石紹川,劉東,李軍,田耘博,陳鵬(重慶市血液中心 400015)
血型檢測是無償獻(xiàn)血篩檢的重要檢測項目,長期以來,血站的血型檢測主要采用手工操作的紙片法。但隨著檢測技術(shù)的迅猛發(fā)展,紙片法已不能滿足實驗室快速、準(zhǔn)確、標(biāo)準(zhǔn)化、自動化的要求,其檢測的各個環(huán)節(jié)逐步被相應(yīng)的自動化設(shè)備所替代[1-2]。Olympus PK7300全自動血型分析儀集自動加樣、孵育、判讀、數(shù)據(jù)保存及全過程監(jiān)控為一體,近年來我國的一些血液中心和中心血站陸續(xù)引進(jìn)了該設(shè)備。本中心檢驗科自2011年將PK7300血型分析儀用于ABO 和Rh(D)血型的常規(guī)檢測,在使用過程中,作者發(fā)現(xiàn)該儀器除具有全自動、高通量等優(yōu)點外,其在不規(guī)則抗體和亞型篩選、測定ABO 血型抗體效價等方面也體現(xiàn)出較為卓越的性能,但將其用于測定ABO 血型抗體效價的報道較少。為此,本文對應(yīng)用PK7300全自動血型分析儀測定ABO 血型抗體效價進(jìn)行了初步研究。
1.1 標(biāo)本來源選擇本中心檢驗科2013年5~7月無償獻(xiàn)血者的血液檢測標(biāo)本。隨機抽取日常檢測后的標(biāo)本A型、B型、O型各10例,進(jìn)行ABO 血型抗體效價測定,并對檢測出的ABO 血型抗體效價降低的情況進(jìn)行統(tǒng)計分析。
1.2 儀器白洋600A型離心機、eppendorf 100~1000μL可調(diào)移液器、Olympus PK7300全自動血型分析儀。
1.3 試劑抗RhD-IgM(德國Biotest公司),單克隆抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司);反定型用紅細(xì)胞試劑(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司);生理鹽水(四川南格爾生物醫(yī)學(xué)股份有限公司)。以上試劑均鑒定合格,在有效期內(nèi)使用。
1.4 方法
1.4.1 儀器微板法測定抽樣樣本的ABO 血型抗體效價隨機抽取日常檢測后的標(biāo)本A型、B型、O型各10例,分別對每例標(biāo)本的血漿用生理鹽水進(jìn)行1∶5、1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶60、1∶80稀釋;……