GAD-Ab、IA2-Ab和ICA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)正確判定糖尿病類(lèi)型的臨床意義

梁慧麗，焦曉寧，韓玉冰河南省濮陽(yáng)市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南濮陽(yáng) 457000

GAD-Ab、IA2-Ab和ICA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)正確判定糖尿病類(lèi)型的臨床意義

梁慧麗，焦曉寧，韓玉冰
河南省濮陽(yáng)市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南濮陽(yáng) 457000

目的探討抗谷氨酸脫羧酶抗體（GAD-Ab）、抗酪氨酸磷酸酶抗體（IA2-Ab）和抗胰島細(xì)胞抗體（ICA）在糖尿病患者臨床分型中的應(yīng)用價(jià)值。方法選取2012年1月—2014年12月該院收治的糖尿病確診病例128例，其中1型糖尿病48例病例1組，2型糖尿病組80例為病例2組，同時(shí)另選同期在該院進(jìn)行健康檢查的健康人士60例作為對(duì)照組，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)GAD-Ab、IA2-Ab，采用間接免疫熒光法檢測(cè)ICA，觀察比較三組間GADAb、IA2-Ab和ICA陽(yáng)性率。結(jié)果病例1組GAD-Ab、IA2-Ab、ICA陽(yáng)性率分別為62.50%、12.50%、22.92%，明顯高于病例2組5.00%、1.25%、3.75%和對(duì)照組0%、0%、0%，比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；其中GAD-Ab對(duì)1型糖尿病的敏感性明顯高于IA2-Ab和IAC，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P<0.05），而聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率97.92%又明顯高于GAD-Ab單項(xiàng)檢測(cè)，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論GAD-Ab對(duì)1型糖尿病具有較高敏感度，而GAD-Ab、IA2-Ab 和IAC聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果判定更為準(zhǔn)確，對(duì)臨床糖尿病患者早期準(zhǔn)確分型具有重要意義。

谷氨酸脫羧酶抗體；酪氨酸磷酸酶抗體；胰島細(xì)胞抗體；糖尿病分型

糖尿病是由多種因素引起的導(dǎo)致胰島功能減退、胰島素抵抗等引發(fā)的糖、蛋白質(zhì)、脂肪、水和電解質(zhì)等一系列代謝紊亂綜合征，以高血糖為主要臨床特點(diǎn)，后期可引發(fā)腎、眼、足等多種并癥，且不可治愈[1]。糖尿病在分型上有1型糖尿病、2型糖尿病、妊娠糖尿病和其他特殊類(lèi)型糖尿病，因妊娠糖尿病在妊娠期后會(huì)自動(dòng)消失，臨床上多以1型糖尿病和2型糖尿病為主，由于1型糖尿病和2型糖尿病發(fā)病機(jī)制完全不同，臨床早期正確分型對(duì)糖尿病的治療具有重要意義[2]，該文作者運(yùn)用探討抗谷氨酸脫羧酶抗體（GAD-Ab）、抗酪氨酸磷酸酶抗體（IA2-Ab）和抗胰島細(xì)胞抗體（ICA）等多種針對(duì)胰島相關(guān)分子的自身抗體免疫學(xué)指標(biāo)，進(jìn)行糖尿病分型研究，取得了一定成績(jī)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年1月—2014年12月該院收治的1型糖尿病患者48例為病例1組，其中男性28例，女性20例，年齡12～68歲，平均（22.6±46.38）歲；2型糖尿病80例為病例2組，其中男性54例，女性36例，年齡16～85歲，平均（62.7±95.13）歲，所有患者均符合1999年WHO診斷與分型標(biāo)準(zhǔn)，無(wú)心、腦、肝等重要器官合并性疾病，無(wú)家庭遺傳病史和精神障礙。另選同期在該院體檢的健康人士60例作為對(duì)照組，其中男性42例，女性18例，年齡18～68歲，平均（48.6±44.18）歲，尊重被研究對(duì)象知情同意權(quán)，均簽訂知情通知書(shū)，自愿參加該研究，并報(bào)請(qǐng)?jiān)撛簜惱砦瘑T會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

①要求被研究對(duì)象檢測(cè)前1 d不食用高脂食物和飲酒，晚餐后禁食12 h，次日清晨抽取空腹靜脈血10 mL離心取血清；② 運(yùn)用美國(guó)R&D公司提供試劑盒，應(yīng)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法根據(jù)試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作，檢測(cè)血清中GAD-Ab、IA2-Ab含量；③運(yùn)用德國(guó)EUROIMMUN公司生產(chǎn)試劑盒，應(yīng)用間接免疫熒光法根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，檢測(cè)ICA含量。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)三組血清GAD-Ab、IA2-Ab、ICA檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行不同組合，全組各項(xiàng)中如果有一項(xiàng)陽(yáng)性即判定為陽(yáng)性，采用矩陣決策法分析三項(xiàng)指標(biāo)對(duì)1型糖尿病的敏感度和診斷符合率。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS14.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行管理分析，計(jì)量資料運(yùn)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組GAD-Ab、IA2-Ab和ICA檢測(cè)結(jié)果比較

病例1組患者48例，共檢測(cè)出GAD-Ab陽(yáng)性患者30例，陽(yáng)性率62.50%；IA2-Ab陽(yáng)性患者6例，陽(yáng)性率12.50%；ICA陽(yáng)性患者11例，陽(yáng)性率22.92%，其中三項(xiàng)重合38例，重合率80.85%；病例2組患者80例，共檢測(cè)出GAD-Ab、IA2-Ab和ICA陽(yáng)性患者4例、1例、3例，陽(yáng)性率5.00%、1.25%、3.75%；對(duì)照組60例，GADAb、IA2-Ab和ICA陽(yáng)性率均為0，病例1組和病例2組以及對(duì)照組比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），具體見(jiàn)表1。

表1 三組GAD-Ab、IA2-Ab和ICA陽(yáng)性率比較[n（%）]

2.2 病例1組GAD-Ab、IA2-Ab和ICA單項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果和各項(xiàng)組合檢測(cè)結(jié)果比較

GAD-Ab單項(xiàng)檢測(cè)率明顯高于IA2-Ab和ICA單項(xiàng)檢測(cè)率，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；GAD-Ab、IA2-Ab和ICA三項(xiàng)組合檢測(cè)率明顯高于GAD-Ab單項(xiàng)檢測(cè)率，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

表2 病例1組GAD-Ab、IA2-Ab和ICA單項(xiàng)和各項(xiàng)組合檢測(cè)結(jié)果比較（n=48）

3 討論

糖尿病是嚴(yán)重影響患者生存生活質(zhì)量和一種慢性疾病，正確分型對(duì)糖尿病的治療至關(guān)重要。由于1型糖尿病是一種自體免疫疾病，和2型糖尿病的主要區(qū)別是1型糖尿病的發(fā)病機(jī)制是自身胰島β細(xì)胞分泌胰島素受損，出現(xiàn)自身免疫系統(tǒng)紊亂，表現(xiàn)為體內(nèi)出現(xiàn)多種胰島素抗體存在[3]，谷胺酸脫羧酶（GAD）是催化谷胺酸脫羧形成抑制性神經(jīng)遞質(zhì)γ-氨基酸?。℅ABA）的關(guān)鍵限速酶，是1型糖尿病患者血清中自抗體的靶抗源，在1型糖尿病的血清中能夠檢測(cè)出多種針對(duì)胰島β細(xì)胞的自身抗體，如胰島細(xì)胞抗體（ICA）、谷氨酸脫羧酶抗體（GAD-Ab）、酪氨酸磷酸酶抗體（IA2-Ab）等，由于GAD抗體早在1型糖尿病出現(xiàn)癥狀10年前就已存在，所以是目前診斷成人隱匿性自身免疫糖尿病的首選免疫學(xué)指標(biāo)，對(duì)1型糖尿病的治療和預(yù)防具有重要意義[4-5]。李泉、曾建濤等研究表明，對(duì)于初發(fā)1型糖尿病患者血清中大多能檢出GAD-Ab，而在正常人和2型糖尿病患者陽(yáng)性檢出率較低，其原因可能是發(fā)病后有持續(xù)性少量胰島β細(xì)胞存在和再生與β細(xì)胞抗原結(jié)構(gòu)功能相似的外源性蛋白引進(jìn)的[6-7]；黃玉宇等[8]研究表明，CDA-Ab 在1型糖尿病中的首次陽(yáng)性檢出率在70%以上，在2型糖尿病中的陽(yáng)性檢出率相對(duì)較低，在正常人中陽(yáng)性檢出率基本為0，這和該研究結(jié)果，1型糖尿病陽(yáng)性檢出率62.50%，2型糖尿病陽(yáng)性檢出率5.00%，正常人陽(yáng)性檢出率0.00%相一致。

ICA是胰島β細(xì)胞的胞質(zhì)抗體，為抗胰島β細(xì)胞所有抗體的總稱，在1型糖尿病抗體中，其陽(yáng)性檢出率雖然不及GDA-Ab，但相對(duì)于2型糖尿病和正常對(duì)照組中，它在1型糖尿病中的檢出率明顯升高，張新房、胡影等[9]研究發(fā)現(xiàn)，ICA陽(yáng)性預(yù)示β細(xì)胞的自身免疫損害，作為糖尿病的高危指標(biāo)，對(duì)1型糖尿病的預(yù)測(cè)具有較高的準(zhǔn)確性；IA2是繼谷氨酸脫羧酶后發(fā)現(xiàn)的又一個(gè)重要的胰島細(xì)胞自身抗原，它的自身抗體IA2-Ab是1型糖尿病診斷分型的一個(gè)重要佐證和免疫學(xué)指標(biāo)，對(duì)高危個(gè)體的預(yù)測(cè)起著重要作用。周厚清、吳行貴等[10]研究發(fā)現(xiàn)，IA2-Ab的靶抗原是利用1型糖尿病患者或前驅(qū)期患者的血清篩選胰島細(xì)胞cDNA文庫(kù)得到的新的β細(xì)胞自身抗原，能反映由于胰島β細(xì)胞損壞而導(dǎo)致的早期發(fā)病，但抗體的陽(yáng)性檢出率可隨病程的延長(zhǎng)而減低，這和該研究中GDA-Ab在1型糖尿病中的陽(yáng)性檢出率明顯高于IA2-Ab的結(jié)果一致。

由于GAD-Ab、IA2-Ab和ICA均為1型糖尿病的重要免疫學(xué)指標(biāo)，它們的聯(lián)合檢測(cè)能夠排除掉GAD-Ab陽(yáng)性是由于腦病引起的可能性，明顯提高其敏感性和特異性，結(jié)合該研究，GAD-Ab、IA2-Ab和ICA三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果明顯高于單項(xiàng)GAD-Ab檢測(cè)結(jié)果，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述，GAD-Ab、IA2-Ab和ICA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)1型糖尿病的正確分型具有重要價(jià)值，對(duì)1型糖尿病的早期免疫干預(yù)和篩查均有重要的臨床意義。

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[2] 黃瑩,萬(wàn)里凱,陳莉紅,等.聯(lián)合檢測(cè)血清GADA、ICA、IAA在糖尿病診斷和分型中的臨床意義[J] .右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2013,35(4):512-513.

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GAD-Ab,IA2-Ab and ICA joint Detection for Correct Judgment Clinical Significance of Type of Diabetes Mellitus

LIANG Hui-li,JIAO Xiao-ning,HAN Yu-bing
Department of Laboratory,Puyang Hospital of Traditional Chinese Medicine,Puyang,Henan Province,457000 China

ObjectiveTo investigate the anti glutamic acid decarboxylase antibody(GAD AB),anti tyrosine phosphatase antibody (IA2 AB)and anti islet cell antibodies(ICA)in patients with diabetes mellitus(DM)type of application value.MethodsSelect January 2012-2014 December in our hospital were diagnosed with diabetes 128 cases of,the type I diabetes 48 cases in group 1 and type II diabetes group 80 cases for cases of the two groups.At the same time in the same period in our hospital were health examination of health professionals in 60 cases do as control group,using enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)for the detection of GAD AB,IA2 AB,using indirect immunofluorescence assay for detection of ICA observed were compared among the three groups GAD AB,IA2 AB and ICA positive rate.ResultsThe positive rates of IA2-Ab,ICA and GAD-Ab were 62.50%,12.50%,22.92%,5%,0%,3.75%,1.25%,0%and 0%,respectively,and the difference was statistically significant(P<0.05).The positive rate of GAD-Ab was significantly higher than that of IA2-Ab and IAC(P<0.05),and the difference was statistically significant(GAD-Ab).ConclusionGAD-Ab has a high sensitivity to type I diabetes,and the combined detection of IAC,IA2-Ab and GAD-Ab is more accurate,and it has important significance for early and accurate classification of clinical diabetes.

Glutamic acid decarboxylase antibody;Tyrosine phosphatase antibody;Islet cell antibody;Type of diabetes

R59

A

1672-4062（2015）10（a）－0176-03

2015-07-03）