不同劑量蒲公英多糖對小鼠的抗疲勞作用

胡寶生

(河北省保定市第一醫院藥劑科,河北 保定 071000)

蒲公英(Taraxacum)具有清熱、消腫、散結、利尿通淋等功效，主要用于臨床治療乳瘡腫毒等病癥〔1〕。蒲公英主要成分包括甾醇、棕櫚酸和多糖，且多糖是其較為重要的信息分子，參與多種病理、生理過程，有著多種藥理活性〔2〕。疲勞是目前絕大多數工作人員較為普遍出現的一種病癥，長期疲勞往往伴有器質性病變，致使身體失衡、協調性變差，嚴重者會導致腦部血液供應不足，出現記憶力下降、注意力不集中、反應遲鈍、頭暈頭痛等，精神癥狀如憂郁、焦慮、煩躁、易激動等也相繼出現，致使入睡困難、睡眠不深、容易驚醒、失眠等。近年來，人們對蒲公英多糖的免疫、清除自由基等活性進行了較多研究〔3,4〕。有文獻報道〔1〕，0.5 g/mg的蒲公英多糖對小鼠具有抗疲勞作用。本文分析蒲公英多糖對小鼠的抗疲勞作用。

1 材料和方法

1.1材料 昆明種健康小鼠40只，雄性，體質量為18～22 g，由實驗動物中心提供，動物許可證號：SCXK(粵)2008-0002。干品蒲公英購于廣州市大藥房。

1.2主要儀器與試劑 分光光度計(上海美譜達儀器有限公司)；臺式離心機(金壇市金南儀器制造有限公司)；勻漿機(江蘇金壇市恒豐儀器制造有限公司)；電子分析天平(昆山巨天儀器設備有限公司)。三氯乙酸、蒽酮、濃硫酸等購自國藥集團化學試劑有限公司，均為分析純。

1.3蒲公英多糖提取 將新鮮的蒲公英根洗凈約10 g，切成小片，迅速放入0.25%Na2SO3護色0.5 h。60℃干燥至恒質量，粉碎機磨成粉末，過400目篩備用。取蒲公英粉末用濾紙包好，放入索式提取器，40℃石油醚回流脫脂3 h，并用80%乙醇回流，除去樣品中的單糖、寡糖以及其他小分子物質。隨之沸騰水浴濃縮至100 ml，即每毫升溶液含生藥0.1 g，4℃冰箱保存備用。

1.4方法 取小鼠40只，1 w適應期后按體質量隨機分為四組，分籠飼養(每籠10只)。參照預實驗結果，100%與0%的致死量為實驗的上下限劑量(Dmax和Dmin)分別為0和0.5 g/kg，所以選取0.1、0.3、0.5 g/kg作為本研究的低中高劑量。蒲公英多糖低、中、高劑量組給予相應劑量的蒲公英多糖，灌胃，對照組給予等劑量生理鹽水，連續灌胃3 w，1次/d，每次20 ml/kg體質量。于末次灌胃0.5 h后進行各項抗疲勞指標的測定。

1.5測試指標與方法 (1)力竭游泳時間：小鼠尾系一質量為小鼠體質量5%的鉛塊，將小鼠置于水深30cm的游泳箱中，水溫控制在(30±3)℃。強迫小鼠游泳至力竭，記錄小鼠開始游泳至沉入水底8 s不動的間隔時間。動物服藥3 w后進行試驗。(2)血清尿素氮、乳酸、乳酸脫氫酶的測定：將小鼠不負重置于水深30 cm的恒溫游泳箱(廣州廣物實能機電設備有限公司)中，水溫控制在(30±3)℃。游泳1.5 h，休息0.5 h后立刻尾部采血1 ml，不加抗凝劑的情況下置4℃冰箱放置3 h，血凝固后離心取血清液(2 500 r/min離心15 min)，參照文獻〔5〕利用分光光度計〔尼柯(上海)儀器有限公司〕測定血清尿素氮值、乳酸、乳酸脫氫酶。(3)肝糖原的測定：動物服藥3 w后，于末次灌胃0.5 h后小鼠脫頸處死，取肝臟。參照文獻〔6〕采用分光光度計〔尼柯(上海)儀器有限公司〕蒽酮-濃硫酸法測定肝糖原含量。

2 結 果

2.1蒲公英多糖對小鼠力竭游泳時間的影響 蒲公英多糖低、中、高劑量組〔(83.03±11.20)、(93.44±10.75)、(94.97±10.92)min〕與對照組〔(70.20±10.23)min〕比較，均能顯著延長小鼠負重游泳時間，且中、高劑量組差異無統計學意義(P>0.05)。

2.2蒲公英多糖對小鼠乳酸、乳酸脫氫酶的影響 蒲公英多糖低、中、高劑量組與對照組比較，均能顯著降低小鼠血清乳酸含量，升高乳酸脫氫酶活性，且中、高劑量組差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 蒲公英多糖對小鼠乳酸及乳酸脫氫酶含量的影響±s,n=10)

2.3蒲公英多糖對小鼠血清尿素氮、肝糖原含量的影響 蒲公英多糖低、中、高劑量組與對照組比較，均能顯著降低血清尿素氮濃度，升高小鼠肝糖原含量，且中、高劑量組差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 蒲公英多糖對小鼠血清尿素氮、肝糖原含量的影響±s,n=10)

3 討 論

疲勞是機體在一定環境條件下，長時間或過于負重、緊張等所導致的工作效率暫時降低的一種生理心理癥狀〔7～9〕。疲勞的最直接和客觀的表現是運動耐力下降，而游泳屬全身消耗性運動，游泳可在一定程度上消耗大量的能量和氧氣，同時在體內可堆積大量的乳酸，力竭游泳時間可作為反映運動耐力的重要指標而被應用于各方面的檢驗〔10〕。有報道顯示，乳酸、乳酸脫氫酶、肝糖原水平均可反映肌體的有氧代謝能力，可作為疲勞程度檢測的重要指標。而抑制疲勞可通過機體更節省地利用糖原和三磷酸腺苷，而達到為肌肉活動提供更充分的能量的目的。本研究提示中劑量蒲公英多糖可促進機體對乳酸能力的清除，促進肝糖原儲備，通過增加能量物質的儲備，為機體提供更多的能量來增強小鼠抗疲勞的能力，效果與高劑量相當。尿素氮是體內氨基酸分解代謝的最終產物之一，血中尿素氮主要來源于肝臟，通過腎臟隨尿液排出〔11,12〕。有研究表明〔13,14〕，機體血清尿素氮含量會隨運動時間的延長而有所增加，即血清尿素氮產生越多，身體抗疲勞性越差，血清尿酸氮的水平可反映機體抗疲勞的能力，本研究結果與上述報道一致。

綜上所述，蒲公英多糖可促進機體對乳酸能力的清除，促進肝糖原儲備，通過增加能量物質的儲備，增強小鼠抗疲勞的能力。但其具體的作用機制尚無定論，劑量0.3 g/kg是否可作為最佳劑量來對抗疲勞，仍需要進一步深入的研究。

4 參考文獻

1楊曉杰,付學鵬,劉澤東,等.蒲公英多糖抗疲勞作用研究〔J〕.時珍國醫國藥,2008;19(11):2686-7.

2陳福星,陳文英,郝艷霜等.蒲公英多糖對小鼠免疫器官的影響〔J〕.動物醫學進展,2008;29(4):10-2.

3付學鵬,楊曉杰.蒲公英多糖的提取及含量測定〔J〕.現代食品科技,2007;23(5):37-9.

4陳文英,郝艷霜,何 欣,等.蒲公英多糖對雛雞外周血CD4+和CD8+T淋巴細胞亞群的影響〔J〕.江蘇農業科學,2011;39(3):265-7.

5馬紅梅,朱蕓菲,魏 軍,等.藏蒲公英多糖納米乳對小鼠免疫機能的影響〔J〕.江蘇農業科學,2013;41(1):214-6.

6楊曉杰,付學鵬.蒲公英多糖體外抑瘤和抗突變作用研究〔J〕.時珍國醫國藥,2009;20(10):2470-1.

7梁桂英,付艷萍,欒 添,等.蒲公英水提液對小鼠抗疲勞作用的研究〔J〕.安徽農業科學,2011;39(33):20402-3.

8張占英,許書琦.北五味子多糖對小鼠抗疲勞和耐缺氧的作用〔J〕.東北林業大學學報,2011;39(12):98-9,103.

9代春敏,李 晶,林嘉賓,等.高山紅景天對昆明種小鼠抗疲勞作用的研究〔J〕.安徽農業科學,2010;38(30):16850-2,9.

10王永新,白 霜,詹 皓,等.紅景天復方提高小鼠抗疲勞能力的效果〔J〕.解放軍預防醫學雜志,2009;27(2):85-8.

11郝艷霜,魏 軍,李樹鵬,等.藏蒲公英與河北蒲公英多糖的比較〔J〕.江蘇農業科學,2012;40(7):286-8.

12陳 靜,楊曉杰,程加春,等.蒲公英多糖脫色方法的研究〔J〕.時珍國醫國藥,2009;20(5):1128-9.

13李樹鵬,魏 軍,郝艷霜,等.蒲公英多糖對雛雞免疫機能的研究〔J〕.中國家禽,2012;34(11):62-4.

14楊曉杰,鄭云姬,李 娜,等.亞洲蒲公英多糖的抑菌性和抗氧化性研究〔J〕.時珍國醫國藥,2012;23(1):109-10.