酶聯(lián)免疫法和膠體金法對(duì)比檢測(cè)病毒性丙型肝炎

麻安喆（廣西壯族自治區(qū)桂林市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科 541002）

丙型肝炎屬于急性肝臟炎癥的一種，血液傳播為丙型肝炎患病的主要途徑之一，與丙型肝炎患者進(jìn)行親密接觸后，也有可能受到感染［1］。丙型肝炎與乙型肝炎在臨床方面相似處較多，可以使用抗病毒藥物進(jìn)行治療，但大多數(shù)患者在停藥后有復(fù)發(fā)的情況發(fā)生［2］。本次研究選取344例進(jìn)行丙型肝炎病毒陽性率檢測(cè)的患者，通過兩種方法進(jìn)行臨床免疫檢驗(yàn)分析，旨在尋找高效的臨床免疫檢驗(yàn)方法，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取344例進(jìn)行丙型肝炎病毒陽性率檢測(cè)的患者作為研究對(duì)象，其中男178例，女166例，年齡18～65歲，平均（43.5±5.5）歲。

1.2 方法

1.2.1 準(zhǔn)備工作 常規(guī)抽取方法采集靜脈血清標(biāo)本，對(duì)血清標(biāo)本離心后制備成血清待用。在進(jìn)行檢驗(yàn)前，確保操作人員、實(shí)驗(yàn)室以及試劑批號(hào)相同，確保檢驗(yàn)結(jié)果具有可比性。

1.2.2 檢測(cè)方法 將ProteinA病毒抗原及抗體在試劑條上固定，位置分別選擇為測(cè)試區(qū)與控制區(qū)，隨后將試劑條標(biāo)記線以下的部分放入血清當(dāng)中，持續(xù)15s以上，使膠體金顆粒與標(biāo)本結(jié)合的ProteinA發(fā)生充分反應(yīng)［3］。若測(cè)試區(qū)當(dāng)中呈明顯紫紅色條帶，則結(jié)果為陽性；若測(cè)試區(qū)無明顯條帶，則結(jié)果為陰性。控制區(qū)當(dāng)中無論檢測(cè)結(jié)果是陰性或陽性，均會(huì)呈現(xiàn)紫紅色明顯條帶，在對(duì)結(jié)果進(jìn)行判定時(shí)要注意區(qū)分控制區(qū)與測(cè)試區(qū)，避免對(duì)結(jié)果判定產(chǎn)生影響。酶聯(lián)免疫法的結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)為：Cut-off大于標(biāo)本A值時(shí)，結(jié)果為陽性；Cut-off小于或等于標(biāo)本A值時(shí)，結(jié)果為陰性［4］。

1.2.3 確證方法 本次研究當(dāng)中采用的確證方法為化學(xué)發(fā)光法，出現(xiàn)兩條或兩條以上的顯色條帶時(shí)顯示該標(biāo)本為陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)量資料采用百分率表示，用χ2檢驗(yàn)，以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 檢測(cè)結(jié)果共對(duì)344例血清標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，所有陽性與可疑標(biāo)本均通過復(fù)查且結(jié)果一致；陽性與可疑標(biāo)本的結(jié)果共48例，兩種方法測(cè)定均為陽性的有43例，見表1、2。

2.2 比較分析膠體金法的敏感性為100.00%，特異性為71.43%；酶聯(lián)免疫法的敏感性為97.72%，特異性為55.56%；兩種方法的診斷效率分別為98.87%、97.63%，兩種方法陽性率之間的符合率為97.72%，結(jié)果膠體金法在敏感性與特異性方面均高于酶聯(lián)免疫法，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 化學(xué)發(fā)光法確證膠體金法結(jié)果（n）

表2 化學(xué)發(fā)光體確證酶聯(lián)免疫法結(jié)果（n）

3 討 論

目前，丙型肝炎已經(jīng)成為全球性的流行性疾病，全球范圍內(nèi)，丙型肝炎病毒物攜帶者占3%，約有1.7億人，同時(shí)以每年4萬的速度逐漸增加，引起醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注［5］。丙型肝炎的感染性極強(qiáng)，且治愈率與其他病毒性感染疾病相比較低，臨床癥狀方面極易引起肝臟病變，導(dǎo)致肝硬化或慢性肝炎的發(fā)生，嚴(yán)重者會(huì)引發(fā)肝癌或?qū)е滤劳觯瑖?yán)重威脅患者的健康與生命。在我國的健康人群中，丙型肝炎病毒抗體的陽性率高達(dá)0.7%～3.1%，因此，對(duì)于丙型肝炎的檢測(cè)工作需要進(jìn)一步的加強(qiáng)與完善，以求提高患者的臨床治愈率［6］。

丙型肝炎病毒的傳播途徑主要為血液擴(kuò)散，在病毒性肝炎中屬于常見疾病。通常情況下，丙型肝炎病毒的攜帶者與慢性、急性丙型肝炎對(duì)照比較，危險(xiǎn)性更大、傳播速度更快、病死率更高。在丙型肝炎病毒通過血液傳播的過程中，傳染方式包括：血液透析、美容、內(nèi)鏡檢查、牙科治療、外科手術(shù)、輸血或血制品（例如血漿、球蛋白、凝血因子等）、哺乳、性行為、公共物品的使用、非一次性注射器或醫(yī)療用具所造成的意外刺傷或劃傷、由丙型肝炎感染者為供體的器官移植等［7］。在患者被丙型肝炎病毒感染的初期，臨床往往表現(xiàn)為亞臨床感染，其臨床特征通常為非典型性，在診斷方面極易造成誤診或漏診［8］。另外，丙型肝炎患者在臨床治療中，由陽性轉(zhuǎn)為陰性的可能性較低，病程長(zhǎng)，具有一定程度的危險(xiǎn)性。

本次研究中采用兩種免疫檢驗(yàn)方法對(duì)344例患者進(jìn)行丙型肝炎病毒陽性率臨床免疫檢驗(yàn)，結(jié)果表明膠體金法在丙型肝炎臨床檢測(cè)陽性率方面更具優(yōu)勢(shì)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。用酶聯(lián)免疫法對(duì)血清中丙型肝炎病毒抗體進(jìn)行檢測(cè)的過程中，影響檢測(cè)結(jié)果的因素較多，極易出現(xiàn)假陽性。另外，由于敏感度不足，還有可能出現(xiàn)假陰性。其中采用酶聯(lián)免疫法進(jìn)行檢測(cè)后，陽性患者與膠體金法相比多1例患者，可能是由于患者處于病毒感染的“窗口期”［9］；還有可能是因?yàn)楸透窝撞《咎幱谄渌碾A段，S／CO值較低，在這種情況下，采用化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行確證后，推測(cè)為自身免疫性疾病干擾［10］。因此，建議無論采用哪種檢測(cè)方法，對(duì)于S／CO值較低的樣本進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎，必要時(shí)可采用化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行確證，避免假陽性的情況發(fā)生。

［1］金一鳴，方志紅，曹誼.血液篩查中丙型肝炎病毒檢測(cè)方法的應(yīng)用評(píng) 價(jià)［J］.檢 驗(yàn) 醫(yī) 學(xué) 與 臨 床，2013，10（5）：552-553.

［2］陳利明，陳冬梅.丙型肝炎病毒核心抗原檢測(cè)試劑盒的臨床應(yīng)用 評(píng) 價(jià)［J］.檢 驗(yàn) 醫(yī) 學(xué) 與 臨 床，2012，9（22）：2802-2803.

［3］王紅.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)丙型肝炎病毒抗體在酶標(biāo)儀應(yīng)用中的探討［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9（10）：1234-1235.

［4］周濤，鄒家裕.兩種方法對(duì)丙型肝炎病毒檢測(cè)的對(duì)比研究［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9（8）：935-936.

［5］馮國鋼.丙型肝炎病毒臨床檢驗(yàn)技術(shù)研究進(jìn)展［J］.齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，31（17）：2781-2782.

［6］王榮香，祝建軍，王祖芳.膠體金法快速檢測(cè)血HBV、HIV、HCV、TP在門診患者創(chuàng)傷性操作前檢測(cè)的意義［J］.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010，20（6）：1419-1420.

［7］汪領(lǐng)，胡正義.ELISA法與膠體金吸附法檢測(cè)丙肝抗體特異性比較［J］.醫(yī)藥論壇雜志，2006，23（1）：55.

［8］楊瑞峰，魏來.乙型和丙型肝炎病毒核酸檢驗(yàn)技術(shù)及發(fā)展［J］.中國醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2010，33（5）：475-481.

［9］廖萍.丙型肝炎患者的臨床檢驗(yàn)分析［J］.現(xiàn)代診斷與治療，2012，23（11）：1973-1974.

［10］張旋，裴元元，宋世軍，等.4種國產(chǎn)丙型肝炎病毒抗體酶聯(lián)免疫診斷試劑的檢測(cè)結(jié)果分析［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9（22）：2869-2870.