不同藥物對關節炎大鼠模型的病理學形態及血液流變學影響的觀察

張 海，吳勤麗，廖旭慧，陶勇玲，歐陽露

0 引言

關節炎是指發生在關節及其周圍組織的炎性疾病，常見類型有類風濕關節炎、骨關節炎、痛風性關節炎、感染性關節炎及創傷性關節炎等，不同關節炎的致病因素、臨床表現、治療及轉歸均不一樣［1］，目前針對關節炎的防控仍以早發現早治療為指導思想，治療延誤將會造成關節軟骨和骨質破壞，最終導致關節畸形，嚴重患者甚至會導致殘廢;臨床治療關節炎尚無特效藥物，常用的藥物有非甾體類抗炎藥物、糖皮質激素、改善病情慢作用抗風濕藥物等［2］。本文觀察不同藥物治療關節炎的臨床療效，將雷公藤多甙和白藜蘆醇應用于關節炎大鼠模型的治療中，通過觀察大鼠的病理學形態及血液流變學參數，探討雷公藤多甙和白藜蘆醇在臨床治療中的應用價值。

1 材料與方法

1.1 材料 選取健康Wistar大鼠40只，雌雄各半，大鼠體質量為150～200 g，實驗大鼠購于中國醫學科學院實驗動物研究所，動物合格證號:2012A044，白藜蘆醇購自西安清樂生物科技有限公司，批號:121106，雷公藤多甙片購自浙江普洛康裕天然藥物有限公司，批號:1207125，硫酸氨基葡萄糖片購自新興同仁藥業有限公司，批號:015217，每組給藥量根據成人用藥量進行換算，大鼠給藥劑量=大鼠體質量×(成人用藥量/成人體重)［3］，計算白藜蘆醇給藥量為 30 mg/(kg·d)，雷公藤多甙給藥量為12 mg/(kg·d)，硫酸氨基葡萄糖給藥量為35 mg/(kg·d);采用血流變微循環儀檢測高切和低切變率下的全血黏度，采用毛細玻管黏度計檢測血漿黏度，相對黏度采用綜合傳感法檢測，聚集指數采用比濁法檢測。

1.2 造模與分組 Wistar大鼠50只適應性飼養1周后，隨機選取其中的10只作為正常對照組，正常對照組大鼠僅注射0.1 mL的生理鹽水，其余40只大鼠在雙膝關節處注射木瓜蛋白酶生理鹽水注射液［4］，每次注射量為0.1 mL，2次/周，連續注射3周后即成模，40只造模大鼠繼續喂養1周后，隨機將其分為模型組(生理鹽水)、實驗組(白藜蘆醇)、對照組(雷公藤多甙)及陽性藥物組(硫酸氨基葡萄糖)，每組均為10只;5組大鼠分別給予不同藥物，給藥方式均為灌胃，實驗組給予白藜蘆醇30 mg/(kg·d)，對照組給予雷公藤多甙12 mg/(kg·d)，陽性藥物組給予硫酸氨基葡萄糖35 mg/(kg·d)，正常對照組和模型組均給予5 mL生理鹽水灌胃，連續灌胃給藥1周［5］。

1.3 關節腫脹度及關節炎指數觀察 分別于造模前和造模后1、2、3周測量大鼠的左后足墊厚度，關節腫脹度(%)=(造模后測量值-造模前測量值)/造模前測量值［6］。采用關節炎分數評分法評價非致炎3只肢體關節的腫脹程度，并根據以上的評價情況計算關節炎指數(AI)。關節腫脹程度共分為5級，0級表示無紅腫，計1分;Ⅰ級表示趾關節處有輕微紅腫，計1分;Ⅱ級表示小趾和足趾關節有明顯紅腫，計2分;Ⅲ級表示踝關節以下具有不同程度紅腫，計3分;Ⅳ級表示全部足爪部位均發生紅腫，計4分。AI值為非致炎三只肢體關節腫脹等級評分和，總分為12分［7］。

1.4 觀察血液流變學參數 給藥3周后，取大鼠股動脈血3～5 mL置于加了肝素的抗凝管中，采用血流變微循環儀檢測血液流變學參數，具體參數包括血液粘度、血漿粘度、紅細胞壓積、紅細胞特性指數［8］。

1.5 統計學方法 采用SPSS 16.0統計學軟件對實驗資料進行統計分析，計數資料組間比較采用χ2檢驗，計量資料組間比較采用兩獨立樣本t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血液流變學參數比較 各組之間的比較見表1。從表1中可見，實驗組血液流變學參數與對照組和模型組比較差異有統計學意義(P＜0.05)，實驗組與正常對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05)，實驗組與陽性藥物組比較差異無統計學意義(P＞0.05)。

表1 兩組各項指標變化情況比較(±s)

表1 兩組各項指標變化情況比較(±s)

注:與對照組和模型組比較，△P＜0.05;與實驗組比較，*P＜0.05，#P＞0.05;與模型組和正常對照組比較，▲P＜0.05

組別 全血黏度(mPa·s)高切 低切血漿黏度(mPa·s)相對黏度(mPa·s)紅細胞壓積 紅細胞聚集指數正常對照組 12.13±0.79* 4.95±0.54* 1.37±0.19* 1.65±0.25* 45.68±0.45* 2.59±0.14*模型組 20.65±0.63 7.33±0.26 1.91±0.15 2.92±0.17 57.49±0.38 3.96±0.18實驗組 15.24±0.81△ 5.87±0.46△ 1.54±0.13△ 1.89±0.16△ 49.43±0.29△ 2.98±0.17△對照組 18.07±0.32▲ 6.51±0.27▲ 1.77±0.11▲ 2.48±0.21▲ 53.74±0.33▲ 3.42±0.24陽性藥物組 14.93±0.48# 5.62±0.38# 1.52±0.16# 1.92±0.13# 48.97±0.52# 2.88±0.27#

2.2 關節腫脹度及關節炎指數比較 各組之間比較見表2。從表2中可見，實驗組關節腫脹度及關節炎指數與對照組和模型組比較差異有統計學意義(P＜0.05)，實驗組與正常對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05)，實驗組與陽性藥物組比較差異無統計學意義(P＞0.05)。

表2 兩組關節腫脹度及關節炎指數比較

3 討論

中醫理論認為，關節炎屬“骨痹”、“歷節病”的范疇，認為其致病因素是由于氣血不足、風寒濕邪等侵入骨骼，導致血瘀經絡［9］、氣血運行不暢，終而使風寒濕邪毒雜至、合而為痹，中醫通常將關節炎分為肝腎不足型、氣血虛寒型、濕熱下注型及風寒濕痹型四類［10］，并根據不同證型給予不同治療藥物。現代中醫學家認為，此病的根本致病因素是正虛與外邪雙重作用的結果［11］，此病的治療關鍵要從綜合治療的方向出發，正虛為脾胃虛弱、氣血不足，外邪為挾濕挾瘀。人體四肢關節是脾臟和陽明經所主，臨床治療要注重健脾運濕、益氣養血。這些治療方法對于改善病理學形態和血流動力學有積極意義，但對于急性發作時臨床癥狀的改善則有一定的局限性，這也是中西醫結合治療的理論基礎［12］。現代醫學研究發現，關節炎患者多存在血液循環障礙的癥狀，這些癥狀可從血液流變學參數中明顯觀察到。正常情況下，人體血液在體內運行暢通，能夠滿足身體組織供氧和養分的需求，但如果血液黏度過高，身體各部位的微循環受到限制，則不能滿足身體組織供氧和養分的需求，此時可能導致機體的損害。其中關節部位的血液微循環障礙在關節炎發病中扮演著重要的角色，因此通過觀察血液流變學參數的變化，可得知關節供氧和養分供給情況，血液流變學參數可作為判斷關節炎轉歸的重要指標［13］。

本文將不同藥物應用于關節炎大鼠模型的治療中，實驗結果顯示，白藜蘆醇組與雷公藤多甙組和模型組比較，血液流變學參數改善更明顯，但與正常對照組比較，其改善效果仍不足，但與陽性藥物組比較差異無統計學意義，由此說明，白藜蘆醇能顯著降低模型大鼠的全血黏度、血漿黏度、聚集指數等指標，這一作用可增加紅細胞的流動性，從而起到改善關節微循環的作用，對于改善關節軟骨的營養狀況、修復退變軟骨等具有積極意義［14］。關節炎的發病基礎是炎性反應，典型的病理特征為粒細胞、淋巴細胞和單核巨噬細胞等增高，這些炎性反應會誘發血管翳形成，破壞關節軟骨和關節滑膜，最終導致關節不可逆的損傷，因此，無論是西醫還是中醫治療關節炎均以抗炎性反應為治療基礎。現代藥理學研究顯示，白藜蘆醇表現出良好的抗炎、抗菌作用，其可通過減少血小板的黏附和活性，從而達到抗炎作用，同時其還具有提高機體免疫力的功效，這些功效對于治療關節炎均具有重要臨床價值。

本文觀察模型大鼠的關節腫脹度和關節炎指數的實驗結果顯示，白藜蘆醇組大鼠與雷公藤多甙組和模型組比較，關節腫脹度改善情況及關節炎指數均更優，但與陽性藥物組比較差異無統計學意義，由此說明，白藜蘆醇能顯著緩解關節炎的充血、腫脹等臨床癥狀，這對于減輕患者痛苦和炎性細胞浸潤具有積極意義，特別是減輕炎性細胞浸潤，對于提高臨床療效和改善預后有重要作用。

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