液質聯用技術在中藥復方研究中的應用

王瑩杜靜

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液質聯用技術在中藥復方研究中的應用

王瑩杜靜

液質聯用；中藥復方；應用進展

中藥復方包含中醫藥醫理、思辨和配伍規律，是中醫臨床用藥的精髓。中藥復方臨床療效來源于其內在物質基礎，研究中藥復方的藥效物質基礎，可以進一步闡釋中醫藥理論，明確中藥復方的配伍規律和作用機制。液質聯用技術不僅擁有液相色譜的優越分離能力和檢測靈敏度，還擁有質譜的高選擇性和強大的定性專屬性，被廣泛應用于中藥復方成分的結構鑒定、含量測定及體內代謝等諸多方面。本文對液質聯用技術在中藥復方研究中的應用進行綜述。

1 液質聯用技術在中藥復方結構鑒定中的應用

液質聯用技術具有強大的分離能力和結構鑒定特點，通過對已知同類化合物的質譜裂解規律以及未知化合物質譜信息的分析，再參考未知成分的保留時間、紫外光譜等信息，可實現對未知化合物的結構進行合理推測[1-2]。汪祺等[3]采用LC-MS聯用儀通過比較五味子中間體及8家企業生產的生脈注射液樣品發現，五味子中間體的主要成分為木脂素類，并建立生脈注射液中木脂素類成分的分析方法。Wang等[4]運用LC-ESI-MSn根據相對分子量信息和多級質譜碎片信息從復方龍膽瀉肝湯中分離鑒定了51個黃酮類化合物，并對主要成分的質譜裂解行為進行了研究。Zheng等[5]運用UPLC-ESI-QTOF-MS從中藥復方溫脾湯中鑒定出59個化合物，這些化合物主要為酚類、三萜皂苷、生物堿和黃酮苷四大類化合物。張靖等[6]采用UPLC-LTQ-MS定性分析方法比較了復方三芪口服液與黃芪及三七單味藥質譜數據庫，對組方質譜圖中39個主要成分峰進行了快速鑒別，為該組方活性成分的體內外快速分析研究提供實驗依據。

2 液質聯用技術在中藥復方含量測定分析中的應用

液質聯用技術高靈敏度、高選擇性的優點非常適合對中藥復方中化學成分進行定量分析。中藥復方的定量分析多采用液相與單重四級桿（LC/MS）或液相與三重四級桿（LC/MS/MS）聯用技術，通過選擇離子檢測（SIM）、選擇反應監測（SRM）或多反應監測（MRM）等模式同時定量測定多種化學成分[1-2]。Chang等[7]建立了一種能快速準確同時定量測定中藥復方生脈散中包括人參中的皂苷及五味子中的木脂素成分的8個活性成分的HPLC-MS分析方法，該法簡單、靈敏、準確、快速，有利于進一步完善復方生脈散質量控制研究。Wang等[8]對葛根芩連片中的葛根素、鹽酸小檗堿和黃芩苷三種化學成分進行了含量測定，建立了一種簡單快速、重復性好的UPLC-ESIMS（SIM）方法。張藝竹等[9]采用液相-質譜聯用技術對中藥復方制劑參甘冠心合劑中異甘草苷、毛蕊花糖苷、芍藥苷、阿魏酸等11種有效成分同時定量測定，為該方劑療效物質基礎的確定提供了科學依據。

3 液質聯用技術在中藥復方藥物代謝研究中的應用

中藥復方有效成分復雜，真正產生藥理作用的可能是單個組分，也可能是多個組分，或者是各組分相互作用產生的新物質，利用液質聯用技術，不僅可以避免復雜、煩瑣、耗時的分離純化樣品工作，而且能分離鑒定過去難以檢測到的痕量藥物代謝產物。由于藥物的代謝產物往往保持著原藥的母核結構，因此原藥與其代謝產物具有相似的質譜碎裂過程和特征碎片離子，可以據此來推斷代謝物的結構[10]。因此，液質聯用技術在中藥復方藥物代謝研究方面具有廣闊的前景。Deng等[11]研究大鼠灌服清火通竅片后血漿中的化學成分，并建立同時定量測定血漿中三七皂苷R1、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1及淫羊藿苷五種成分的分析方法；Wang等[12]建立了一種UPLC/Q-TOF-MS/MS方法，大鼠在灌服茵陳蒿湯后，血漿中檢測到21個色譜峰，經過鑒定推測其中2個為代謝產物；左冉等[13]采用LC-ICR-MS法深入研究黃連解毒湯體內發揮藥效的作用的物質基礎，通過與黃連解毒湯提取物和混合對照品的保留時間和高分辨質譜信號比較分析，在血漿樣品中共發現38個入血成分，包括22個原形成分和16個代謝產物，結果表明，黃連解毒湯主要成分的代謝產物在大鼠體內多以硫酸化和葡糖醛酸等二相代謝產物形式存在。Xu等[14]通過LC-ESI-MS方法，驗證該法能應用于大鼠灌服大承氣湯后大鼠血漿中5種化學成分的藥代動力學研究；辛楊等[15]利用超高效液相色譜-高分辨質譜聯用技術法，定性分析大鼠灌服“甘草附子湯”和“術附湯”后血漿中的次烏頭堿，結果表明，“甘草附子湯”和“術附湯”中次烏頭堿體內吸收程度不同，兩復方功效差異可能來源于次烏頭堿在體內吸收程度的不同。王佩瑤等[16]利用LCTOF-MS測定雙龍方（人參、丹參）中10種原形成分和一種代謝物在大鼠體內的藥代動力學參數，結果表明丹酚酸與人參皂苷有協同作用，臨床上使用雙龍方時，每隔8h服用1次即可維持所需藥效濃度。

4 小結

液質聯用技術將高效液相超強的分離能力和質譜的高靈敏度和專屬特異性強的優點融合在一起，有效解決了中藥及復方成分復雜、內源性雜質較多、且活性成分及代謝物在生物樣品中濃度較低等問題，已成為中藥各類成分分析的重要手段，為中藥及中藥復方的體內過程研究和代謝產物的分析奠定了基礎。

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（收稿：2015-01-23 修回：2015-03-10）

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