乳腺癌TICⅡ、Ⅲ型曲線類型及ADC值與Ki-67相關性研究

趙 茹，趙 紅，鄒立巍，鄭穗生

乳腺癌TICⅡ、Ⅲ型曲線類型及ADC值與Ki-67相關性研究

趙 茹，趙 紅，鄒立巍，鄭穗生

目的探討乳腺癌MRI動態增強曲線（TIC）類型、彌散表觀系數（ADC）值與免疫組化標志物Ki-67表達的相關性。方法 搜集乳腺病例43例，全部行MRI動態增強掃描及彌散加權成像（DWI），測其TIC類型及其ADC值，且所有病例做病理和腫瘤指標Ki-67的免疫組化，并統計分析TICⅡ、Ⅲ型曲線類型及ADC值與Ki-67的表達是否存在相關性。結果乳腺癌ADC值越低，其Ki-67表達越高；TIC曲線類型Ⅲ型者Ki-67表達較Ⅱ型者陽性率高。結論TIC類型及ADC值與Ki-67的表達存在一定相關性，可為臨床評估乳腺癌預后提供有利依據。

乳腺癌；ADC值；TIC曲線；Ki-67

乳腺癌是好發于女性的最常見惡性腫瘤之一，嚴重影響女性身心健康。隨著乳腺MRI檢查技術的應用，乳腺癌的檢出率正逐步提高，依據彌散加權成像（diffusion weighted imaging，DWI）及動態增強技術，乳腺癌的診斷正確率達到89%～91%，特異性達到80%～85%［1－2］。增殖細胞核抗原Ki-67在乳腺癌組織中的表達率較高，是現今常用的評估乳腺癌發生、發展及預后的生物學指標［3］。該文旨在通過研究乳腺癌動態增強曲線（time-signal intensity curves，TIC）類型及彌散表觀系數（apparent diffusion coefficient，ADC）與Ki-67的內在相關性，探討MRI技術用于評估乳腺癌預后的可行性。

1 材料與方法

1.1 病例資料收集安徽醫科大學第二附屬醫院2012年5月～2013年10月術前行MRI檢查、術后經病理證實為乳腺癌女性患者43例，年齡29～75（49.05±10.86）歲，均為單發病灶；其中39例浸潤性導管癌，2例浸潤性小葉癌，2例原位癌。MRI掃描及術前未行任何抗腫瘤治療。

1.2 方法采用Siemens Megnetom Avanto 1.5T超導型MRI，乳腺專用相空陣線圈；患者取俯臥位，乳腺自然下垂，利用固定裝置加壓固定。在肘靜脈處建立靜脈通道。DWI序列：采用平面回波成像（echo-planar imaging，EPI）掃描序列及頻率選擇脂肪抑制技術，同時選用并行采集技術，擴散敏感系數b值分別為0和1 000 s／mm2。動態增強掃描序列：采用快速小角度激發三維動態成像序列（fast low angle shot three dimenisional，FLASH-3D）T1WI軸面掃描，加脂肪抑制，重復掃描6次，每次掃描時間55 s。對比劑選用釓貝葡胺，劑量0.15 mmol／kg，經肘靜脈注射給藥，注射對比劑前先掃1次，注射完畢后再開始連續無間隔掃描5次。

1.3 MRI圖像分析圖像在Synogo工作站應用Siemens Mean Cure軟件，采集連續6期病灶的強化信號。在所得圖像中對病灶繪制感興趣區（relevance originality impact，ROI），采用ROI為15 mm2，同時ROI應盡量避免壞死、囊變及出血等。由2名經驗豐富的放射診斷醫師對病變形態學及TIC進行繪制。依據病變強化方式，將TIC增強曲線分3型：增強后呈持續性強化為Ⅰ型；早期強化明顯，中晚期強化程度＜10%為Ⅱ型；早期強化明顯，中晚期強化減退，且減退＞10%為Ⅲ型。有爭議的病灶由2位醫師共同商議處理。

1.4 免疫組化分析方法采用既用型Ki-67鼠抗人單克隆抗體（試劑盒購自福州邁新生物技術有限公司），用Elivision二步法免疫組織化學染色，陰性對照采用PBS代替一抗，腫瘤細胞胞核呈黃色或棕黃色顆粒為陽性細胞，隨機取10個高倍視野，計數1 000個腫瘤細胞的陽性細胞比率。并將Ki-67表達分為5級，－：0～5%；＋：5%～25%；：25%～50%；：50%～75%；：75%以上。

1.5 統計學處理采用SPSS 16.0統計軟件進行分析，數據以±s表示。所得曲線類型與Ki-67值的相關性用秩和檢驗，所得ADC值與Ki-67間的相關性用散點圖進行分析。

2 結果

2.1 MRI圖像分析43例病灶中所得ADC值與Ki-67數據及表達的相關性分析所得結果見圖1。本研究所得Ⅱ、Ⅲ型曲線與Ki-67結果見表1。乳腺癌TICⅡ、Ⅲ型曲線其ADC值與Ki-67表達見圖2、3。2名醫師診斷結果一致性約為90%。

2.2 統計分析結果乳腺癌ADC值與Ki-67表達呈負相關性（rs＝－0.697，P＜0.05），TICⅡ、Ⅲ型曲線與Ki-67的表達差異有統計學意義（Z＝－0.24，P＜0.05）。

表1 Ki-67與Ⅱ、Ⅲ型曲線的相關數據（n）

3 討論

乳腺癌是女性最常見惡性腫瘤之一，其發病率占女性惡性腫瘤之首［4］。近年來，乳腺癌的影像學研究已從傳統的形態學研究水平慢慢轉向功能與形態學相結合方向發展，依據腫瘤的組織病理學改變與影像學表現之間的關系，從分子和細胞水平檢測疾病特征，從而更準確輔助臨床進行治療，并判斷其預后。MRI依據乳腺癌的成像特點，可以間接反映腫瘤細胞的增殖狀態，從而更有利于乳腺癌的早期診斷、治療及其療效評價。

3.1 Ki-67與ADC值的相關性DWI是依據水分子擴散程度的差別所造成信號的改變來反映組織的差別，主要受水分子的擴散及血液的微循環運動等影響，其中以水分子擴散［5］影響為主。ADC值即將這種水分子運動的強度量化，水分子擴散快，信號衰減快，DWI呈低信號，則ADC值高；反之，ADC值則越低。Ki-67是一種非組蛋白性核蛋白，于細胞分裂M期表達達到最大，與細胞的增殖活性密切相關。研究［6］顯示，在胃腸道惡性腫瘤、甲狀腺癌及宮頸癌等，Ki-67均呈高表達狀態，并且隨著腫瘤惡性程度增高，Ki-67表達越高。在乳腺惡性腫瘤中，細胞密度較正常組織升高，惡性腫瘤細胞繁殖旺盛，細胞密度較高，細胞內大分子蛋白含量增多，黏性增加，細胞外容積減少，限制了水分子的擴散，導致其ADC值降低，DWI信號增高；因此認為ADC值越低，其腫瘤組織內細胞密度越大，腫瘤組織增殖旺盛，其細胞增殖活性越強，Ki-67表達越高，反之則Ki-67表達越低。該研究證實ADC值與Ki-67的表達呈負相關性，即ADC值越高，其Ki-67表達偏向于低表達；而ADC值越低，Ki-67則呈高表達。但該研究中所收集病例數量較少，有一定的局限性，因此還需更多病例加以證實。

3.2 Ki-67與MRI-TIC曲線的相關性常規MRI對乳腺病變的判別較差，因此常應用TIC進行乳腺病變的鑒別，并將所得TIC分為上升型、平臺型、速升速降型，又稱Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。Ⅰ型多見于良性腫瘤，Ⅲ型多見于惡性腫瘤，Ⅱ型多見于良惡性之間。研究［7］顯示這是由于良惡性病變內微血管密度差別所致。良性病變腫瘤內新生血管少，組織分化較成熟，對比劑進入血管外周間隙的量多、進入靜脈量少，因而病變區信號呈持續升高或長居不下，TIC呈上升型；惡性病變內微血管容量多，因血管內皮不成熟、血管通透性較高及動靜脈短路等，經靜脈回流多，組織分化較差，故而呈Ⅲ型。因此在Ⅲ型曲線患者其腫瘤內分化程度低，腫瘤細胞增殖能力強，其增殖活性高，Ki-67值表達應較高；Ⅱ型曲線患者腫瘤新生血管相對較少，腫瘤內組織分化程度偏高，細胞增殖能力相對低下，細胞增殖活性偏低，Ki-67表達則偏低。在本研究43例患者中22例表現為Ⅱ型曲線，21例表現為Ⅲ型，所得數據與Ki-67的表達存在相關性，即Ⅱ、Ⅲ型曲線兩者Ki-67表達差異有統計學意義。結合該研究收集病例中Ⅱ型曲線Ki-67傾向于（＋～），而Ⅲ型曲線Ki-67表達傾向于（～），表明Ⅲ型曲線其Ki-67值表達較Ⅱ型曲線偏高，與報道［8］一致。但該研究中收集病例數有限，不排除誤差的可能性。

該研究證實，乳腺癌患者MRI-TIC、ADC值與免疫組化標志物Ki-67間存在相關性。TIC曲線Ⅲ型者Ki-67表達偏高，而ADC值低。因而可以經MRI檢查初步表明病灶并判斷出病灶的良惡性，在此基礎上結合ADC及TIC類型間接反應乳腺癌的細胞增殖狀態，并預測Ki-67表達狀態，為臨床評估乳腺癌預后及采用化學治療或內分泌治療提供更多可用信息。

［1］ Hahn S Y，Ko E Y，Han B K，et al.Role of diffusion-weighted imaging as an adjunct to contrast-enhanced breast MRI in evaluating residual breast cancer following neoadjuvant chemotherapy［J］.Eur J Radiol，2014，83（2）：283－8.

［2］ 徐麗瑩.乳腺癌MRI診斷的價值及進展［J］.臨床放射學雜志，2004，23（1）：78－80.

［3］ Inwald E C，Klinkhammer-Schalke M，Hofst?dter F.Ki-67 is a prognostic parameter in breast cancer patients：Results of a large population－based cohort of a cancer registry［J］.Breast Cancer Res Treat，2013，139（2）：539－52.

［4］ 沙海濱，賀圣文，陳景武，等.Possion回歸模型分析在不同地區乳腺癌發病率比較中的應用［J］.數理醫藥學，2008，21（5）：521－2.

［5］ Kim S H，Cha E S，Kim H S，et al.Diffusion-weighted imaging of breast cancer：correlation of the apparent diffusion coefficient value with prognostic factors［J］.J Magn Reson Imaging，2009，30（3）：615－20.

［6］ Scholzen T，Gerdes J.The Ki-67 protein：from the known and the unknown［J］.J Cell Physiol，2000，182（3）：311－22.

［7］ 勾素華，朱 紅，申大光，等.乳腺癌MR動態增強與腫瘤微血管密度的相關性研究［J］.廣西醫科大學學報，2010，27（4）：562－4.

［8］ Lee S H，Cho N，Kim S J，et al.Correlation between high resolution dynamic MR features and prognostic factors in breast cancer［J］.Korean J Radiol，2008，9（1）：10－8.

Correlations between Ki-67 and the TIC curve type and the ADC values of patients in breast cancer

Zhao Ru，Zhao Hong，Zou Liwei，et al（Dept of Radiology，The Second Affiliated Hospital of Anhui Medical University，Hefei 230601）

ObjectiveThe aim of this study was to determine the relationships among Ki-67 and the TIC curve type and the ADC values of patients in breast cancer.Methods43 patients who performed dynamic contrast-enhanced MRI and diffusion weighted imaging（DWI）in preoperative phase were selected.Measuring ADC values and dynamic enhancement curve（TIC）type.And all of these patients had done the pathology and the tumor marker of Ki-67.Statistical analysis was used to compare the correlations between Ki-67 and the TIC type and the ADCvalues.Results The lower the ADC valued，the higher the Ki-67expressed.The Ki-67 expressions in TIC curve typeⅢwere higher than type Ⅱ.ConclusionThe dynamic enhanced MRI curve type and the ADC values have a certain correlation with the expressions of Ki-67，and can provide advantageous basis for clinical to assess the prognosis of breast cancer.

breast cancer；ADC；TIC curve type；Ki-67

R 445.2；R 737.9；R 446.6

1000－1492（2015）02－0220－04

2014－09－28接收

安徽省高等學院省級自然科學基金（編號：KJ2011Z188）

安徽醫科大學第二附屬醫院放射科，合肥 230601

趙 茹，女，碩士研究生；鄭穗生，男，主任醫師，碩士生導師，責任作者，E-mail：zhengss0509＠hotmail.com