兩種進口金標結核抗體的效果評價＊

于 濱，任彥薇，王 杰，李英煜（遼寧省大連市結核病醫院：.檢驗科 6037；.二病房 6037）

自20世紀70年代，Engrall等報道酶聯免疫吸附試驗（ELISA）以來，結核病的血清學診斷技術就已成為了結核病研究的一項重要課題［1］；而用血清檢測結核抗體輔助診斷活動性結核也已得到了較為廣泛的應用［2-4］。本文重在探討以膠體金免疫層析法（GICA）為原理的兩種進口結核抗體試劑盒：法國TB-CHECK-1和韓國SD Rapid TB，同時對200例結核患者、72例非結核患者和56例健康成年人的不同樣本進行檢測，現將對比觀察結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象隨機選取本院2012年6～8月的門診、住院患者以及健康體檢人員若干名。

1.2 實驗分組

1.2.1 按患病類別分為結核組（以下簡稱TB組），非結核組（以下簡稱NTB組）和健康組。（1）TB組：隨機選取本院2012年6～8月的住院患者200例，其中男118例，女82例，年齡16～82歲，平均40歲。所有患者均經臨床表現、實驗室檢查、X線或CT影像等手段，或經臨床治療轉歸證實而確診。（2）NTB組：同期門診鑒別診斷否定結核病患者72例，其中男47例，女25例，年齡24～79歲，平均43歲。原發性肺癌和肺轉移癌26例、各種肺炎36例、慢性支氣管肺炎6例、肺氣腫伴肺心病4例。（3）健康組：同期健康體檢人員56例，其中男39例，女17例，年齡18～55歲，平均39歲，均系健康體檢者。

1.2.2 按標本類型分為血清、腦脊液（CSF）、胸腹腔積液，每例采樣者僅選取一種樣本進行分析比較。（1）血清：共269例，其中包括TB組、NTB組和健康組。（2）CSF：共14例，其中13例為已確診的結核性腦膜炎患者，另外1例為病毒性腦膜炎患者。（3）胸腹腔積液：共45例，其中42例為已確診的結核性胸（腹）膜炎患者，1例肝癌患者，1例肺栓塞患者，1例胸膜間皮瘤患者。

1.2.3 按排菌與否分為菌陽組、菌陰組、對照組。（1）菌陽組：TB組中涂片（抗酸染色）或培養（羅氏、快培）陽性的患者77例。（2）菌陰組：TB組中涂片（抗酸染色）和培養（羅氏、快培）均為陰性的患者123例。（3）對照組：NTB組與健康組作為對照組。

1.3 研究方法

1.3.1 樣本采集 所有標本均按《全國臨床檢驗操作規程》采集新鮮樣本［5］。

1.3.2 實驗試劑 法國VEDA.LAB出品的TB-CHECK-1和韓國SD Rapid TB檢測試劑。

1.3.3 實驗方法 嚴格按兩種試劑說明書進行操作，所有結果均由兩位中級以上檢驗師進行判定。

1.4 統計學處理 數據由EXCEL記錄，用流行病學法分別計算兩種試劑盒對結核病診斷的靈敏度、特異度、正確指數、似然比、預測值以及符合率，計數資料經SPSS13.0軟件分析整理，采用chi-square（χ2）檢驗確定組間差異，水平定為0.05。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩種試劑盒按患病類別的檢測結果（表1）。TBCHECK-1、SD Rapid TB對診斷結核病的評價指標如下：靈敏度60.5%、64.5%；特異度97.7%、99.2%；正確指數58.2%、63.7%；陽性似然比26.3、80.6；陰性似然比0.404、0.358；陽性預測值98.4%、99.2%；陰性預測值61.5%、64.1%；符合率75.0%、78.0%。韓國SD Rapid TB在評測指標上略優于法國TB-CHECK-1，但兩者差異無統計學意義（P＞0.05）。

表1 兩種試劑盒按患病類別的檢測結果（n）

2.2 兩種試劑盒按標本類型的檢測結果（表2）。TBCHECK-1、SD Rapid TB對于不同標本檢測結果的靈敏度分別為血清60.0%、63.4%，CSF 100.0%、100.0%，胸腹腔積液57.1%、61.9%，特異度分別為血清97.6%、99.2%，CSF 100.0%、100.0%，胸腹腔積液100.0%、100.0%。兩種試劑盒對于不同樣本的檢測結果差異無統計學意義（P＞0.05），但兩者檢測CSF對于診斷結核性腦膜炎差異有統計學意義（P＜0.05）。

2.3 兩種試劑盒按排菌與否的檢測結果（表3）。TBCHECK-1、SD Rapid TB對于菌陽性患者的陽性檢出率分別為94.8%、98.7%；對于菌陰性患者的陽性檢出率分別為39.0%、43.1%。兩者對于菌陽性及陰性患者差異無統計學意義（P＞0.05）；但相對于菌陰性患者，兩者對于菌陽性患者的診斷價值更高，差異具有統計學意義（P＜0.05）。

表2 兩種試劑盒按標本類型的檢測結果（n）

表3 兩種試劑盒按排菌與否的檢測結果（n）

3 討 論

結核在全球范圍內仍然是一個重要的社會、經濟和醫療問題［6］。近年來，結核的發病率呈上升趨勢。人對結核菌的感染率很高，但發病率卻較低，這表明人體感染結核菌可獲得一定的抗結核免疫力。該免疫以細胞免疫為主導，體液免疫無重要影響，但可作為臨床診斷的一項參考指標。新近發展的用特異性抗原的血清學檢驗方法對活動性結核具有較高的診斷價值，特別是對于菌陰結核病的診斷更顯得尤為重要。

結核抗體測定技術在臨床上已廣泛開展應用。眾多的測定結果表明，結核抗體測定對結核病的診斷與鑒別具有重要價值，尤其對菌陰肺結核、兒童結核、無痰患者、肺外結核及結核性腦膜炎的診斷及鑒別診斷具有重要意義。此外，結核抗體測定作為器官移植術并發結核感染的監測指標也具有一定參考價值。隨著結核抗體測定方法的改進，人們還對測定標本的種類進行探索，建立了微量耳垂血、指血、全血、血漿等標本的測定方法，尤其是測定痰液中的結核抗體，取材更為容易，有推廣價值。

臨床診斷結核病對實驗室檢查技術的要求是快速、敏感、特異、價廉和簡便的早期診斷，血清抗結核抗體檢查作為一種免疫學檢測方法，兼具上述優點，但由于免疫的復雜性和個體差異性，使檢測結果具有一定的差異。自1990年Oskiowicz等應用硒作為標記物建立了免疫層析試驗以來，GICA技術得到了廣泛的應用。本文選用的兩種進口金標結核抗體試劑盒是一種快速、定性的過篩法試驗，以GICA技術為原理，特異性地檢測出活動性結核患者血清、血漿、全血以及其他體液中的抗結核桿菌抗體。主要是檢測IgG和IgA，高濃度的IgM亦可被檢出，且對接種過卡介苗者試驗不起反應。

兩種試劑盒對于不同組別、不同樣本的診斷價值基本相同，二者的靈敏度介于60.0%～64.1%，特異度介于97.6%～100%；本實驗的靈敏度低于試劑說明書提供的參考指標，但特異度與之相似（法國TB-CHECK-1說明書提供的靈敏度為86.0%，特異度為92.8%；韓國SD Rapid TB的靈敏度為98.2%，特異度為99.7%）；本次試驗結果也與國內文獻［4，7］報道相近。

本研究結果表明，兩種進口結核抗體對于非結核患者有良好的判定效果，即在排除結核病的鑒別診斷中，該項檢測結果具有很高的參考價值。影響結核性腦膜炎預后的關鍵在于早期診斷和及時治療，所以臨床迫切需要一個良好的檢驗技術，指導結核性腦膜炎的診斷［8］；但本次試驗由于入選的病例有限，其臨床診斷效果還有待進一步的觀察。TB-CHECK-1、SD Rapid TB對于菌陽患者的陽性檢出率雖然很高，但菌陽患者已由病原學診斷的金標準確診，因此，其診斷意義低于菌陰結核。

抗結核抗體是由體液免疫介導產生的，而結核菌素（PPD）則是由細胞免疫介導產生的，兩者通常作為結核病的輔助診斷；但由于我國是結核病高發病率國家，人群普遍接種卡介苗，因此PPD試驗陽性的結果對臨床診斷意義不大。金標法結核抗體利用全免疫層析法（GICA），能特異性地檢測出活動性結核患者血清中的抗結核桿菌抗體（包括IgG、IgA和IgM），主要為IgG，其反應顏色的強度直接與樣品中存在的IgG的量呈正比，故其亦可作為一種作為半定量試驗。因此，該項試驗可將常規的二級報告（陰性、陽性）方法改為四分級報告法，即陰性（-）、弱陽性（±）、陽性（+）、強陽性（++）。金標法結核抗體由一個簡單的定性試驗，通過半定量的量化方式，使其對結核病的診療賦予了新的臨床意義及價值。這種半定量的報告法提供了一個新的思路，有待通過一定的臨床資料加以分析整理，這對于動態監測和診斷結核病將產生重要意義。

［1］閆世明，楊家道，于關成，等.三種結核抗體快速診斷試劑盒對三種常見結核病的診斷價值［J］.中國防癆雜志，2001，23（3）：174-177.

［2］張明科，關芬嬌，梁朝霞，等.結核抗體與痰檢結果的比較分析［J］.臨床肺科雜志，2007，12（5）：436-437.

［3］曹洋，王名燕.ADA、TB-Ab聯合檢測對結核性腦膜炎鑒別診斷的意義［J］.檢驗醫學與臨床，2006，3（7）：333-334.

［4］丁華，劉和錄，陳偉光，等.兩種檢測方法在結核病診斷中的臨床評價［J］.中國實驗診斷學，2008，12（1）：99-100.

［5］葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程［M］.3版.南京：東南大學出版社，2006：232-235.

［6］俞錫燦，張筱蓉，孫愛莉.免疫層析法檢測結核抗體對肺結核病診斷的臨床價值［J］.檢驗醫學，2008，23（3）：319.

［7］張青，肖和平.血結核抗體和PPD試驗對肺結核的臨床診斷價值［J］.臨床肺科雜志，2001，6（2）：4-5.

［8］張浩，柳迎春，馬金花.結核性腦膜炎診斷的新進展［J］.華北煤炭醫學院學報，2008（4）：466-468.