李梁,賈德進,閆俊靈,陳沖,丁紅,湯蘇陽
空鼻綜合征(empty nose syndrome,ENS)是一種由鼻-鼻腔手術切除引起的醫源性鼻生理功能慢性衰退性疾病。文獻顯示,下鼻甲切除后約有20%的患者會發展為ENS[1-2]。ENS主觀感覺的嚴重程度與客觀檢查不平行,很容易引發醫患矛盾;令人痛惜的“溫嶺殺醫血案”、“北大襲醫案”都是由此病而引發的。建立ENS的診斷標準,阻斷ENS的發生發展,緩解ENS的臨床癥狀是當前亟須解決的問題。
1.1 臨床資料 選取2013年8月-2014年2月在武警總醫院皮膚再生醫學科、耳鼻喉科就診的ENS患者,經SCL-90自評癥狀量表心理測試(250分以下)、焦慮自評量表測試(中度以下)及抑郁自評量表測試(中度以下),篩選出5例患者,其中男4例,女1例,年齡22~30歲,平均26歲,健康狀況良好,無其他系統性疾病,均為雙側鼻腔手術后繼發ENS。其中3例ENS患者有鼻甲殘留,2例無鼻甲殘留。主觀癥狀:鼻黏膜干燥,通氣過度,吸氣干冷,睡眠質量差。治療前均行鼻內鏡檢查、鼻腔鼻竇結局測試20條(sino-nasal outcome test -20,SNOT-20)問卷調查[1-2]、鼻聲阻力和鼻黏膜纖毛清除功能測定。所有患者均簽訂知情同意書,并經武警總醫院倫理委員會批準。
1.2 方法
1.2.1 自體脂肪干細胞(adipose tissue-derived stromal cells,ASCs)制備 入選患者行血液常規檢查及傳染病抗原抗體檢測(包括各項肝炎、梅毒、艾滋病抗體)。從患者下腹部和大腿通過吸脂手術抽取脂肪15~20ml,經終濃度0.1%Ⅰ型膠原蛋白酶、胰酶消化、離心,去除脂肪及上清液,重懸沉淀,經200目細胞篩過濾,再次離心,經紅細胞裂解液裂解紅細胞、磷酸鹽緩沖液洗滌2次,所得細胞提取物用含15%胎牛血清的高糖DMEM培養液重懸,以適當密度接種于無菌培養瓶中,4~5d后加液,之后每3d換液1次,待原代細胞達85%融合,用0.05%胰蛋白酶消化,按照1:2比例傳代。……