烯啶蟲胺對椰心葉甲的生物活性

溫海波+候華民++金啟安++張善學(xué)++陳利標(biāo)

摘 要 為探索椰心葉甲防治的新方法，室內(nèi)測定了烯啶蟲胺對椰心葉甲的胃毒、殺卵和觸殺作用。結(jié)果表明：烯啶蟲胺對椰心葉甲5齡幼蟲具有很強(qiáng)的胃毒作用，24和48 h的LC50值分別為1.25和0.52 mg/L；對椰心葉甲也有顯著的殺卵作用，在供試濃度為0.5～5 mg/L時(shí)，對椰心葉甲卵孵化率和幼蟲存活率均在50%以下；烯啶蟲胺對椰心葉甲5齡幼蟲也有一定的觸殺作用，其24和48 h的LC50值分別為0.188和0.178 mg/L。烯啶蟲胺具有防治椰心葉甲的潛力。

關(guān)鍵詞 烯啶蟲胺 ；椰心葉甲 ；生物活性

分類號 S481.1

椰心葉甲[Brontispa longissima（Gestro）]為鞘翅目（Coleoptera）鐵甲科（Hispidae）害蟲，是棕櫚科植物的重要害蟲之一[1]。該蟲為印度尼西亞和新幾內(nèi)亞的本地害蟲，但由于其傳播的快速性，目前已入侵到亞洲東南部。該蟲于2002年首次入侵海南，目前已遍及海南省18個(gè)市縣[2]，對海南的“椰島”自然風(fēng)光及棕櫚科植物的綠化苗木產(chǎn)業(yè)帶來嚴(yán)重?fù)p失[3-4]。目前，為了防治椰心葉甲的危害，國內(nèi)外已展開大量的化學(xué)防治[5-7]和生物防治[8-11]，并取得了一定的進(jìn)展。烯啶蟲胺屬新型煙酰亞胺類殺蟲劑，是日本繼吡蟲啉和啶蟲脒之后開發(fā)的替代產(chǎn)品，于1995年在日本獲登記。烯啶蟲胺作用于昆蟲的煙堿乙酰膽堿受體，干擾害蟲運(yùn)動神經(jīng)系統(tǒng)使化學(xué)信號傳遞失靈，最終導(dǎo)致害蟲死亡。該藥作用方式獨(dú)特，害蟲不易產(chǎn)生抗性，有卓越的內(nèi)吸和滲透作用。有關(guān)烯啶蟲胺對椰心葉甲的殺蟲作用經(jīng)文獻(xiàn)檢索少有報(bào)道。因此，就烯啶蟲胺對椰心葉甲幼蟲的胃毒、殺卵和觸殺活性等方面進(jìn)行了研究，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試藥劑

烯啶蟲胺原藥（>95%），由海南正業(yè)中農(nóng)高科股份有限公司提供。準(zhǔn)確稱取烯啶蟲胺原藥10 mg，用丙酮定容至10 mg/L，置于0℃冰箱保存。

1.1.2 供試?yán)ハx

椰心葉甲，由中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所入侵害蟲課題組提供，試驗(yàn)時(shí)挑取大小一致，健康活潑的5齡中期幼蟲和1日齡卵供試。

1.2 方法

1.2.1 胃毒作用

試驗(yàn)采用浸葉法[13]。將椰子葉分別放入各供試藥液中浸漬3 s后取出，放吸水紙上晾干，然后將個(gè)體大小一致的椰心葉甲幼蟲放入裝有處理葉片的培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿底鋪有濾紙保濕。將培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱[溫度（25±1）℃，RH=70%～80%]培養(yǎng)。以丙酮作對照，每濃度重復(fù)3次，每重復(fù)20頭蟲。定時(shí)檢查試蟲死亡情況，以毛筆輕觸蟲體，以完全不動者視為死亡。分別于24和48 h統(tǒng)計(jì)死蟲數(shù)，計(jì)算死亡率和校正死亡率。

1.2.2 殺卵作用

采用浸卵法[14]，用細(xì)毛筆將1日齡卵挑出，并用0.5%聚乙烯醇將卵粘到準(zhǔn)備好的葉片上，每個(gè)葉片不少于50粒，待聚乙烯醇干燥后分別在不同濃度的烯啶蟲胺丙酮溶液中浸5 s，取出置濾紙上，待丙酮揮發(fā)干后，放入內(nèi)墊濕濾紙的培養(yǎng)皿（d=9 cm）中，置養(yǎng)蟲室內(nèi)讓其自然發(fā)育。以丙醇處理為對照。每處理重復(fù)4次，每重復(fù)不少于50粒卵。卵將孵化時(shí)，放入新鮮椰子葉片供孵化的幼蟲取食；統(tǒng)計(jì)各處理卵孵化及2齡末幼蟲存活數(shù)，計(jì)算孵化率及幼蟲存活率。

1.2.3 觸殺作用

采用微量點(diǎn)滴法[5]，將椰心葉甲5齡幼蟲單頭飼養(yǎng)在直徑為6 cm的培養(yǎng)皿中。用微量注射器將各處理（2、1、0.5、0.25和0.125 mg/L）點(diǎn)滴于幼蟲的胸背部，每蟲藥量1 μL；以丙酮為對照，每處理重復(fù)3次，重復(fù)20頭試蟲，分別于處理后48和72 h調(diào)查死亡情況。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析

利用SPSS軟件中ANOVA方法對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，數(shù)據(jù)之間的差異顯著性采用Duncan's新復(fù)極差法進(jìn)行比較，直線回歸方程采用機(jī)值分析法估計(jì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 毒殺作用

結(jié)果顯示，烯啶蟲胺對椰心葉甲5齡幼蟲具有很強(qiáng)的胃毒作用（表1）。處理后24 h，試蟲由于饑餓取食部分葉片，引起部分死亡，在供試濃度為0.25～1 mg/L時(shí)，校正死亡率介于15%～45%；但隨著處理時(shí)間的延長，烯啶蟲胺同時(shí)具有內(nèi)吸和滲透作用，致使試蟲取食的藥劑量逐漸增加，導(dǎo)致大量死亡。此時(shí)在相同供試濃度下，校正死亡率可高達(dá)30.45%～65.07%。經(jīng)機(jī)率值分析法擬合其24 h和48 h的毒力曲線，得其LC50值分別為1.25和0.52 mg/L。

2.2 殺卵作用

烯啶蟲胺對椰心葉甲具有很好的殺卵作用（表2），結(jié)果表明，在最大供試濃度（5 mg/L）處理下，椰心葉甲卵孵化率和幼蟲存活率分別僅為4.42%和2.44%，顯著低于對照及其它處理；當(dāng)供試濃度降為2、1、0.5和0.25 mg/L時(shí)，對椰心葉甲卵孵化率和幼蟲存活率分別為13.00%、27.86%、44.08%、53.96%和9.50%、24.03%、37.65%、46.02%。

2.3 觸殺作用

烯啶蟲胺對椰心葉甲5齡幼蟲具有強(qiáng)烈的觸殺作用，處理10 min內(nèi)就有試蟲開始開始死亡，隨著處理時(shí)間的延長，試蟲死亡情況顯著。在處理后24 h，供試濃度僅為0.25 mg/L，其校正死亡率就可達(dá)到51.85%，而在最大供試濃度分別為2和1 mg/L時(shí)，其校正死亡率均在84%以上；在處理后48 h，最大供試濃度（2 mg/L）中的試蟲已全部致死；在供試濃度為0.5～1 mg/L時(shí)，對椰心葉甲5齡幼蟲48 h的校正死亡率均在80%以上；當(dāng)供試濃度降為0.25和0.125 mg/L時(shí)，死亡情況呈下降趨勢，48 h的校正死亡率介于48%～65%。以機(jī)值分析法對其回歸方程進(jìn)行擬合，求得其24和48 h的LC50值分別為0.188和0.178 mg/L。見表3。endprint

3 討論

烯啶蟲胺是日本繼吡蟲啉和啶蟲脒之后開發(fā)的替代產(chǎn)品，其作用機(jī)制仍是作用于昆蟲的煙堿乙酰膽堿受體，且該藥比吡蟲啉與啶蟲脒等煙酰亞胺類殺蟲劑具有更好的內(nèi)吸和滲透作用。用該藥來防治椰心葉甲，一方面，由于其高效的毒力可減少農(nóng)藥的使用量，另一方面，由于烯啶蟲胺易溶于水，其制劑多以水基化劑型為主，防治方法將更為環(huán)保，可作為啶蟲脒的替代藥劑防治椰心葉甲。目前，對椰心葉甲的防治工作主要有掛包法[6]和寄主天敵防治法[1，8]。掛包法的防治藥劑為華南農(nóng)業(yè)大學(xué)和南海綠寶生化技術(shù)研究所合作開發(fā)的“椰甲清淋溶性粉劑（45%啶蟲脒·殺蟲單）”，利用海南潮濕多雨等特點(diǎn)，通過雨水將藥劑滲入到植物內(nèi)部而起到直接和持續(xù)殺蟲的目的[6]，但海南只在5月以后才有持續(xù)的降雨，在此之前降雨較少，因此，掛包法防治椰心葉甲在時(shí)間上有一定的限制。生物防治方法主要是利用中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所引進(jìn)兩種椰心葉甲寄生性天敵椰心葉甲嚙小蜂和椰甲截脈姬小蜂，通過野外放蜂寄生椰心葉甲幼蟲和蛹，從而控制該蟲的危害[1，8]。但海南高溫高濕的氣候?qū)纳蕴鞌骋娜~甲嚙小蜂和椰甲截脈姬小蜂的生存和寄生率影響較大。本研究結(jié)果表明，烯啶蟲胺對椰心葉甲5齡幼蟲具有很強(qiáng)的觸殺、胃毒和殺卵作用，這說明利用烯啶蟲胺防治椰心葉甲，不但可以持續(xù)控制本代害蟲的危害，還可控制下一代害蟲的危害暴發(fā)，在藥劑開發(fā)中只需改進(jìn)施藥方法，將注干法[15]、掛包法[6]和寄主天敵生物防治[1，8]等方法結(jié)合起來，在椰心葉甲的防治中將具有很好的應(yīng)用前景。

參考文獻(xiàn)

[1] 呂寶乾，彭正強(qiáng)，唐 超，等. 椰心葉甲寄生蜂——椰甲截脈姬小蜂的生物學(xué)特性[J]. 昆蟲學(xué)報(bào)，2005，48（6）：943-948.

[2] 陸永躍，曾 玲，王 琳，等. 棕櫚科植物有害生物椰心葉甲的風(fēng)險(xiǎn)性分析[J]. 華東昆蟲學(xué)報(bào)，2004，13（2）：17-20.

[3] 張志祥，程東美，江定心，等. 椰心葉甲的傳播、危害及防治方法[J]. 昆蟲知識，2004，41（6）：522-526.

[4] 萬方浩，鄭小波，郭建英. 重要農(nóng)林外來入侵物種的生物學(xué)與控制. 北京：科學(xué)出版社，2005：376-387.

[5] 肖廣江，陸永躍，曾 玲. 阿維菌素對椰心葉甲的毒力和防治效果[J]. 昆蟲知識，2007，44（4）：530-533.

[6] 張志祥，徐漢虹，江定心. 椰甲清淋溶性粉劑掛袋法防治椰心葉甲技術(shù)的研究與推廣[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008（2）：65-68.

[7] Jing Z， Yingqian L， Yang L， et al. Podophyllotoxin deriveatives shows activity against Brontispa longissima Larvae[J]. Natural Product communications， 2010， 5（8）： 1 247-1 250.

[8] 呂寶乾，彭正強(qiáng)，許春靄，等. 椰心葉甲蛹寄生蜂椰心葉甲嚙小蜂的生物學(xué)特性[J]. 昆蟲學(xué)報(bào)，2006，49（4）：643-649.

[9] 秦長生，徐金柱，謝鵬輝，等. 綠僵菌相容性殺蟲劑篩選及混用防治椰心葉甲[J]. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，（2）：44-46.

[10] 張 靜，馮 崗. 軟枝黃蟬提取物對椰心葉甲幼蟲的殺蟲活性[J]. 熱帶作物學(xué)報(bào)，2010，31（7）：1 152-1 156.

[11] 馮 崗，張 靜，金啟安，等. 魚藤酮對椰心葉甲的生物活性[J]. 熱帶作物學(xué)報(bào)，2010，31（4）：636-639.

[12] 孫 慧，楊春河. 新型殺蟲劑烯啶蟲胺[J]. 精細(xì)與專用化學(xué)品，2009，17（11）：16-18.

[13] Minyi L， Jing Z， Gang F， et al. Khayasin and 2'S-methylbutanoylproceranolide：Promising candidate insecticide for the control of the coconut leaf beetle， Brontispa longissima[J]. Journal of Pesticide Science， 2011， 36（1）： 22-26.

[14] 羅都強(qiáng)，馮俊濤，胡 瓚，等. 雷公藤總生物堿分離及殺蟲活性研究[J]. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2001，29（2）：61-64.

[15] 唐光輝，江志利，張文峰，等. 樹干注藥防治椰心葉甲藥效試驗(yàn)[J]. 中國森林病蟲，2006，25（4）：39-41.endprint