TK1、CA199及CA724聯合檢測在結直腸癌中的診斷價值

盧志權 謝一鳴 成光輝 李介華

TK1、CA199及CA724聯合檢測在結直腸癌中的診斷價值

盧志權 謝一鳴 成光輝 李介華

目的 探討血清胸苷激酶1(TK1)、糖類抗原199(CA199)、糖類抗原724(CA724)聯合檢測對結直腸癌診斷的臨床應用價值。方法 采用電化學發光法對77例結直腸癌患者、61例結直腸良性病變患者和40例健康體檢者的血清CA199、CA724含量進行檢測, 采用免疫印跡-增強化學發光法對各組血清TK1含量進行檢測。 結果 結直腸癌組的TK1、CA199和CA724水平顯著高于結直腸良性病變組患者和正常對照組(P均＜0.05), 結直腸良性病變患者的血清TK1、CA199和CA724水平顯著高于正常對照組(P＜0.05)。單項檢測TK1對結直腸癌診斷的敏感度、 特異度和準確度分別為40.3%、75.4%、55.8%, CA199為44.2%、88.5%、63.8%, CA724為45.5%、77.0%、59.4%；聯合檢測TK1、CA199和CA724為64.9%、68.9%、65.9%。 結論 TK1、CA199和CA724水平對于結直腸癌的診斷、鑒別診斷具有重要的臨床價值, 三者聯合檢測可提高結直腸癌的檢出率。

結直腸腫瘤；胸苷激酶1；糖類抗原199；糖類抗原724；聯合檢測

結直腸癌(colorectal cancer, CRC)是常見的消化道惡性腫瘤, 在全球范圍內為男性第3位、女性第2位高發性惡性腫瘤,每年新發約120萬例, 死亡約60萬例, 其進展與疾病的診斷時機和分期相關［1,2］。在我國, 結直腸癌發病率呈逐年升高趨勢, 預計我國結直腸癌新發病例仍將逐年增多［3］。臨床早發現、早診斷、早治療對提高患者生存質量和生存率具有重要意義。目前, 臨床上結直腸癌的診斷主要依賴內窺鏡活檢,但由于該技術難度、操作復雜性及患者痛苦性相對較大。因此, 如何發現或整合一些能夠早期發現和診斷結直腸癌的血液學指標已經成為全世界共同研究的課題。本研究對77例結直腸癌患者的血清TK1、CA199和CA724進行了檢測分析,旨在了解三項指標聯合檢測對結直腸癌的敏感性、特異性及早期診斷的價值。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 2012年7月～2013年9月本院收治的結直腸癌患者77例, 男43例, 女34例, 年齡38～88歲, 平均年齡62.3歲, 診斷標準依據衛生部主編的中國常見惡性腫瘤診治規范［4］；結直腸良性病變患者61例, 其中男34例, 女27例, 年齡28～66歲, 平均年齡42.3歲。結直腸良性病變包括結直腸息肉、急性結腸炎、潰瘍性結腸炎、慢性結直腸炎等疾病, 上述全部病例的診斷均經過臨床、內鏡及病理學證實；選擇同期來本院體檢中心健康體檢人群40例, 其中男23例,女17例, 年齡27～66歲, 平均年齡42.1歲, 該組人群經檢查無心、肝、腎、肺等重要器官疾病, 無傳染性疾病、炎性病變及貧血等, 無腫瘤家族史。

1. 2 標本采集 TK1、CA199、CA724測定采用血清標本,于清晨空腹采靜脈血3 ml, 3 h內以3800 r/min離心8 min, 分離血清, 標本要求無溶血、脂血, CA199、CA724當天檢測, TK1標本-20℃保存, 在1周內完成檢測。

1. 3 儀器、試劑與方法 TK1 采用免疫印跡增強化學發光法檢測, 試劑盒及CIS 化學發光數字成像分析儀由深圳華瑞同康生物技術有限公司提供, 按說明書操作。CA199、CA724采用電化學發光法, 儀器為羅氏E170電化學發光儀,試劑為其配套試劑。

1. 4 陽性值判斷標準 TK1＞2.0 pmol/L、CA19-9＞27.00 ng/ml、CA724＞6.90 ng/ml。

1. 5 統計學方法 采用SPSS 17.0軟件進行統計分析, 檢測數據以均數±標準差(±s)表示, 樣本間均數比較采用t檢驗；計數資料采用χ2檢驗。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 三組人群的血清TK1、CA199、CA724水平比較 結直腸癌患者血清TK1、CA199、CA724含量明顯高于結直腸良性病變組和正常對照組的水平, 結直腸良性病變組的血清TK1、CA199、CA724含量明顯高于正常對照組的水平, 兩兩組間比較, 差異均有統計學意義(P＜0.05), 檢測結果見表1。

2. 2 血清TK1、CA199、CA724單項與聯合檢測對結直腸癌診斷的敏感度、特異度和準確度比較 CA724單項檢測對結直腸癌診斷的敏感度高于TK1和CA199, 單項檢測CA199對結直腸癌診斷的特異度高于TK1和CA724, 聯合檢測TK1、CA199、CA724對結直腸癌診斷的敏感度和準確度均能提高,見表2。

表1 結直腸癌患者血清TK1、CA199、CA724檢測結果(±s)

表1 結直腸癌患者血清TK1、CA199、CA724檢測結果(±s)

注：與正常對照組比較, a, P＜0.05；與良性病變組比較, b, P＜0.05

組別例數TK1(pmol/L)CA199(U/ml)CA724(U/ml)結直腸癌組772.93±3.17ab152.63±329.08ab28.58±65.54ab良性病變組611.58±0.85a9.34±11.21a4.22±3.87a正常對照組400.83±0.262.60±1.131.72±0.79

表2 TK1、CA199、CA724單項及聯檢對結直腸癌的診斷性能評價(%)

3 討論

在結直腸癌發生發展的早期, 由于病變隱匿, 病情難以發現, 即使應用影像學等技術檢測仍難以取得陽性結果。近年來, 血清腫瘤標志物檢測由于其高效、 無創的特點, 在輔助診斷結直腸癌、評估病情等方面有著重要的作用, 在臨床中得到廣泛應用。因此, 利用腫瘤標志物的聯合檢測來提高診斷腫瘤的敏感性和特異性在臨床中的應用漸廣。聯檢多種腫瘤標志物是提高大腸癌診斷準確率的一種方法［5］。

胸苷激酶是嘧啶合成的補救酶, 是催化胸腺嘧啶核苷轉為單磷酸胸腺嘧啶的關鍵酶, 這種磷酸化作用是胸腺嘧啶核苷進入DNA代謝的唯一途徑［6］。TK1在細胞周期的G1早中期水平低, 當細胞周期進入G1晚期, TK1開始持續升高, 在細胞周期S晚期G2期達到高峰, 但在靜止細胞中不會發生這種情況。TK1與細胞增殖生長密切相關, 可作為一種細胞增殖標志物來檢測細胞的增殖活性, 也可作為一種有效的腫瘤標志物來檢測惡性腫瘤的增殖度及評估預后［7,8］。CA199結直腸細胞產生的蛋白質, 這種抗體可在消化道惡性腫瘤與胰腺癌中有明顯高水平表達, 但也存在正常組織中如胰腺、膽囊等黏膜檢測表達水平呈現較高趨勢, 是消化道惡性腫瘤檢測的良好指標［9,10］。CA724是一種黏蛋白樣腫瘤相關糖蛋白, 其水平與腫瘤大小、分期及轉移有關, 是胃腸道和卵巢腫瘤的標志物［11］。

本實驗表1結果顯示：結直腸癌患者的血清TK1、CA199、CA724水平明顯高于結直腸良性疾病患者和正常對照人群的血清含量, 差異有統計學意義(均P＜0.05), 說明TK1、CA199、CA724都可作為結直腸癌診斷的腫瘤標志物。表1也顯示了結直腸良性病變患者組的血清TK1、CA199、CA724水平明顯高于健康體檢人群的血清含量, 差異有統計學意義(P＜0.05), 提示血清TK1、CA199、CA724濃度升高發出的信號,可為結直腸癌病變患者的早期診斷提供可靠的依據。

腫瘤標志物各有其生物學特性和病理學基礎, 其血清水平能從不同角度反映腫瘤的變化, 所以聯合檢測多種標志物可彌補單項檢測的不足, 有助于提高診斷的敏感度和特異度［12］。從本實驗表2結果可知TK1、CA199、CA724單項檢測在結直腸癌中的敏感性均在50%以下, 但三項聯合檢測敏感性達到64.9%；同時特異性也有68.9%, 準確性達65.9%, 三者聯合檢測可以優勢互補, 提高結直腸癌的檢出率, 對結直腸癌的輔助診斷、療效監測及預后判斷等有重要的臨床價值。

［1］ Jemnl A, Center MM, DeSantis C, et al. Global patterns of cancer Incidence and mortalily rates and trends. Cancer Epidemiol BiomarkersPrey, 2010, 19(8):1893-1907.

［2］ Cappellani A, Di Vita M, Zanghi A, et al. Biological and clinical markers in colorectal cancer: state of the art. Front Biosci(Schol Ed), 2010, 1(2):422-431.

［3］ 代珍, 鄭榮壽, 鄒小農, 等.中國結直腸癌發病趨勢分析和預測.中華預防醫學雜志, 2012, 46(7):598-603.

［4］ 中華人民共和國衛生部醫政司.中國常見惡性腫瘤診治規范2010版.北京:北京醫科大學中國協和醫科大學聯合出版社, 2010:187-188.

［5］ 王影, 梁歡.血清CEA、CA199、CA242聯檢在大腸癌診斷中的臨床應用.中國衛生檢驗雜志, 2008, 18(7):1395-1360.

［6 ］ 郭林, 盧仁泉.胃癌患者血清胸苷激酶檢測的臨床意義.檢驗醫學, 2008, 23(3):271-273.

［7］ Von Euler H, Einarsson R, Olsson U, et a1. Serum thymidine kinase activity in dogs with malignant lymphoma, a potent marker for prog-nosis and monitoring the disease.J Vet Int Me, 2004, 18(5):696-702.

［8］ Ohrvik A, Lindh M, Einarsson R, et a1. Sensitive nonradiometric method for determining thymidine kinase l activity. Clin Chem, 2004, 50(9):1597-1606.

［9］ Grothey A, A comparison of XELOX with FOLFO4 as firstline treatment for metastatic colorectal cancer. Nat Clin Pract Oncol, 2009, 6(1):10-11.

［10］ 莊珊珊, 陳炯玉, 方裕森, 等.血清CA199與CEA檢測對結直腸癌的診斷價值.現代腫瘤學, 2010, 18(7):1395-1396.

［11］ 徐煒, 盧敏, 韓峰, 等.血清CA199、CA125、CA724、CEA聯合檢測診斷胃癌的價值.山東醫藥, 2009, 49(19):78.

［12］ 胡曉愛, 曹廣斌, 王衛.血清腫瘤標志CEA和CA724聯合檢測在結直腸癌診斷中的應用 .中國實用醫藥, 2011, 14(6):54-55.

Clinical diagnostic value of combined detection of serum TK1, CAl99 and CA724 in colorectal cancer

LU Zhi-QUAN, XIE Yi-ming, CEHNG Guang-hui, et al. Department of Clinical Laboratory, Qingyuan Affiliated Hospital of Jinan University, Qingyuan 511518, China

Objective To investigate diagnostic value of combined detection of TK1, CA199 and CA724 in colorectal cancer. Methods Serum levels of CAl99 and CA724 in 77 patients with colorectal cancer, 61 patients with benign colorectal diseases and 40 healthy controls were measured by western blotting-enhanced chemiluminescence method, and serum levels of TK1 were measured by enzyme immune chemiluminescence dot-blot assay. Results Serum levels of CAl99 and CA724 in patients with colorectal cancer were significantly higher than those in patients with benign colorectal diseases and healthy controls(P＜0.05). And those patients with benign colorectal diseases were significantly higher than those in healthy controls(P＜0.05). The sensitivity, specificity and accuracy of TK1 for the diagnosis of colorectal cancer were 40.3%, 75.4% and 55.8%, respectively; those of CA199 were 44.2%, 88.5% and 63.8%, respectively; CA724 were 45.5%,77.0% and 59.4%, respectively; combined detection of TK1, CA199 and CA724 were 64.9%, 68.9% and 65.9%, respectively. Conclusion There are certain values of combined detection of TK1, CA199 and CA724 for the diagnosis of colorectal cancer, combined detection of TK1, CA199 and CA724 were helpful to increase the detection rate of colorectal cancer.

Colorectal neoplasms; Serum thymidine kinase 1; Carbohydrate antigen 199; Carbohydrate antigen 724; Combined detection

2014-03-12］

511518 暨南大學醫學院附屬清遠市人民醫院檢驗科