尿UBA52聯合胱抑素C在糖尿病腎病診斷中的意義

戴 黎, 張 蕾, 任 榮

(新疆醫科大學第五附屬醫院 腎病科, 新疆 烏魯木齊, 830011)

糖尿病腎病(DN)是糖尿病常見的微血管并發癥之一，有30%～40%的糖尿病患者發生DN[1], 常進展至終末期腎衰，是糖尿病患者的主要死因之一，故早期診斷該病對緩解病情進展尤為重要。目前,臨床上各種檢測方法容易受各種因素的影響，具有一定局限性。Jun Wada等[2]研究顯示,在糖尿病發病早期已經存在腎臟上皮細胞泛素核糖體水解蛋白的變化，而UBA52作為其中一種亞型在早期糖尿病腎病中具有特異性。本研究通過對比單純糖尿病、早期DN患者及健康體檢者CysC、UBA52等指標以及聯合檢測上述二者，比較各種不同方法在診斷糖尿病腎病的準確度和敏感性，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年1月—2013年10月在本院經臨床明確診斷糖尿病和糖尿病腎病的住院患者79例，另選取門診健康體檢者22例。所有糖尿病患者均符合2010年《中國2型糖尿病防治指南》[3]糖尿病診斷標準要求，并以ACR>30 mg/g、合并腎外微血管損害為標準，分為糖尿病組20例和糖尿病腎病組59例。納入標準：年齡均≥18歲，血肌酐均<265 μmol/L。排除標準：排除有發熱及感染證據、腫瘤、妊娠、充血性心衰之一者；糖尿病腎病組排除肌酐≥265 μmol/L者；健康對照組排除糖尿病、高血壓、腎臟疾病患者；糖尿病腎病組排除其他原因腎臟損害如高血壓腎損害、原發性腎炎、腎病綜合征、IgA腎病者。

1.2 方法

所有患者空腹12 h后于清晨采集外周靜脈血3 mL, 分離血清并采集清晨首次清潔中段尿5 mL, 所有標本均在-80 ℃冰箱保存。所有生化檢測，包括擴血尿肌酐、尿β2微球蛋白、尿α1微球蛋白、尿蛋白定量、血CysC，均由檢驗科同一檢驗醫師進行操作，尿微量白蛋白采用免疫透射比濁法檢測，血清白蛋白、血尿肌酐、胱抑素C均使用BECKMAN 8000(美國)全自動生化儀進行檢驗。血尿UBA52采用酶聯免疫法檢測, UBA52 ELISA KIT由華夏遠洋商城提供。

1.3 統計學方法

所有數據均采用Excel進行處理，統計學軟件采用SPASS 17.0。計量資料以均數±標準差表示，符合正態性、方差齊條件，多組間比較采用單因素方差分析(one-Way ANOVA), 多重比較采用LSD方法；方差不齊，采用Welch近似方差分析，多重比較采用Dunnet's T3法進行比較。計數資采用四個表或R×C列聯表檢驗；診斷試驗評價采用ROC曲線下面積比較。

2 結 果

2.1 各組一般情況比較

各組在年齡、性別、體質量指數分布上比較無明顯差異(P>0.05)，見表1。

表1 3組一般資料比較

2.2 3組各種診斷標記物分布

糖尿病腎病患者血尿UBA52、尿NAG酶、α1微球蛋白、尿蛋白定量及GFR明顯高于糖尿病組及健康對照組(P均<0.05), 血清CysC明顯低于健康對照組(P<0.05), 但與糖尿病組比較無明顯差別(P>0.05)。3組尿β2微球蛋白無顯著差異(P均>0.05)。見表2。

表2 各實驗組相關指標的比較

2.3 各種實驗診斷早期DN的ROC曲線下面積比較

NAG酶、α1微球蛋白、尿蛋白定量、血UBA52、尿UBA52、血清胱抑素C的ROC曲線下面積見表3，可見尿UBA52曲線下面積最大，且差異具有統計學意義(P均<0.05)。

表3 各種標記性蛋白質診斷早期糖尿病腎病ROC曲線下面積

2.4 尿UBA52界點的確定

以ACR診斷為標準，尿UBA52為待測標準進行ROC曲線分析，以UBA52 AUC最大點為最佳界點，尿UBA52=8.56 ng/mL時診斷特異度敏感度較好，約登指數最大。

2.5 尿UBA52聯合Cys-C診斷早期DN的價值評價

以ACR陽性作為早期糖尿病腎病診斷標準，以所有糖尿病患者為研究對象，通過比較RCO曲線下面積(AUC)評價診斷價值。尿UBA52判斷標準：尿UBA52>8.56 ng/mL為陽性，否則為陰性；胱抑素C(參考值0.63～1.35 mg/L)[4]判斷標準：血清胱抑素C>1.35 mg/L為陽性，否則為陰性。尿UBA52聯合胱抑素C的判斷標準：尿UBA52>8.56 ng/mL或血清胱抑素C>1.35 mg/L為陽性，否則為陰性。尿UBA52聯合胱抑素C診斷早期糖尿病腎病曲線下面積達0.998 (P<0.05)，明顯高于單純尿UBA52的0.985或胱抑素C的0.459, 具有更高的診斷價值。

3 討 論

Sun L等[5]研究顯示, UBA52作為機體一種正常的水解蛋白，其mRNA的轉錄翻譯取決于血液中血糖的水平，且與血糖升高水平呈正相關，在正常人群中表達呈低水平，而Kanayama H等[6]通過免疫組化對130例糖尿病腎病的研究顯示，UBA52幾乎表達于腎小管上皮細胞中，其機制可能與特異性調節蛋白質降解的主要通路，細胞內細胞表面受體、信號蛋白等均可被泛素系統識別、修飾及降解有關，故UBA52在糖尿病腎病患者早期診斷中具有很高的特異性，且尿液標本留取標本方便，能夠避免反復抽血檢測給患者帶來的痛苦。故具有很好的推廣應用價值。CysC能在幾乎所有的有核細胞內以恒定速度持續的轉錄與表達，無組織學特性，故可在體內以恒定速度產生，不受年齡、性別、炎癥狀態等影響[7-9]。當腎小球出現輕微損傷時，血中CysC濃度即可出現升高，并隨著病情的加重而逐漸升高，所以CysC被公認為是反映早期腎損害的敏感標志物之一[10]。張碧瓊等[11]通過對1 300例糖尿病腎病患者的研究顯示，CysC診斷糖尿病腎病的靈敏度為40%, 特異性為100%, 因此，從理論上看來，CysC已成為一個理想的反映腎功能的內源性標記物。本研究采用AUCROC評估血清CysC、血UBA52、尿UBA52、NAG酶、α1微球蛋白等多個檢測指標對DN的診斷效能。AUCROC是一種全面、準確地評價診斷試驗的有效方法[12], 其所對應曲線下面積越大，表明臨床意義越大。本研究結果表明，在單純比較DN各項診斷指標時，尿UBA52曲線下面積大于其他各項觀察指標，表明尿UBA52診斷糖尿病腎病效果優于現有其他檢

查結果。當聯合檢測尿UBA52和CysC時，其曲線下面積接近于1，優于單一檢測二者的檢測結果，能夠明顯提高DN診斷效率。

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