Treg細胞與原因不明復發性流產關系的研究進展

楊青 王紹娟

T細胞為異質性群體, 根據其表面分子和功能特點可分為不同亞群。根據活化狀態, 可分為初始T細胞(naive T cell)、效應T細胞(effector T cell)和記憶性T細胞(memory T cell)；調節性T細胞(T regulatory cell, Treg)是近年來發現的一群具有免疫抑制功能的細胞亞群, Treg細胞的表面標志除了分子外還有一個特征性的表面標志分子(IL-受體α鏈), 其他標志主要還有Foxp3、白細胞介素-7受體α鏈(CD127)等, 其中Treg細胞對于免疫應答中的負調節及免疫耐受中作用的發揮是至關重要的。

復發性流產( recurrent spontaneous abortion, RSA) , 亦稱習慣性流產, 主要是與相同性伴侶在妊娠20周前連續有超過2次的自然流產的現象［1］, URSA 80%以上都與免疫因素相關。現代生殖免疫學認為：胚胎和胎兒對母體來說屬于半同種異體抗原, 即妊娠相當于同種半異體移植過程［2］, 胚胎孕育早期母體最早且直接接觸的部分主要是蛻膜和絨毛膜組織, 此母-胎界面使胎兒與母體之間發生著復雜的對話, 母-胎界面上特有的免疫耐受現在隨之產生, 出現了早期妊娠排斥與耐受間的相互平衡, 才能使胎兒成活直至分娩［3］, 研究發現,亞群中Treg細胞與URSA的發生密切相關, 在URSA患者體內檢測Treg 細胞數量低于正常早期孕婦。因此, Treg細胞在URSA發生中作用的研究已成為當前的研究熱點。本文就Treg細胞與原因不明復發性流產的關系綜述如下。

1 Treg細胞分化發育與免疫功能

1.1 分化與發育 1995年Sakaguchi等首次報道Treg細胞,報道指出, 在正常人和小鼠外周血及脾臟組織的CD4+T細胞中存在著持續高表達CD25分子的亞群(主要表現為IL-2α受體鏈)。根據其來源不同, Treg細胞可主要分為天然性調節性T細胞(natural Treg , 自然性Treg或nTreg)和誘導性調節性T細胞( induced regulatory T cell, iTreg)。nTreg主要由胸腺髓質的T細胞發育產生, 還可通過癌癥、細胞移植等途徑轉化, iTreg往往可用來替代nTreg, 在數量及作用上彌補nTreg的相關缺陷, 維持正常生理及機體的正常平衡。

2 Treg細胞與妊娠耐受

Treg細胞存在免疫無能及免疫抑制的作用特點, 可抑制母體對同種異體移植物胎兒的免疫反應, 并在此過程中發揮重要作用, 利用細胞的調節免疫, 加速耐受的形成和維持妊娠。梅珊珊等［5］研究發現, 適宜水平的Treg細胞對于正常妊娠的維持意義重大。陳書恩等［6］研究還發現,Treg細胞在妊娠早期就出現并發揮作用, 妊娠中期達最高峰, 產后Treg細胞數量會下降, 所以在整個孕期Treg細胞的數量是動態變化的。Miiyara M［7］提出Treg細胞可使蛻膜微環境的免疫耐受狀態平衡使得妊娠繼續維持。Dimova T［8］檢測了正常早孕婦女與非妊娠婦女蛻膜組織和外周血中Creg細胞數量, 發現蛻膜組織中Treg細胞數量比外周血中含量高。

3 Treg細胞與URSA

近年來流行病學報道指出, 較多因素影響下的免疫學異常對于URSA的發病有著重大的作用。近來較多的超過50%的復發性流產的發病原因尚無定論, 使得缺乏有針對性的治療。Treg細胞對于外周T細胞內環境的穩定, 有著一定的維持作用及功能, 在免疫耐受發生的過程中作用明顯［8］, 而妊娠失敗可能由其平衡失調所造成。有學者指出［9］,Foxp3的功能或它的表達發生改變與URSA的發生呈顯著相關性。TGF-β可介導Foxp3的表達, 促進Treg細胞增殖［10］。資料顯示［11,12］, 在RSA小鼠模型研究中, 經陰道給予reg細胞, 可預防小鼠發生RSA。田小燕等［13］通過動物實驗研究發現Treg細胞在誘導母胎免疫耐受方面起著重要作用。Winger等［14］實驗證實, 早孕期孕婦外周血中 Treg細胞的比例降低可導致繼續正常妊娠的幾率降低, 由此推斷Treg 或許可以作為評估早孕期婦女流產危險性的標志。一些臨床實驗發現復發性流產主動免疫治療等方法治療前后, 外周血Treg 相較于治療前增多。Yang H［15］研究顯示自然流產患者外周血及蛻膜組織中CD25highTreg細胞數量較正常孕婦較少。Mei S等［16］采用流式分析技術, 檢測了URSA婦女和正常妊娠婦女外周血和蛻膜中CD25highFTreg 的比例, 結果為前者低于后者。Jin LP等［17］學者表明, Treg細胞通過對Th1/Th2平衡向Th2偏移進行調控, 來介導B細胞增殖及相關的免疫耐受, 促進妊娠的發生。其中過程中的關鍵細胞因子, 使初始型T細胞向Th2型分化, 保護胚胎的同種異體抗原作用的發揮, 加強母胎的免疫耐受能力生, 從而使妊娠獲得成功。楊卉等近年研究發現, 檢測非妊娠女性與正常妊娠期母體外周血Treg細胞絕對數, 結果顯示正常妊娠期母體外周血中Treg細胞絕對數可增多高達2倍以上。而對比正常妊娠蛻膜與自然流產蛻膜Treg細胞的數量, 自然流產蛻膜中的Treg細胞數量表達, 較正常妊娠蛻膜Treg細胞的數量水平降低明顯, 使得妊娠失敗。楊小猛等［18］研究認為, IL-10、TGF-β的免疫下調功能可能與妊娠耐受有關, 其含量降低是URSA發生的重要原因。故若在流產治療中對增殖Treg細胞進行有效的刺激, 可促進母胎免疫耐受作用的誘導加強。可見, Treg細胞可被作為一種生物標記物來用于臨床檢測［19,20］。

4 小結

綜上所述, URSA往往是由于生殖免疫耐受受到影響。Treg細胞即細胞是獨特免疫調節功能的T細胞亞群。正常妊娠期母體外周血中Treg細胞絕對數可增多,Treg細胞可調控Th1/Th2平衡向Th2偏移, Treg細胞及細胞因子IL-10、TGF-β體現優勢, 可以促使母胎免疫耐受形成,有利于妊娠；Treg細胞及細胞因子IL- 10、TGF-β水平下降, 則不利于妊娠。監測評價妊娠期母體Treg細胞與及其參與免疫應答分泌細胞因子, 對診斷、機制研究、療效評價都有重要意義, 活化自體Treg細胞用于URSA患者治療具有潛在實際價值。

［1］Musters AM, Taminniau-Bloem EF, van den Boogaard E, et al.Supportive care for women with unexplained recurrent miscarriage:p atients’perspectives.Hum Reprod, 2011, 26(4):873-877.

［2］Leber A, Zenclussen ML, Teles A, et al.Pregnancy:tolerance and suppression of immune responses.Methods Mol Biol, 2011, 19(7):397-417.

［3］李大金.重視協同刺激分子在母胎免疫耐受中的調控作用.國際婦產科學雜志, 2009, 36(1):1-3.

［4］楊金英, 李大金, 金莉萍, 等.反復自然流產患者外周血調節性T 細胞Foxp3 的表達.現代免疫學, 2008, 28(2):101-103.

［5］梅珊珊, 譚劍平 , 張建平, 等.CD4+CD25highT細胞和FOXP3在不明原因復發性自然流產中的作用.中山大學學報(醫學科學版), 2010, 31(4):461-466.

［6］陳書恩, 楊小猛, 桑沛霞, 等.妊娠期調節性T細胞與雌激素水平變化對母胎免疫耐受的影響.中國婦幼保健, 2010(25):2644-2646.

［7］Miyara M, Sakaguchi S.Human FoxP3(+)CD4(+)regulatory T cells:their knowns and unknowns.Immunol Cell Biol, 2011, 89(3):346-351.

［8］Dimova T, Nagaeva O, Stenqvist AC, et al.Maternal Foxp3 expressing CD4+CD25+ and CD4+CD25-reguatory T-cell populations are enriched in human early normal preganncy decidua:a phentypic study of paired decidual and peripheral blood samples.Am J Reprod Immunol, 2011, 66(Suppl)1:44-56.

［9］Wang WJ, Hao CF, Lin QD.Dysregulation of macrophage activation by decidual regulatory T cells in unexplained recurrent miscarriage patients.Reprod Immunol, 2011, 92(1-2):97-102.

［10］Wu Z, You Z, Zhang C, et al.Association between functional polymorphisms of Foxp3 gene and the occurrence of unexplained recurrent spontaneous abortion in a Chinese Han population.Clin Dev Immunol, 2012: 896458.

［11］Chai JG, Coe D, Chen D, et al.In vitro expansion improves in vivo regulation by CD4+CD25+ regulatory T cells.Immunol, 2008(180):858-869.

［12］夏欣一, 周鑫, 黃宇烽.轉錄因子Foxp3與生殖研究進展.中華男科學雜志, 2009, 15(7):642-645.

［13］田小燕, 李林, 葉桂娥, 等.復發性流產主動免疫治療及與調節性T淋巴細胞相關性的研究.臨床醫學, 2009, 29(2):97-99.

［14］Winger EE, Reed JL.Low circulating CD4(+)CD25(+) Foxp3(+)T regulatory cell levels predict miscarriage risk in newly pregnant women with a history of failure .Am J Reprod Immunol, 2011,66(4): 320-328.

［15］Yang H, Qiu L, Chen G, et al.Proportional change of CD4+CD25+regulatory T cells in decidua and peripheral blood in unexplained recurrent spontaneous abortion patients.Fertil Steril,2008, 89(2):656-661.

［16］Mei S, Tan J, Chen H, et al.Changes of CD4+CD25high regulatory T cells and Foxp3 expression in unexplained recurrent spontaneous abortion patients.Fert Ster, 2010, 94(6):2244-2247.

［17］Jin LP, Chen QY, Zhang T, et al.The CD4 +CD25+ brightregulatory T cells and CTLA-4 expression in peripheral anddecidual lymphocytes are down-regulated in human miscarriage.Clin Immunol, 2009, 133(3):402-410.

［18］楊小猛, 趙丹, 陳書恩, 等.CD4+CD25+ Treg細胞、TGF-β和IL-10在反復自然流產中的變化.醫藥論壇雜志, 2011, 32(12):19-21.

［19］Yang H, Qiu L, Di W, et al.Proportional change of CD4+CD25+regulatory T cells after lymphocyte therapy in unexplained recurrent spontaneous abortion patients.Fertil Steril, 2009,92(1):301-305.

［20］陳赟, 章勤.反復自然流產的主動免疫治療進展.中華中醫藥學刊, 2010, 28(10):2182-2185.