3，5-二氨基苯甲酸縮鄰香草醛席夫堿鎘配合物的合成及抗腫瘤活性研究

張 震

(濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，山東 日照 276826)

席夫堿及其配合物的特殊生理活性，使其在抑菌、抗腫瘤等方面表現(xiàn)獨(dú)特的藥理活性[1-2]。席夫堿配合物的藥用性引起人們的廣泛關(guān)注，對(duì)其藥理作用的研究也進(jìn)一步加深。近年來，研究表明許多席夫堿銅配合物具有良好的蛋白酶體抑制作用，從而選擇性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡[3-4]。本實(shí)驗(yàn)以3，5-二氨基苯甲酸和鄰香草醛為原料合成了席夫堿配體，進(jìn)而合成了其鎘配合物，對(duì)其進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征。在細(xì)胞水平上，通過細(xì)胞增殖分析，蛋白酶體活性抑制作用分析，免疫蛋白印跡分析和細(xì)胞形態(tài)分析，研究了配合物的抗腫瘤活性和對(duì)正常細(xì)胞的毒性。以期在此研究基礎(chǔ)上，為設(shè)計(jì)、合成低毒、高效且選擇性高的新型抗腫瘤藥物提供重要的理論依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑和儀器

3，5-二氨基苯甲酸、鄰香草醛和醋酸鎘(阿拉丁試劑有限公司)；DMSO和溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑)(MTT)(Sigma-Aldrich公司)；DMEM/F12 (1∶1)、青霉素、鏈霉素(Invitrogen 公司)；胎牛血清 (FBS)(Aleken Biologicals公司)；熒光底物 Suc-LLVY-AMC (Calbiochem 公司)；單克隆抗體(PARP) 、ubiquitin (P4D1) 、IκB-α (H-4)、 β-actin (C-11) 和第二抗體(Santa Cruz 公司)。Perkin-Elmer 240C型 元素分析儀；Nicolet 170SX 型紅外光譜儀(KBr 壓片)；AVANCE III (600 MHz)超導(dǎo)核磁共振波譜儀；DDS-312 型電導(dǎo)率儀。

1.2 席夫堿配體(L)的合成

將2.0 mmol的3，5-二氨基苯甲酸，用10ml乙醇溶解后，不斷攪拌下，滴入到4 mmol的鄰香草醛無水乙醇溶液中，逐漸有橘黃色沉淀產(chǎn)生，50 ℃反應(yīng)2 h，室溫下冷卻，過濾，用無水乙醇多次洗滌沉淀，得到橘黃色席夫堿配體L，呈粉末狀。收率80%。元素分析(C7H4N2O2) (C8H6O2)2計(jì)算值(%)：C，66.02；H，4.34；N，6.69。實(shí)測(cè)值：C，65.95；H，4.41；N，6.63。

1.3 配合物CdL的合成

用20ml甲醇加熱溶解希夫堿配體，逐滴加入含等摩爾的醋酸鎘的甲醇溶液，60 ～70 ℃回流7 h。……