，取上清即可檢測。檢測嚴格按照說明書進行操作，30 min內在波長450 nm的酶標儀上讀取各孔讀數，根據標準曲線讀取相應的含量值。。

1.3.3 神經元特異性烯醇化酶：人神經特異性烯醇化酶酶聯免疫分析試劑盒由廈門慧嘉生物科技有限公司提供。血液處理方法同食欲素。測嚴格按照說明書進行操作，30 min內在波長450 nm的酶標儀上讀取各孔讀數，根據標準曲線讀取相應的含量值。

2 結果

新生兒缺氧缺血性腦病組食欲素、神經激肽A、神經元特異性烯醇化酶水平與對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)。輕度組食欲素、神經元特異性烯醇化酶水平與對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)，中、重度組食欲素、神經激肽A、神經元特異性烯醇化酶水平與對照組、輕度組比較差異有統計學意義(P<0.05)。重度組食欲素、神經激肽A、神經元特異性烯醇化酶水平與中度組比較，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 4組食欲素、神經激肽A和神經元特異性烯醇化酶水平比較

表1 4組食欲素、神經激肽A和神經元特異性烯醇化酶水平比較

組別食欲素(ng/L)神經激肽A(ng/ml)神經元特異性烯醇化酶(μg/L)對照組(n=20)4.3±1.04.9±0.913.4±3.3新生兒缺氧缺血性 腦病組(n=63)7.2±1.6*2.2±0.4*52.3±4.1*輕度組(n=29)5.7±1.3*4.1±0.631.1±3.1*中度組(n=18)6.9±1.4*#1.8±0.5*#48.2±2.7*#重度組(n=16)9.6±1.7*#△0.7±0.3*#△62.0±5.9*#△

注：與對照組比較，*P<0.05；與輕度組比較，#P<0.05；與中度組比較，△P<0.05

3 討論

新生兒缺氧缺血性腦病多為足月胎齡兒，明顯臨床表現為：腦水腫導致的前囟飽滿、頭圍增大，多有肌張力增高、原始反射異常等，中重型患兒有驚厥表現[4]。新生兒缺氧缺血性腦病目前無特效藥物治療，其不僅嚴重威脅患兒生命，且后期致殘致死率較高，特異性檢測指標可以指導臨床診斷，判斷病情發展情況，有助于治療的效果判定。

3.1 食欲素 下丘腦是調節飲食及能量平衡的中樞。在大鼠下丘腦腹外側(LH)發現了兩種與食欲有關且來源于同一前體的神經肽—增食因子A和B，即食欲素A和食欲素B，它們可激活兩種密切相關且與G蛋白偶聯的細胞表面受體(OX1R/OX2R)。包括2個外顯子和1個內含子，共1 432個堿基對，編碼含131個氨基酸殘基的多肽。研究表明食欲素不僅與飲食、進水、循環系統、自主神經系統有關，其對應激反應也有一定影響[5-7]。本研究發現，隨著病情不斷加重，患兒體內食欲素水平不斷升高(P<0.05)，且與對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)。這表明食欲素可能參與了新生兒缺氧缺血性腦病的病程發展過程，與患兒創生應激有關。

3.2 神經激肽A 神經激肽A屬于速激肽族的一種，廣泛分布于體內的神經系統和胃腸道內皮細胞內，為短鏈多肽。其參與心血管、痛覺、消化和肺功能的調節，在炎癥、休克、疼痛等疾病的發病機制中有重要意義[8-10]。本研究中神經激肽A水平隨著病情加重而逐漸降低(P<0.05)，可能與腦灌注壓下降，腦組織缺血缺氧，神經細胞水腫，神經激肽A合成不足有關。

3.3 神經元特異性烯醇化酶 是參與糖酵解途徑的烯醇化酶中的一種，存在于神經組織和神經內分泌組織中。NSE在腦組織細胞的活性最高，具有高度的組織特異性。其具有神經保護、神經元營養的作用。缺血缺氧時，由于神經元細胞膜完整性受到破壞，其釋放入血，導致檢測水平增高[11]。本研究表明隨著患兒病情的加重，神經元特異性烯醇化酶水平不斷升高(P<0.05)。

綜上所述，新生兒缺氧缺血性腦病無特效療法，因此特異性檢測指標，對指導臨床診療，判斷預后有重要意義。本研究中食欲素、神經激肽A、神經元特異性烯醇化酶水平與患兒病情進展密切相關，為臨床判斷患兒疾病進展，進行拮抗性的針對治療提供了一定借鑒。

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9 周名雄，張新路，張士發，等．新生兒缺氧缺血性腦病血漿ET-I與血清NSE動態變化及相關性的研究．放射免疫學雜志，2006，19：68-69．

10 范永橋.新生兒缺氧缺血性腦病6-keto-PGF1α NSE檢測的臨床意義.中華全科醫學，2011，9:1952-1953.

11 劉文東，陳曉平，薛愛紅，等.缺氧缺血性腦病新生兒NKA含量變化的動態研究.中國婦幼健康研究，2012，23:607-608，616.

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.07.036

050031 石家莊市，河北省兒童醫院急診科

張中馥，050031 河北省兒童醫院急診科;

E-mail：chenlihua20082008@126.com

R 722.12

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1002-7386(2014)07-1046-03

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