胃腸道間質瘤中P21WAF1和Bax的表達及意義

黃昕　冉龍艷　吳云濤　等

【摘要】 目的 探討胃腸道間質瘤（GIST）中P21WAF1和Bax的表達與生物學行為的關系。方法 運用免疫組化SP法檢測P21WAF1和Bax在胃腸道間質瘤中的表達情況， 并分析其在良性、潛在惡性、惡性病例中的表達差異。結果 55例GIST中， P21WAF1和Bax的陽性表達率分別為54.5%和60.0%。P21WAF1和Bax的表達隨著惡性程度的增加而增加， 與良性組相比差異有統計學意義（P<0.05）。P21WAF1與Bax的表達有顯著相關性。結論 檢測P21WAF1和Bax可作為預測胃腸道間質瘤惡性潛能的重要參考指標。

【關鍵詞】 胃腸道間質瘤； P21WAF1；Bax；免疫組織化學

胃腸道間質瘤是一組較為復雜的胃腸道間葉性腫瘤， 其分化途徑差異很大， 有顯示向平滑肌分化的、向神經成分分化的、或雙向分化的， 部分表達CD117抗原和具有c-kit基因突變。從臨床表現及預后而言， 生物學行為難以準確預測， 有些轉移灶可以在原發腫瘤切除30年之后才發現。在日常病理診斷中， 仍然依靠腫瘤大小、核分裂、細胞形態等來綜合判斷預測其惡性程度的大小， 因此尋找能判斷GIST生物學行為的客觀指標仍然是臨床關注以及病理研究的熱點。本研究通過檢測P21WAF1和Bax在GIST中的表達， 以求探討其與臨床病理特征及生物學行為的關系。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集貴陽醫學院附屬醫院1990～2006年期間術后診斷為胃腸道間葉源性腫瘤的病例， 經免疫組化標記CD117、CD34、Desmin、 SMA、S-100蛋白篩選， 從中確定GIST 55例。其中男29例， 女26例， 年齡24～77歲， 中位年齡54.8；病變部位： 食管1例， 胃23例， 小腸10例， 結腸6例， 直腸8例， 盆腔2例， 腹壁1例， 腹膜后4例。按照Emory等[1]提出的標準將GIST進行分級：良性14例， 潛在惡性14例， 惡性27例。

1. 2 方法 取上述存檔的石蠟包埋組織塊， 3 μm連續切片， 貼在已事先用APES膠處理好的載玻片上， 3%過氧化氫去離子水孵育5～10 min， 以消除內源性過氧化物酶活性；微波處理修復抗原（98℃， 15 min）；正常山羊血清封閉組織中非特異性抗原， 第一抗體：來自北京中杉金橋生物技術有限公司的鼠抗人P21WAF1單克隆抗體、鼠抗人Bax單克隆抗體， 用磷酸鹽緩沖液作為陰性對照， 用乳腺浸潤型導管癌腺上皮作為P21WAF1陽性對照；用胃腺癌上皮為Bax陽性對照， 嚴格參照說明書進行免疫組化染色SP法。結果判斷： 陽性定位為胞核及胞質出現棕黃色顆粒， 且著染細胞數>10%判斷為陽性； P21WAF1陽性定位為細胞核， Bax陽性定位為細胞質。

1. 3 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件分析所得數據， 計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 P21WAF1在GIST中的表達 P21WAF1的表達在良性GIST、潛在惡性、惡性GIST的表達率分別為21.4%、64.2%和66.7%， 良性和潛在惡性之間及惡性之間 P21WAF1的陽性表達率差異有統計學意義（χ2=8.19， P<0.05）， 但潛在惡性組和惡性組之間的表達率差異無統計學意義（χ2=0.5， P>0.05）。

2. 2 Bax在 GIST 中的表達 Bax的表達在良性GIST、潛在惡性、惡性GIST的表達率分別為28.6%、71.4%和70.3%， 良性和潛在惡性及惡性之間Bax的陽性表達率差異有統計學意義（χ2=7.62， P<0.05）， 但潛在惡性組和惡性組之間的表達率差異無統計學意義（χ2=0.27， P>0.05）。

2. 3 P21WAF1與Bax表達的相關性 55例間質瘤中， P21WAF1與Bax 均陽性的26例， 均陰性的19例， 前者陽性后者陰性的3例， 前者陰性后者陽性的7例， 經χ2檢驗表明：P21WAF1與Bax在GIST中表達呈顯著相關性（χ2=22.45， P<0.05）。

3 討論

P21WAF1 作為腫瘤抑制基因， 與多種腫瘤的發生、發展及預后有關， 但P21WAF1的表達在不同組織差異較大。對大多數惡性組織而言， P21WAF1的表達以與正常組織相比降低或缺失為主。而本實驗發現：P21WAF1在良性GIST表達較低， 而在潛在惡性和惡性GIST中表達較高， 良性和潛在惡性或惡性GIST之間P21WAF1的陽性表達率差異有統計學意義（P<0.05）， 說明隨著惡性潛能的增加， 分化程度的不同， 其表達有增加的趨勢。這與其他研究報告惡性 GIST表達P21WAF1結果有一致性[2]。作者推測P21WAF1表達高可能有助于遏制 GIST中腫瘤細胞的無限增生。因此， 檢測GIST組織中P21WAF1表達水平有助于了解GIST的生物學行為。

Bax蛋白作為重要的促凋亡蛋白質， 其可以直接影響線粒體功能， 誘導細胞凋亡。劉艷明等[3]報道36例GIST中有20例表達Bax （55.6%）， 其表達與GIST的部位、組織學分型、腫瘤大小無關。本研究表明， Bax的表達隨惡性程度的增高而增高， 從良性的28.6%到潛在惡性的71.4%， 其表達率在良性組和潛在惡性、惡性組之間差異有統計學意義（P<0.05）， 這對判斷惡性潛能有重要的輔助意義， 因此檢測GIST組織中Bax表達水平有助于了解GIST的生物學行為。

綜上所述， 對于胃腸道間質瘤這類分化復雜、生物學行為復雜的消化道常見間葉來源腫瘤， 除了通過做免疫組化明確診斷之外， 在通過常用指標如腫瘤大小， 結合形態學觀察如：細胞異型性、核分裂、是否壞死等指標外， 還可以通過檢查客觀指標如P21WAF1與Bax的表達， 且兩者有明顯的正相關， 從而更好地判斷其惡性潛能的大小， 給臨床醫生的診斷及治療提供更好的病理支持。

參考文獻

[1] Emory TS， Sobin LH， Lukes L， et al. Prognosis of gastrointestinal smooth muscle（stromal） tumors：dependence on anatomic site. Am J Surg Pathol， 1999， 23（1）：82-87.

[2] 孫潔， 宦大為.胃腸道間質瘤中P21WAF1及Cyclin D1的表達和意義.中國組織化學與細胞化學雜志， 2009， 18（3）：60-62.

[3] 劉艷明， 蔡蘭.胃腸道間質瘤中Bax和Ki67的表達及其意義.中國現代醫生， 2007， 45（20）， 11-12.

[收稿日期：2014-05-19]endprint