HPLC法測定復方呋喃西林滴鼻液中鹽酸麻黃堿的含量

王逢春，王 敏，張瑞麟

0 引言

復方呋喃西林滴鼻液收載于2002年版《中國人民解放軍醫療機構制劑規范》(下簡稱《規范》)，具有消炎、收縮血管的作用，主要用于急、慢性鼻炎，鼻竇炎等。按照《規范》質量標準，含量測定方法為分光光度法和旋光法，本品中鹽酸麻黃堿應為標示量的0.90% ～1.10%(g/mL)［1］。但在實際工作中，不同批號制劑中的鹽酸麻黃堿含量測定結果相差較大，考慮可能是制劑中其他物質對鹽酸麻黃堿的紫外吸收有影響。本試驗采用高效液相色譜法測定復方呋喃西林滴鼻液中鹽酸麻黃堿的含量，可提高含量測定的準確度，方法簡便快捷，為評價和控制復方呋喃西林滴鼻液的質量提供依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 1200型高效液相色譜儀(包括四元泵，VWD檢測器，自動進樣器，ChemStation化學工作站);Mettler AE240電子天平(梅特勒公司)。

1.2 試藥 鹽酸麻黃堿對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號:171241-200506);復方呋喃西林滴鼻液(批號:130107、130108、130109)。甲醇為色譜純，水為重蒸餾水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱:Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm ×250 mm，5 μm);流動相:甲醇-0.05%磷酸(35∶65)(每100 mL加十二烷基磺酸鈉0.1 g);流速:1.0 mL/min;檢測波長:210 nm;柱溫:30℃。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取鹽酸麻黃堿對照品10.00 mg，置于10 mL量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，即得對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 精密量取復方呋喃西林滴鼻液供試品1 mL，置于100 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。精密吸取對照品溶液和供試品溶液分別注入液相色譜儀，測定，即得液相色譜圖，見圖1。

圖1 復方呋喃西林滴鼻液HPLC色譜圖

2.4 線性關系考察 精密量取混合對照品儲備液0.1、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0mL，置于10mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得不同濃度的系列對照品溶液。按“2.1”項下色譜條件分別進樣，測定峰面積。以鹽酸麻黃堿的濃度(μg/mL)為橫坐標(X)，以其峰面積積分值為縱坐標(Y)，繪制標準曲線。得回歸方程為鹽酸麻黃堿Y=6.287 X+0.735 8(r=0.999 9，n=6)。結果表明，鹽酸麻黃堿在10.00～200.0 μg/mL范圍內與其峰面積線性關系良好。

2.5 精密度試驗 精密吸取100.0 μg/mL混合對照品溶液，按“2.1”項下色譜條件，連續進樣6次，測定峰面積。結果鹽酸麻黃堿峰面積RSD為0.33%(n=6)，表明儀器的精密度良好。

2.6 穩定性試驗 取批號為130107的供試品溶液，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件，分別在0、2、4、8、10、12 h 各進樣1 次，測定峰面積。結果鹽酸麻黃堿峰面積的RSD為0.75%(n=6)，表明供試品溶液在12 h內穩定性良好。

2.7 重復性試驗 取批號為130107的樣品6份，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件，分別進樣測定。結果鹽酸麻黃堿的平均含量為0.96%，RSD為0.26%(n=6)，表明方法的重復性良好。

2.8 回收率試驗 精密量取鹽酸麻黃堿對照品，按復方呋喃西林滴鼻液處方配成80、100、120 μg/mL等3個濃度水平的樣品溶液，每個濃度各分別制備3份供試品溶液，分別進樣測定，記錄峰面積，計算鹽酸麻黃堿的含量回收率，結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果(n=9)

2.9 樣品含量測定 取批號為130107、130108、130109的3份樣品，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件，分別進樣測定，測定結果與《規范》中所采用的分光光度法比較，結果見表2。

表2 鹽酸麻黃堿含量測定結果

3 討論

通過比較《規范》中分光光度法與改進后的高效液相色譜法的測定結果，發現前者測定結果均偏高。分析其原因可能是因為鹽酸麻黃堿與鹽酸偽麻黃堿為同分異構體，紫外吸收接近，在《規范》的分光光度法測定中，很難使兩者有效分離，造成鹽酸麻黃堿檢測含量較高。同時，其他可能存在的雜質也會使樣品的吸收產生變化，從而影響分光光度法的測定結果。在高效液相色譜法中，因為鹽酸麻黃堿的水溶性稍大于鹽酸偽麻黃堿，故兩者在保留時間上存在差異，可以達到分離檢測的目的和效果。

通過對流動相的優化可以發現，采用甲醇-水或乙腈-水體系時，色譜圖中鹽酸麻黃堿拖尾嚴重，系統適應性較差。在體系中添加酸或磷酸鹽緩沖液后，仍然無法得到令人滿意的色譜峰型，無法進行準確的含量測定。最后通過添加離子對試劑十二烷基磺酸鈉，改變色譜對化合物的分離機制后，可以克服鹽酸麻黃堿色譜峰的拖尾現象，符合系統適應性的要求。

選用甲醇作為流動相體系中的有機相較乙腈更為經濟，可以降低試驗的運行成本。盡管甲醇的末端吸收在210 nm處，但通過在流動相中添加離子對試劑十二烷基磺酸鈉后，可以顯著延長鹽酸麻黃堿的保留時間，避免溶劑峰對含量測定的影響。另外，通過采用流動相提前平衡色譜柱，可以減少基線的波動，保證含量測定的順利進行。

本試驗改進了樣品含量測定的方法，方法簡便，操作性強，能有效提高復方呋喃西林滴鼻液中鹽酸麻黃堿含量測定結果的準確性。

［1］中國人民解放軍總后勤部.中國人民解放軍醫療機構制劑規范［M］.北京:人民軍醫出版社，2002:174-175.