PTEN基因對兔晶狀體上皮細胞增殖抑制作用的實驗研究△

趙寧 張瑞君 劉磊 李佳 劉寧寧

白內障是世界范圍內的主要致盲性眼病。白內障囊外摘出及超聲乳化白內障吸出聯合人工晶狀體植入術是現代治療白內障的常用方法。然而晶狀體后囊膜混濁(posterior capsule opacification，PCO)是白內障術后的常見并發癥，嚴重影響患者術后視力［1］。細胞因子刺激晶狀體上皮細胞(lens epithelial cells，LEC)增殖，占據原先無細胞的后囊膜，是形成PCO的主要原因。細胞因子與細胞膜表面分布的相應受體結合后，通過多種途徑將信號傳遞到胞核內，促進或抑制特定靶基因的表達，調節細胞生長。

在細胞因子受體介導的信號轉導途徑中，磷脂酰肌醇三磷酸激酶(phosphatidylinositol-3 kinase，PI-3k)/蛋白激酶B(protein kinase B，PKB)信號轉導途徑是調控細胞骨架及凋亡的重要途徑［2-3］。PKB是PI-3k/PKB信號轉導系統中重要的下游激酶，PKB磷酸化后才能表現出活性［4-5］。已有研究表明，PI3K信號轉導途徑參與 LEC的遷移、分化［6-7］。而 PTEN是至今為止發現的第一個具有磷酸酶活性的抑癌基因，主要通過其脂質磷酸酶活性阻斷PI-3k信號轉導途徑，從而誘導細胞凋亡、抑制細胞生長、調節細胞遷移與黏附，在腫瘤研究領域得到大量證實［8-10］。本研究旨在為研究白內障術后LEC增殖過程中是否存在PTEN基因對PI-3k/PKB信號轉導途徑的抑制作用，為防治后發性白內障提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物與分組 選用中國醫科大學實驗動物部提供的健康白色家兔42只(84眼)，8～10周齡，雌雄各半，體質量(1.5±0.3)kg，隨機分為實驗組(36只)和對照組(6只)。

1.2 試劑與儀器 PTEN mRNA原位雜交檢測試劑盒、鼠抗兔PCNA單克隆抗體、小鼠IgG鏈酶親合素生物素復合物免疫組織化學試劑盒、二氨基聯苯胺(diaminobenzidin，DAB)顯色試劑盒、焦碳酸二乙酯(diethyl pyrocarbonate，DEPC)均為武漢博士德公司產品。……