血常規室內質控項目平均紅細胞體積的趨勢解析＊

李勝發，白垚（重慶醫科大學附屬第一醫院檢驗科 400016）

血常規檢驗，對人體健康評估、保健預防、疾病診斷治療有其重要的參考依據。血常規檢驗由最初手工分析2～3個項目，發展到血細胞分析儀的自動化檢測，大大提高了血常規檢測效率，同一份標本，也會報告出數十個檢測項目，為報告使用者提供更多、更細致的參考依據。如何監管自動化血細胞分析儀的分析過程和分析質量，室內質控具有非常重要的監控作用。但是，室內質控圖還需要人為判斷儀器運行的穩定性和準確度。如何解讀室內質控圖，就必須了解室內質控構成的要素，包括儀器、試劑、質控品、操作手冊等。目前所用的血常規質控品基本上都是較短有效期的全血標本，廠家生產質控品時，為了保證質控品有足夠的質量穩定時間，就必須對全血標本進行防腐、細胞固定等處理。考慮到血細胞分析儀的檢測原理，血常規質控品的細胞成分只能半固定，所以血常規質控品的細胞成分隨著儲藏時間的延長，細胞成分的質量可能會發生一些變化，表現在室內質控圖上，可能會被誤認為是儀器的準確度發生了趨勢性漂移。本文就對血常規室內質控圖中平均紅細胞體積（MCV）的變化趨勢作一個合理的分析。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 Sysmex XE－5000全自動血細胞分析儀、原裝配套試劑、校準品（SCS－1000）、中低兩水平質控品。

1.2 方法

1.2.1 儀器準備儀器功能驗證由工程師進行，包括光源強度、水路、氣路、電源及機械運動部分的可重復性。

1.2.2 儀器性能驗證完全按照《中華人民共和國衛生行業標準－臨床血液學檢驗常規項目分析質量要求（WS／T 406－2012）》執行。

1.2.3 儀器項目校準按照《血細胞分析的校準指南（WS／T 347－2011）》完成。

1.2.4 正確度保證溯源校準及驗證、參加衛生和計劃省委委員會臨檢中心開展的血細胞分析正確度驗證［1］。

1.2.5 準確度保證室內質控、衛生和計劃省委委員會臨檢中心室間質評、Sysmex公司的在線質控［1］。

1.2.6 確定室內質控圖（L－J）的中心線和標準差本室所用血常規室內質控品由Sysmex提供配套的全血質控品，有效期較短，因此應按照穩定性較短的質控品方法設定中性線（均值）和標準差。根據《全國臨床檢驗操作規程》第3版規定方法創建本室室內質控圖（L－J）的中心線和標準差［1］。

1.2.7 室內質控方法運用質控品監測室內質控的方式屬于分析中質控［2］，每天標本分析前，執行中低兩水平質控品（echeck）監測儀器運行狀態，儀器自動將質控數據傳入實驗室信息系統（LIS）系統的質控通道，只有室內質控在控后方可檢測臨床標本。室內質控時，應盡量與質控品定值時的條件一致，包括開機后儀器預熱程度，監測時間段，質控品混勻方法等。

2 結果

2.1 Sysmex XE－5000全血細胞分析儀2013年3月1日至4月25日中低兩水平質控品監測43d的MCV 室內質控（L－J），見圖1。圖1顯示Sysmex XE－5000全血細胞分析儀的MCV有升高趨勢，儀器性能可能發生漂移。

圖1 Sysmex XE－5000 MCV 室內質控圖（L－J）

2.2 查看Sysmex公司的在線質控系統（SNCS），該分析儀在SNCS系統的精密度指數（SDI）圖中沒有漂移趨勢，說明參加Sysmex公司在線質控系統的約500臺血細胞分析儀的室內質控MCV 項目，隨著質控品有效期臨近，均有升高趨勢。

2.3 該血細胞分析儀2013年4月28日執行衛生和計劃生育委員會臨檢中心全血細胞分析2013年第1次室間質評物檢測，回報結果成績優良，MCV 沒有系統偏倚。

3 討論

正確開展室內質控分析是對每批臨床標本準確度的重要保證［3－5］，失控規則的正確判斷能有效減少假失控率，降低檢測成本。現在市售血常規質控品基本都是較短有效期的全血樣品，它是在全血樣品中加入適量的防腐劑和細胞固定劑。考慮到目前血細胞分析儀的檢測原理，某些項目需要將細胞破壞，檢測其內容物，如血紅蛋白測定，表面活性劑月桂酸鈉破壞紅細胞后，將紅細胞內容物轉化成十六烷基磺酸鈉血紅蛋白，使其與氰化高鐵血紅蛋白相似最大吸收峰的衍生物時，采用比色法測定，這就要求紅細胞不能完全固定，否則，血紅蛋白溶血劑就不能破壞紅細胞。有些項目如白細胞計數和分類，不但需要保持細胞完整，以及細胞體積大小基本不變，而且還要保證白細胞膜具有合適的通透性，使某些化學物質如核酸熒光染料，進入細胞內部，結合于細胞內部結構的細胞核染色質，血細胞分析儀檢測時，高能量激光才能使白細胞核染色質結合的熒光染料變成可以檢測的熒光含量，從而進行白細胞計數和分類。因此，全血質控樣品只能加入適量的固定劑，既要考慮全血樣品的保存周期，又要保證全血樣品中的細胞成分具有合適的活性。因此血常規質控品，只能是半固定全血樣品，所以血細胞質控品的保存時間不長，有效期較短。本文看到的室內質控MCV 項目，隨著質控品有效期臨近，呈現升高趨勢，其原因可能是紅細胞經過細胞固定劑的作用后，固定時間越長（離有效期越近），紅細胞膜越硬，剛性指數增高，不易變形，其體積就有逐漸增大的趨勢［6－7］。

但開瓶后的質控樣品，不斷與空氣接觸，細胞膜呼吸增加，剛性指數下降，細胞柔變性增大，受稀釋液整理能力增強。同時，隨著開瓶次數增多，紅細胞內水分逐漸丟失，其體積就會逐漸變小，因此質控圖上可以看到，MCV 從某一天突然增高，后又逐漸降下來，這就是，一瓶質控品從開瓶第1次使用到該瓶用完最后1次的整個表現過程。根據上述原因，結合有關正確度和準確度評判方法，判定全血細胞分析儀Sysmex XE－5000室內質控項目MCV 出現升高趨勢，并非儀器的正確度發生漂移，而是質控品本身質量的正常漂移所致。

［1］葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程［M］.3版.南京：東南大學出版社，2006.

［2］張莉萍，任國勝.建立醫學實驗室質量管理體系搭建學科建設基礎平臺［J］.重慶醫學，2009，38（19）：2393－2394.

［3］李勝發，徐華建，張莉萍.多個血細胞分析系統準確性和可比性的方法保證分析［J］.重慶醫學，2009，38（19）：2416－2420.

［4］鐘堃，張傳寶，王薇，等.多種統計學方法對實驗室間定量檢測結果的比對研究［J］.臨床檢驗雜志，2012，30（9）：697－699.

［5］呂京.常規臨床檢驗結果不確定度的若干問題［J］.臨床檢驗雜志，2011，29（5）：322－323.

［6］秦琴，汪懷周，胡志德，等.紅細胞體積分布寬度異質性參數預測急性心肌梗死患者近期預后的價值［J］.臨床檢驗雜志，2012，30（7）：515－517.

［7］牛華，王天朝，謝穎夫，等.室內質控實時在線監控方案的設計和實施［J］.臨床檢驗雜志，2011，29（7）：490－491.