康大力,沈小鐘,張洪利*(.廣東食品藥品職業學院,廣州 5050;.廣東省中藥研究所,廣州 5050)
喜樹(Camptotheca acuminata)為珙桐科喜樹屬植物,為我國南方特有品種。1966年,Wall等[1]首次從喜樹中提取并鑒定出具有抗腫瘤活性的生物堿成分喜樹堿(camptothecin),并于20世紀70年代開始了喜樹堿的臨床研究。迄今為止,喜樹堿類抗癌藥物仍是唯一一類上市的拓撲異構酶Ⅰ阻斷劑。irinotecan和topotecan這2種喜樹堿衍生物已被批準上市用于多種癌癥的治療[2]。目前,喜樹堿衍生物的獲得主要從喜樹原植物中直接分離提取或由喜樹堿進行結構修飾得到。
由于天然材料中化學成分復雜,次生代謝產物的含量較低,因此,必須優選簡便、高收率的提取方法,并建立快速、準確、靈敏的檢測方法,以滿足次生代謝產物研究的需要。近年來,超聲提取逐漸成為新興起的一種提取方法,超聲波具有空化、攪拌、粉碎等作用,可以破壞細胞壁,使溶劑進入到細胞中充分溶解有效成分,與傳統提取方法比,具有時間短、操作簡便、不需要加熱等特點[3]。本文采用響應曲面設計實驗優化喜樹堿的提取方法,通過對響應面的分析優選最佳工藝,利用其直觀、高效、簡便等特點[4-6],考察溫度、時間、料液比等因素對喜樹堿提取率的影響,為喜樹堿及其衍生物生產提供研究基礎。
1.1 儀器 高效液相色譜系統(Waters公司,美國),配備DAD檢測器,色譜柱為C18色譜柱(250mm×4.6mm,5μm,Phenomenex 110A)。
1.2 試藥 藥材采集于廣東省中藥研究所中藥標本園,經成都中醫藥大學峨嵋學院劉曉春副教授鑒定為珙桐科喜樹屬植物喜樹(Camptotheca acuminata Decne.)的果實;……