雌、孕激素受體和表皮生長因子受體在乳腺癌中的表達及其臨床意義

杜 璟 張曉麗 蔣麗娜

(河北北方學院，河北 張家口 075000)

乳腺癌可能是在性激素和生長因子的共同介導下導致局部微環境的變化而生成，其中以雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)和表皮生長因子受體(EGFR)尤為重要〔1〕。雖然目前乳腺癌診斷研究進展有很大的提高，但是對如何準確評估乳腺癌的預后及為臨床治療方案提供可靠的依據仍不夠理想。因此，本實驗探討聯合檢測ER、PR和EGFR對乳腺癌診斷、治療和判斷預后的意義。

1 資料與方法

1.1臨床資料 收集河北北方學院第一附屬醫院自2009～2011年手術切除女性乳腺癌標本120例，術前均未做放化療，病理診斷明確。患者年齡27～74歲，中位年齡49歲。病理分型：非浸潤性癌10例，浸潤性小葉癌41例，浸潤性導管癌69例。發生淋巴結轉移的61例，其中淋巴結轉移數超過15個有29例，未超過15個有32例，無淋巴結轉移的59例。

1.2標本處理 術后立即取10 mm×10 mm×4 mm的新鮮標本固定于10%中性甲醛內(24 h)，常規石蠟包埋，4 μm連續切片6張，2張常規HE染色確定組織學類型，其余用于免疫組化染色。

1.3免疫組化染色 用免疫組化SP法試劑盒(北京中杉金橋生物技術公司)，經脫蠟，高壓鍋熱修復，過氧化氫封閉后滴加一抗，4℃過夜，滴加二抗試劑，最后DAB顯色，封片，檢測ER、PR和EGFR在乳腺癌組織中的表達情況。染色程序嚴格按照試劑盒要求進行，陽性對照用已知的ER、PR、EGFR陽性切片，陰性對照用PBS代替一抗。

1.4免疫組化結果判定 陽性物質呈棕黃色。ER、PR陽性染色主要集中在細胞核，EGFR陽性染色在近胞膜處，將陽性部位出現了均勻一致的棕黃色顆粒定義為陽性細胞。連續閱讀20個高倍鏡視野，其中陽性細胞計數占腫瘤細胞總數的20%以上者為陽性病例，否則為陰性病例。

1.5統計學處理 采用SPSS14.0統計軟件進行χ2檢驗和Spearman等級相關分析。

2 結 果

2.1PR、ER和EGFR的表達與乳腺癌生物學特性的關系 鏡下可見PR、ER的陽性物主要分布在細胞核內，EGFR的陽性物主要分布在近胞膜處。這三種基因表達與患者年齡和癌變部位無明顯相關性(P>0.05)。在非浸潤性乳腺癌內PR、 ER陽性率明顯高于浸潤性乳腺癌(P<0.05)，而EGFR陽性率低于浸潤性乳腺癌(P<0.05)。見表1。

2.2淋巴結轉移數與EGFR在乳腺癌中表達關系 EGFR在有淋巴結轉移組表達高于無淋巴結轉移組(59.01% vs 35.59%，P<0.05)，且在淋巴結轉移數超過15個的患者中其表達率明顯高于淋巴結未轉移或未達15個的患者(75.86% vs 43.75%，P<0.001)。見表1。

表1 PR、 ER和EGFR的表達與乳腺癌生物學特性的關系〔n(%)〕

2.3PR、ER和EGFR在乳腺癌中表達的相關性 ER、PR均(+)者32例，ER(+)PR(-)者25例，ER(-)PR(+)者54例，ER、PR均(-)者41例。ER表達與PR表達無明顯相關性(P>0.05)。PR與ER之間表達存在正相關性(r=0.208,P<0.05)，PR與EGFR之間表達存在負相關性(r=-0.218,P<0.05)。

3 討 論

EGFR基因位于7p11.13，其產物是分子量為170 kD的糖蛋白，分布在胞膜上，由胞外區(受體部位)、跨膜區、胞內區(激酶活性區)組成，是有“受體酶”之稱的細胞表面傳感器〔2〕。研究表明，在正常乳腺細胞內也合成適量的EGFR，當與轉化生長因子(TGF)-α、EGFR等配體結合后引起構象改變并磷酸化，同時產生多種信息將刺激信號傳遞至細胞核，促進細胞增殖分化及遷移〔3〕。由于代謝因素或細胞周圍微環境的改變，使腫瘤組織合成的EGFR增加，增強受體對配體的親和力，結合后通過受體信號傳導途徑促進DNA的合成，加快細胞的異常分裂、增殖，促進腫瘤的生長和轉移。本實驗結果表明在非浸潤性乳腺癌內EGFR陽性率明顯低于浸潤性乳腺癌，無淋巴結轉移的患者EGFR表達低于有淋巴結轉移患者，而與年齡、癌變部位之間無關。Piyathilake等〔4〕在研究中發現，正常組織、癌前病變組織和癌組織中EGFR的表達是逐級升高的，而本研究中發現EGFR在無淋巴結轉移患者、淋巴結轉移數不超過15個患者和淋巴結轉移數超過15個患者中表達率依次升高，說明EGFR過度表達的腫瘤細胞分化差，有更強的分裂增殖能力，易于發生轉移，這與國外有關報道〔5，6〕相符。另有文獻報道，EGFR的高表達能抑制細胞凋亡，促進腫瘤內血管形成，因此，EGFR過表達是腫瘤患者預后不良的重要指標之一，也是腫瘤導向診斷及治療的靶點〔7，8〕。

ER、PR是存在于正常乳腺上皮細胞胞核內的甾體激素受體，調節乳腺細胞的增殖和分化，其分子上有激素結合區及DNA結合區〔9〕。乳腺細胞癌變后仍能保持其激素依賴性生長，臨床上激素依賴性乳腺癌約占全部乳腺癌的50%～60%〔10〕。隨著腫瘤細胞分化變差，受體表達降低，腫瘤對激素的依賴性生長隨之降低，導致激素對腫瘤生長的調控作用也降低。研究表明ER、PR陽性率高的患者，對各種治療有效尤其是對內分泌治療敏感性高，可使腫塊縮小，癌細胞凋亡〔11〕。而汪波等〔12〕稱ER陰性患者內分泌治療有效率僅為5%～8%。經證實，ER、PR陽性表達的乳腺癌術后5年生存率明顯高于陰性者，且術后復發和遠處轉移較少〔13〕。檢測ER、PR表達程度對判斷預后，指導內分泌治療具有一定的指導意義。

本實驗發現，ER、PR、EGFR對于判斷腫瘤分化、浸潤和轉移程度均有一定的指導意義。正常細胞中EGFR表達水平較低，對于ER(+)的患者，腫瘤的生長轉移多依賴于雌激素的作用，當長期的內分泌治療阻斷這個通路后，可通過一定機制激活EGFR基因的轉錄〔14〕，提高了EGFR介導的Ras-Raf-MEK-Erk/MAPK〔15〕和PI3K-PKC-IKK〔16〕信號轉導通路活性。從而使細胞對內分泌治療產生耐藥性〔17〕。此外，高表達的EGFR可以抵抗放、化療中對腫瘤細胞的細胞毒性作用〔18〕，使其對放、化療不敏感。因此可推測EGFR的信號通路活性提高，是乳腺癌內分泌治療中產生耐藥的機制之一。正是耐藥的乳腺癌細胞對EGFR信號通路的依賴，因此在乳腺癌內分泌治療過程中，加用EGFR信號轉導通路抑制劑，將更有利于控制腫瘤的生長，延緩耐藥的產生，達到更好的治療效果，預計不久將應用于臨床〔19〕。

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