PCNA對口腔鱗癌細胞凋亡和增殖的影響

趙莉琳，劉陽

口腔癌是臨床常見的惡性腫瘤之一，全球每年新增口腔癌患者約10萬人[1]。絕大多數口腔癌為口腔鱗癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)，惡性程度較高，治療主要以手術、放化療相結合的綜合治療為主，患者的5年生存率僅為50%[2]。近年來，靶向藥物設計從多個信號途徑對腫瘤進行抑制，已成為研究的熱點，因此，對口腔鱗癌進行深入研究，尋找更多的潛在靶點十分必要[3-4]。增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)只存在于正常增殖細胞以及腫瘤細胞內，與細胞DNA合成密切相關，對細胞增殖起重要作用[5-6]，是細胞異常增殖的關鍵蛋白。近年來，PCNA與腫瘤發生發展的關系逐漸成為研究熱點[7]。PCNA基因在很多腫瘤中高表達，包括胃癌、肝癌、結腸癌、乳腺癌、膀胱癌以及肺癌等[8-10]。李向新等[11]對48例口腔鱗癌組織以及正常口腔黏膜中PCNA蛋白的表達水平進行檢測發現，PCNA在48例口腔鱗癌中均有不同程度表達，而在正常口腔黏膜細胞中均為表達陰性，提示PCNA可能在口腔鱗癌的發生發展中起重要作用。阿達萊提等[12]也報道了同樣的發現。本研究通過增強或者抑制PCNA在口腔鱗癌TCA8113細胞中的表達，探討了PCNA基因在TCA8113細胞系凋亡和增殖中的作用。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑 人口腔鱗癌細胞株TCA8113、低表達載體pSilencer、高表達載體pcDNA3.1由本室保存，RPMI 1640，胎牛血清、Trizol、Lipofectamine 2000、反轉錄試劑盒購自美國Invitrogen公司。Myc抗體購自北京全式金生物技術有限公司，兔抗鼠二抗購自北京中杉金橋公司。限制性內切酶、Taq酶等常用試劑購自日本TaKaRa公司或全式金生物技術有限公司。引物合成、測序在上海生工生物工程公司進行。……