青蒿琥酯對實驗性自身免疫性重癥肌無力大鼠的免疫調節作用*

張新欣 李曉麗 莊 珊 劉 深 李秀華 李衍濱△

(1濰坊醫學院臨床學院，山東 濰坊 261053；2山東大學附屬千佛山醫院，山東 濟南 250014；3山東中醫藥大學，濟南 250014)

重癥肌無力(myasthenia gravis，MG)主要由乙酰膽堿受體抗體(acetylcholine receptor，AChR)介導、細胞免疫依賴、補體參與的自身免疫性疾病[1]。大量高親和力AChR抗體與神經肌肉突觸后膜上的AChR結合后通過激活補體而導致AChR的破壞或消失[2]。臨床上表現為晨輕暮重，活動后加重、休息后減輕的骨骼肌無力現象。本文通過建立實驗性自身免疫性重癥肌無力動物模型(experimental autoimmune myasthenia gravis，EAMG)，探討青蒿琥酯對實驗性自身免疫性重癥肌無力大鼠TNF-α、IgG2a、IgG2b的影響及其作用機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1實驗動物 雌性Lewis大鼠(北京維通利華實驗動物技術有限公司)。

1.1.2主要試劑 抗原系人工合成的大鼠來源的AChR α亞基97-116 肽段，肽序列 DGDFAIVKFT-KVLLDYTGHI(西安聯美生物科技有限公司)；青蒿琥酯(廣西桂林藥業股份有限公司)；H37Ra結核桿菌(美國 Difco公司)；RPMI 1640(北京HyClone公司)；胎牛血清(美國Gibco公司)；生物素標記兔抗大IgG、HRP標記的鏈霉親和素(北京博奧森生物技術有限公司)。

1.2 方法

1.2.1EAMG模型的誘導[3]和臨床評分 將人工合成的大鼠來源的AChR α亞基肽段溶于滅活結核桿菌和不完全弗氏佐劑(incomplete freund's adjuvant，IFA)中，于每只大鼠每側后足墊皮下分別注射100 μl抗原乳液。第1次接種11d后再次強化免疫。首次免疫的當天標記為0d。采用雙盲隔日稱體重并觀察大鼠癥狀。用Lennon臨床評分測量肌力。

1.2.2分組與治療 將15只大鼠隨機分為青蒿琥酯大劑量組(100 mg/kg)、小劑量組(10 mg/kg)和對照組(生理鹽水)。于免疫后第10天，即EAMG大鼠發病初期，每日給予灌胃治療，直至大鼠發病高峰期第43天。……