室內質控和室間質評在臨床微生物檢驗中的作用探討

徐建玲

室內質控和室間質評對于臨床微生物檢驗的質量控制來說都非常關鍵, 在室內質控的基礎上進行室間質評, 不僅可以看出一個實驗室的標本鑒定能力, 經常進行室間質評還可以提高檢驗人員的工作水平, 進而提高室內質控的水平［1］。本案將本實驗室臨床微生物檢驗的結果, 與本省臨床檢驗中心提供的標本進行室間質評, 以期為其他實驗室提供參考,提高實驗室微生物檢驗的質量。

1 材料與方法

1.1 材料 選取2009～2013年本省臨床檢驗中心的室間質評標本細菌共100株, 全部轉種成功。對這些菌株進行分類,革蘭陽性桿菌43株, 革蘭陰性桿菌48株, 革蘭陰性球菌9株。實驗過程中用到的儀器和試劑有藥敏試紙、成品干粉培養基、微量生化管、API微生物臨定系統、全自動微生物分析儀等。所有的儀器和試劑符合實驗操作的鑒定要求。

1.2 方法 將本省臨床檢驗中心提供的100株細菌進行轉種, 不同的標本區分不同的培養基, 轉種后, 將標本的環境溫度控制在35～37℃之間［2］。24 h以后觀察并記錄菌落的形態, 對于生長不良的細菌可以適當延長培養的時間, 根據細菌的實際生長情況停止培養。細菌的初步鑒定方法是通過革蘭染色后觀察菌落的形態和染色性。全面鑒定細菌時先對細菌進行分純處理, 然后運用全自動微生物分析儀或者是API微生物臨定系統進行鑒定。個別菌株可能會需要進行手工鑒定, 按照《全國臨床檢驗操作規程(第 3 版)》［3］執行。鑒定正確的菌株進行藥敏試驗, 藥敏試驗參照美國臨床和實驗室標準協會(CLSI)標準［4］執行。

2 結果

100株細菌全部轉種成功, 其中鑒定正確94株, 鑒定錯誤6株。錯誤的6株細菌中, 革蘭陽性桿菌與革蘭陰性桿菌各3株。94株細菌的藥敏試驗結果有92例是符合的, 試驗結果不符合的2株細菌的抗菌素都為青霉素。具體鑒定錯誤分析見表1。

表1 菌株鑒定錯誤的原因分析(n=6)

3 討論

由鑒定結果可知, 鑒定錯誤的原因大致有以下三點：首先是實驗室鑒定的手段有限, 如病牛沙門菌和流感嗜血桿菌的誤檢。其次是檢驗人員的認知不足, 如芽孢桿菌屬的誤檢,芽孢桿菌需要培養3 d以上才可見芽孢, 如果檢驗人員不知道這一點, 培養24 h后做鑒定試驗必然會產生錯誤, 再次藥物含量的把握, 如G群鏈球菌的誤診。最后, 室內質控工作沒有做好, 如金黃色葡萄球菌的誤檢。靛基質試驗、氧化酶試驗等在細菌鑒定中使用非常頻繁, 應經常監測, 以防試劑失效。藥敏試驗中抗菌素為青霉素的檢驗有2株細菌結果不符合, 分析原因可能是青霉素本身就不穩定, 加上本實驗室之前的保存方法也存在問題, 沒有在低溫下保存導致。藥物的購買應該注意計劃性, 仔細做好記錄, 根據藥物性質妥善保管。

綜上所述, 臨床微生物室間質量評價對于減少實驗室細菌鑒定失誤很有幫助, 實驗室在進行細菌鑒定和藥敏試驗時,由于工作人員的專業水平、細菌學診斷水平和質量控制水平等因素, 對準確鑒定細菌都會起到一定的影響。臨床進行微生物檢驗應該在嚴格室內質控的基礎上經常進行室間質評。

［1］牛華, 王天朝, 謝穎夫, 等.室內質控實時在線監控方案的設計和實施.臨床檢驗雜志, 2011, 29(7):490-491.

［2］萬臘根, 張世錕, 胡意, 等.兩種方法設置室內質控限值時室內質控的結果分析.國際檢驗醫學雜志, 2011, 32(6):692-693.

［3］中華人民共和國衛生部醫政司.全國臨床檢驗操作規程.南京:東南大學出版社, 2006:30.

［4］Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).Performance goals for the internal quality control of multichannel hematology analyzers; Approved Standard H26-A.2006.