小型豬特異性麻醉頡頏劑對小型豬血漿RAAS的影響

宋旭東，姜 勝，侯金龍，牛棟梁，范宏剛，王洪斌

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150030）

腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（R-A-A-S）是由腎素（PRA）、醛固酮（ALD）、血管緊張素（AⅡ）等一系列激素和相應(yīng)的酶所組成，體內(nèi)起著調(diào)節(jié)血壓、水和電解質(zhì)平衡，維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的作用，其作用機(jī)理包括調(diào)節(jié)全身血容量和控制外周阻力。過度激活RAAS，PRA、AⅡ濃度會顯著升高，引起全身小血管強(qiáng)烈收縮，造成組織器官不同程度的缺血，甚至導(dǎo)致水和電解質(zhì)紊亂[1]，從而導(dǎo)致各重要臟器處于應(yīng)激狀態(tài)[2]。

心鈉素（ANP）是心肌細(xì)胞分泌的一種循環(huán)激素，不僅具有強(qiáng)烈的擴(kuò)張血管作用[3]，還有頡頡應(yīng)激反應(yīng)和穩(wěn)定循環(huán)的作用[4]，從而有助于緩解機(jī)體對傷害性刺激的反應(yīng)。雖然小型豬特異性麻醉頡頏劑對小型豬肝腎功能、氧化損傷的研究已經(jīng)完成[5-6]，但是目前尚無對該復(fù)合制劑催醒小型豬過程中血流動力學(xué)變化及此變化與RAAS關(guān)系的研究報(bào)道。本研究旨在觀察小型豬應(yīng)用XFM麻醉劑后，采用小型豬特異性麻醉頡頏劑催醒過程中血漿RAAS和ANP的動態(tài)變化，通過分析ANP和RAAS的變化，探討小型豬特異性麻醉頡頏劑對小型豬血流動力學(xué)的影響的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 中國實(shí)驗(yàn)用小型豬14頭，16～18月齡，體重49.8±5.2 kg，購自中國農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)用小型豬繁育基地，臨床檢查健康，營養(yǎng)狀況良好。

1.2 試驗(yàn)材料 XFM（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)外科教研室，批號：20110821）；小型豬特異性麻醉頡頏劑（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)外科教研室，批號：20110824）。PRA ELISA測定試劑盒、AⅡELISA測定試劑盒、ALD ELISA測定試劑盒及ANPELISA測定試劑盒；Sig?ma公司3-30K高速冷凍離心機(jī)（德國Sigma公司）；Epoch酶標(biāo)儀（美國BioTek公司）；Elx50洗板機(jī)（美國BioTek公司）等。

1.3 試驗(yàn)方法 14頭小型豬禁食12 h，不禁水，隨機(jī)分為單純麻醉組和麻醉-催醒組，每組7頭。兩組動物麻醉之前，此時間點(diǎn)記為0min。保定記錄小型豬的SBP、MAP、DBP、HR、SPO2、T和RR值，并采前腔靜脈空白血2mL，適量肝素抗凝，采血完成后立即注射XFM并計(jì)時。記錄麻醉后5、10、20、30 min各項(xiàng)生理指標(biāo)，并采前腔靜脈血2mL。麻醉后30min即刻，麻醉-催醒組立即注射小型豬特異性麻醉頡頏劑，單純麻醉組則立即注射等量生理鹽水，隨后記錄麻醉后32、35、40、60、90min、120min小型豬的SBP、MAP、DBP、HR，SPO2、RR、T值并于各時間點(diǎn)采集前腔靜脈血2mL，采集的血樣，加入肝素抗凝，室溫靜置1 h，3 000 r/min離心分離血漿，置于-80℃冰箱內(nèi)冷凍保存，待檢。此后記錄蘇醒及行走時間。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)使用±SD表示，用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0進(jìn)行一維方差分析，P＜0.05為差異顯著。P＜0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 小型豬一般臨床體征的變化 麻醉-催醒組小型豬肌肉注射小型豬特異性麻醉頡頏劑后，表現(xiàn)為鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜逐漸恢復(fù)，肌肉張力開始增加，隨后出現(xiàn)掙扎，最后站立，直到行走。小型豬麻醉催醒期和蘇醒期分別為 9.7±2.2 min、18.4±7.8 min。催醒過程均迅速且平穩(wěn)，無興奮及復(fù)睡現(xiàn)象。小型豬催醒期間SPO2、RR和T分別維持在91.8%±3.3%～98.6%±1.1%、47±19次/min～83±15次/min和37.0±0.3℃～39.1±0.3℃之間，且呼吸、心律平穩(wěn)，可視黏膜等其他基本生命體征正常。

2.2 小型豬血流動力學(xué)的變化 XFM麻醉30min的小型豬肌肉注射頡頏劑后，表現(xiàn)出明顯的血流動力學(xué)變化。SBP、DBP、MAP及HR均不同程度地增加，于40 min時升至監(jiān)測過程的最高值，與0 min比較分別增加19.68%（P＜0.01）、27.03%（P＜0.01）、22.83%（P＜0.01）和 40.87%（P＜0.01），與30min（注射小型豬特異性麻醉頡頏劑時）比較，分別增加34.51%（P＜0.01）、28.77%（P＜0.01）、29.88%（P＜0.01）和47.27%（P＜0.01）。隨后各項(xiàng)監(jiān)測指標(biāo)逐漸下降，90min時已基本恢復(fù)至麻醉前水平，與0 min比較P＞0.05，差異不顯著。麻醉-催醒組SBP在32min、90min時與單純麻醉組比較差異顯著（P＜0.05），麻醉后35 min、40min、60min時麻醉-催醒組與單純麻醉組比較差異極顯著（P＜0.01）；麻醉-催醒組DBP及MAP在麻醉后35min、60min時與單純麻醉組比較差異顯著（P＜0.05），麻醉后40min時麻醉-催醒組與單純麻醉組比較差異極顯著（P＜0.01）；麻醉-催醒組HR在麻醉后32min、35 min、40min、60min及90 min時與單純麻醉組比較差異極顯著（P＜0.01）。結(jié)果見表1。

2.3 小型豬血漿R-A-A-S和ANP的變化 試驗(yàn)結(jié)果顯示，XFM麻醉的小型豬在肌肉注射小型豬特異性麻醉頡頏劑后，其血漿PRA、AⅡ及ALD的濃度在注射頡頏劑后的10min下降至最低點(diǎn)，分別較 0 min下降 25.00%（P＞0.05）、25.85%（P＞0.05）、27.77%（P＜0.05），分別較30min（注射小型豬特異性麻醉頡頏劑時）下降40.00%（P＜0.05）、38.90%（P＜0.05）、23.59%（P＞0.05），之后血漿PRA、AⅡ及ALD的濃度開始上升，到90min時已經(jīng)基本恢復(fù)正常（P＞0.05）。麻醉-催醒組血漿PRA、ALD的濃度在監(jiān)測各時間點(diǎn)分別與相應(yīng)單純麻醉組比較均無明顯差異（P＞0.05）；麻醉-催醒組血漿AⅡ的濃度在監(jiān)測40min時與單純麻醉組比較差異顯著（P＜0.05）。血漿ANP的濃度在注射小型豬特異性麻醉頡頏劑后的10min上升至最高點(diǎn)，分別較0min上升31.34%（P＜0.05），分別較30 min（注射小型豬特異性麻醉頡頏劑時）上升47.97%（P＜0.01），之后血漿ANP的濃度開始下降，到90min時已經(jīng)基本恢復(fù)正常（P＞0.05）。與X/S組：X/W組血漿ANP的濃度在麻醉監(jiān)測40min時與對照組比較差異顯著（P＜0.05）。體結(jié)果見表2。

表1 小型豬特異性麻醉頡頏劑對小型豬血流動力學(xué)的影響 （n＝7，±SD）

表1 小型豬特異性麻醉頡頏劑對小型豬血流動力學(xué)的影響 （n＝7，±SD）

注：（1）A組代表麻醉催醒組；B組代表單純麻醉組；（2）組內(nèi)數(shù)據(jù)比較：**代表與0min比較P＜0.01，差異極顯著，*代表與0min比較P＜0.05，差異顯著；##代表與30min比較P＜0.01，差異極顯著，#代表與30 min比較P＜0.05，差異顯著；（3）同一時間點(diǎn)兩組間數(shù)據(jù)比較：肩標(biāo)小寫字母不同表示差異極顯著（P＜0.01）；大寫字母不同表示差異顯著（P＜0.05）；字母相同且大小寫也相同表示差異不顯著（P＞0.05），表2同

時相 組別 SBP DBP MAP HR（min） （mmHg） （mmHg） （mmHg） （次/min）A組 127±8Aa 74±7Aa 92±5Aa 115±18Aa 0 B組 128±9Aa 75±8Aa 91±5Aa 116±17Aa A組 132±10Aa 79±9Aa 97±4Aa 140±19**Aa 5 B組 134±9Aa 79±8Aa 96±7Aa 141±19Aa A組 143±8*Aa 85±6*Aa 105±7*Aa 130±17*Aa 10 B組 143±7Aa 86±7Aa 104±6Aa 131±18Aa A組 125±8Aa 79±8Aa 95±6Aa 119±17Aa 20 B組 127±8Aa 78±9Aa 95±8Aa 118±16Aa A組 113±8*Aa 73±6Aa 87±5Aa 110±14Aa 30 B組 115±9Aa 75±9Aa 88±9Aa 110±15Aa A組 130±8#Aa 81±8Aa 97±6Aa 131±16*##Aa 32 B組 114±7Ba 75±7Aa 88±5Aa 109±17Ab A組 145±6*##Aa 88±6*#Aa 107±7*#Aa 145±16**##Aa 35 B組 113±8Ab 74±8Ba 87±8Ba 108±17Ab A組 152±9**##Aa 94±5**###Aa 113±8**##Aa 162±15**##Aa 40 B組 115±9Ab 73±9Ab 86±9Ab 107±16Ab A組 141±7*##Aa 87±7*#Aa 105±6*#Aa 157±14**##Aa 60 B組 110±8Ab 72±7Ba 82±9Ba 101±15Ab A組 132±6##Aa 79±7Aa 97±9Aa 122±19#Aa 90 B組 115±7Ba 71±8Aa 85±8Aa 84±18Ab A組 124±5Aa 73±7Aa 90±5Aa 114±15Aa 120 B組 126±7Aa 75±8Aa 93±4Aa 115±19Aa

2.4 小型豬血漿內(nèi)R-A-A-S、ANP與血流動力學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)：XFM麻醉30min的小型豬肌肉注射小型豬特異性麻醉頡頏劑后，麻醉催醒組小型豬血漿PRA、ALD濃度與血壓和心率變化均沒有相關(guān)性（P＞0.05）；小型豬血漿AⅡ的濃度與其相應(yīng)對照組比較差異顯著（P＜0.05），且與HR呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），與相應(yīng)血壓無相關(guān)性（P＞0.05），結(jié)果見表3。

表3 小型豬血管活性物質(zhì)與血流動力學(xué)指標(biāo)相關(guān)性分析

3 討論

3.1 小型豬特異性麻醉頡頏劑對小型豬R-A-AS的影響與血流動力學(xué)變化 R-A-A-S具有調(diào)節(jié)機(jī)體血壓、水和電解質(zhì)平衡的作用，其作用機(jī)理包括調(diào)節(jié)全身血容量和控制外周阻力。本試驗(yàn)中，XFM麻醉的小型豬肌肉注射頡頏劑后，血漿PRA、AⅡ及ALD的濃度均呈現(xiàn)出先降低后升高的變化趨勢，可見小型豬特異性麻醉頡頏劑對小型豬的R-A-A-S造成了一定程度的影響。但僅見麻醉-催醒組小型豬血漿AⅡ的濃度與單純麻醉組比較差異顯著（P＜0.05），且與HR呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），與相應(yīng)血壓無相關(guān)性（P＞0.05）；推斷XFM麻醉30min的小型豬肌肉注射頡頏劑后，AⅡ參與了小型豬血流動力學(xué)變化的調(diào)節(jié)，是引起血壓發(fā)生變化的主要因素之一。

臨床研究揭示，腎臟分泌的PRA首先作用于肝臟合成的血管緊張素原，使血管緊張素原轉(zhuǎn)變成為沒有活性的AⅠ，它再由肺臟分泌的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE）的作用下，轉(zhuǎn)化為具有極強(qiáng)生理活性的AⅡ和AⅢ，刺激腎上腺皮質(zhì)分泌ALD。上述激素組成一個微系統(tǒng)（R-A-A-S），協(xié)調(diào)作用于心血管系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)等，在維持機(jī)體血壓和血容量平衡中起著非常重要的生理作用。生理狀態(tài)下，血管緊張素對血容量和血壓的調(diào)節(jié)幾乎不起作用，只有在血容量和血壓發(fā)生改變后（如失血、失液、休克等）才發(fā)生效應(yīng)。目前尚未見復(fù)合麻醉頡頏劑對R-A-A-S影響的報(bào)道，推斷可能是實(shí)驗(yàn)中小型豬注射小型豬特異性麻醉頡頏劑后血壓迅速升高，血漿擴(kuò)血管物質(zhì)增加，從而對R-A-A-S造成了一定程度的影響。

3.2 小型豬特異性麻醉頡頏劑對小型豬血漿ANP的影響與血流動力學(xué)變化 本試驗(yàn)中，麻醉-催醒組小型豬肌肉注射頡頏劑后，血漿ANP的濃度呈現(xiàn)出先升高后降低的變化趨勢，在麻醉后40min時與單純麻醉組比較差異顯著（P＜0.05）。通過相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)：麻醉-催醒組小型豬注射頡頏劑后，小型豬血漿ANP的濃度與HR有極顯著相關(guān)性（P＜0.01），與SBP及DBP呈顯著相關(guān)（P＜0.05），與MAP沒有相關(guān)性（P＞0.05）。推斷XFM麻醉后30分鐘小型豬肌肉注射頡頏劑后，血漿中ANP濃度的變化參與了小型豬血流動力學(xué)變化的調(diào)節(jié)，是引起血壓發(fā)生變化的主要因素之一。

在鈉水負(fù)荷增加、血容量擴(kuò)張、交感神經(jīng)興奮、心肌缺血缺氧、心肌作功增加等因素導(dǎo)致的心肌擴(kuò)張、牽拉變形時可引起ANP分泌增加，有人稱之為應(yīng)激激素[7]。此外，HR增加，盡管心房牽張力無變化，也能引起ANP分泌，急性細(xì)胞外液容量擴(kuò)張（攝入鈉鹽）也可以刺激ANP的分泌，在體液方面，血管緊張素、抗利尿素、腎上腺皮質(zhì)激素、降鈣素基因相關(guān)肽等均能促進(jìn)ANP的釋放[8-9]。ANP可能是一種保護(hù)心血管系統(tǒng)防止突然刺激激活腎上腺系統(tǒng)或R-A-AS引起血壓波動的緩沖劑[8]。心鈉素還能直接松弛血管平滑肌，降低血壓并可對抗NE和AⅡ所致的縮血管效應(yīng)[10]。本試驗(yàn)中小型豬特異性麻醉頡頏劑中的阿替美唑可使交感神經(jīng)興奮，NE釋放增加，從而引起血壓、HR迅速升高[11-12]，推斷小型豬特異性麻醉頡頏劑可能通過以上途徑引起血漿ANP濃度的迅速升高，然后伴隨血壓的下降，血漿ANP的濃度也呈降低趨勢。

表2 小型豬特異性麻醉頡頏劑對小型豬血漿R-A-A-S和ANP的影響 （n＝7,±SD）

時相 組別 PRA AⅡ ALD ANP（min） （ng/mL·h） （pg/mL） （ng/mL） （ng/mL）A組0 B組A組5 B組A組10 B組A組20 B組A組30 B組A組32 B組A組35 B組A組40 B組0.92±0.22Aa 0.93±0.23Aa 1.36±0.34Aa 1.35±0.29Aa 1.90±0.33**Aa 1.91±0.30Aa 1.54±0.16*Aa 1.55±0.19Aa 1.15±0.31Aa 1.16±0.33Aa 0.93±0.26Aa 1.14±0.24Aa 0.81±0.23Aa 0.99±0.21Aa 0.69±0.19#Aa 0.93±0.20Aa 96.78±22.46Aa 97.13±19.67Aa 116.41±30.82Aa 117.38±26.73Aa 142.32±33.28*Aa 141.79±32.42Aa 134.49±22.13*Aa 136.27±26.61Aa 117.44±22.75Aa 119.57±25.77Aa 101.26±23.48Aa 116.38±22.46Aa 84.46±19.93Aa 110.32±18.98Aa 71.76±20.75#Aa 118.46±23.41Ba 205.41±37.42Aa 204.69±35.64Aa 268.43±50.16*Aa 267.45±48.51Aa 283.76±42.64*Aa 283.56±39.51Aa 226.49±31.79Aa 225.52±37.85Aa 194.16±37.67Aa 195.34±35.84Aa 179.39±23.25Aa 193.21±29.86Aa 166.61±35.46Aa 189.35±40.36Aa 148.36±29.16*Aa 195.32±32.15Aa 231.43±35.67Aa 232.54±36.57Aa 222.30±32.59Aa 223.69±37.52Aa 168.42±40.27*Aa 169.23±32.67Aa 183.76±39.64Aa 184.27±31.59Aa 205.41±42.37Aa 204.94±39.25Aa 234.37±43.54Aa 206.82±41.37Aa 268.79±37.21#Aa 212.62±38.92Aa 303.95±33.36*##Aa 221.49±34.29Ba A組60 B組A組90 B組A組120 B組0.81±0.16Aa 0.87±0.24Aa 0.93±0.12Aa 0.96±0.19Aa 1.01±0.24Aa 1.42±0.29Aa 84.42±21.42Aa 94.25±24.32Aa 94.42±29.46Aa 97.18±27.51Aa 105.24±23.16Aa 120.37±21.96Aa 161.49±27.53Aa 183.74±43.79Aa 199.42±24.73Aa 193.65±29.35Aa 213.48±39.92Aa 188.24±34.76Aa 272.43±43.75#Aa 241.85±44.72Aa 235.68±37.61Aa 263.46±35.29Aa 240.66±44.69Aa 248.62±37.37Aa

4 結(jié)論

研究麻醉藥對血流動力學(xué)的作用機(jī)制是一個非常復(fù)雜的過程，麻醉下血流動力學(xué)變化是眾多因素共同作用的結(jié)果，涉及內(nèi)皮源性血管活性因子，腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)及相關(guān)神經(jīng)肽類等。因此通過研究R-A-A-S、ANP與血流動力學(xué)的相關(guān)性，進(jìn)而從某一角度揭示XFM對小型豬血流動力學(xué)作用機(jī)制的影響。

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