黑果枸杞水浸液對(duì)中華鳑鲏及草金魚抗缺氧能力的影響

□ 談?dòng)榔?魏智清

黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr)系茄科枸杞屬多年生植物，分布于我國(guó)西北各省區(qū)及內(nèi)蒙古、西藏等地區(qū)，是民族醫(yī)藥中的常用藥材。黑果枸杞所含化學(xué)成分包括多糖、花色苷、原花青素、甜菜堿、黃酮、類黃酮、多酚類、揮發(fā)油類、礦物質(zhì)、維生素類及多種氨基酸等多種營(yíng)養(yǎng)成分。大量研究表明，黑果枸杞具有抗疲勞、降血糖、抗氧化、降血脂、延緩衰老、抗動(dòng)脈硬化、增強(qiáng)非特異性免疫等生理藥理作用 。其中有研究表明黑果枸色素、甜菜堿對(duì)小鼠具有顯著的抗缺氧、抗疲勞作用。尚未見有關(guān)黑果枸杞對(duì)魚類抗缺氧影響的報(bào)道。為此，本實(shí)驗(yàn)以中華鳑鲏、草金魚為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，探討黑果枸杞水浸液對(duì)魚類抗缺氧能力的影響，為進(jìn)一步開發(fā)黑果枸杞提供科學(xué)依據(jù)。

一、材料與方法

(一)實(shí)驗(yàn)材料。去氧水:將自來(lái)水煮沸后盛入一容器并加蓋密封，自然冷卻后即為去氧水。實(shí)驗(yàn)時(shí)水溫為15℃～18℃。經(jīng)美國(guó)維賽YSI手持式多參數(shù)儀水質(zhì)檢測(cè)儀測(cè)定，此去氧水溶解氧為(0.97～1.29)mg/L，低于同溫度范圍經(jīng)靜置的自來(lái)水的溶解氧(2.69～2.88)mg/L。黑果枸杞:由寧夏農(nóng)林科學(xué)院提供的黑果枸杞成熟干燥果實(shí)。實(shí)驗(yàn)魚均購(gòu)于銀川市西夏區(qū)同心路魚市，購(gòu)回的中華鳑鲏和草金魚將除去死、弱個(gè)體，在經(jīng)曝氣處理后的水中暫養(yǎng)24h，禁食，待適應(yīng)水環(huán)境后，選擇游泳活潑的個(gè)體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。中華鳑鲏(Rhodeus sinensis Gunther)體質(zhì)量為(0.24 ±0.06)g，體長(zhǎng)為(2.89 ±0.14)cm，草金魚(Carassius auratus)體質(zhì)量為(0.35 ±0.08)g，體長(zhǎng)為(3.70 ±0.21)cm。

(二)實(shí)驗(yàn)方法。

1.黑果枸杞水浸液的制備。稱取干品黑果枸杞1g，加200mL熱開水浸泡30min，然后用濾紙過(guò)濾得到黑果枸杞水浸液。

2.密閉缺氧實(shí)驗(yàn)。

(1)黑果枸杞水浸液對(duì)中華鳑鲏缺氧存活時(shí)間的影響。把中華鳑鲏分成7組，每組10條，用300mL錐形瓶作為容器。對(duì)照組裝滿去氧水，放入10條中華鳑鲏;將實(shí)驗(yàn)組中華鳑鲏分別放入盛有 7.5、8、8.5、9、9.5、10mL 的黑果枸杞水浸液的錐形瓶中并全部用去氧水稀釋至瓶口，用保鮮膜密封瓶口，瓶?jī)?nèi)不留氣泡，觀察并記錄瓶中每條中華鳑鲏的死亡時(shí)間，以探討黑果枸杞水浸液對(duì)中華鳑鲏抗缺氧能力的影響。本實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

(2)黑果枸杞水浸液對(duì)草金魚缺氧存活時(shí)間的影響。把草金魚分成6組，每組5條，用300mL錐形瓶作為容器。對(duì)照組裝滿去氧水，放入5條草金魚;將實(shí)驗(yàn)組草金魚分別放入盛有 7.5、8、8.5、9、9.5mL 的黑果枸杞水浸液的錐形瓶中并全部用去氧水稀釋至瓶口，用保鮮膜密封瓶口，瓶?jī)?nèi)不留氣泡，觀察并記錄瓶中每條草金魚的死亡時(shí)間，以探討黑果枸杞水浸液對(duì)草金魚抗缺氧能力的影響。本實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

3.數(shù)據(jù)處理。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用Mean±SD，表示，采用SPSS.19軟件進(jìn)行方差分析，P﹤0.05為差異顯著 ，P﹤0.01為差異極顯著。存活時(shí)間延長(zhǎng)率(%)=(實(shí)驗(yàn)組平均存活時(shí)間-對(duì)照組平均存活時(shí)間)/對(duì)照組平均存活時(shí)間×100%。

二、結(jié)果

表1 黑果枸杞水浸液對(duì)中華鳑鲏缺氧存活時(shí)間的影響(Mean±SD，n=30)

(一)黑果枸杞水浸液對(duì)中華鳑鲏抗缺氧能力的影響。中華鳑鲏在密閉缺氧條件下不同濃度的黑果枸杞水浸液中的存活時(shí)間見表1。從表1中的結(jié)果可以看出，實(shí)驗(yàn)組3、4與對(duì)照組相比均有顯著差異(P＜0.05)，實(shí)驗(yàn)組5存活時(shí)間最長(zhǎng)，達(dá)到了125min，與對(duì)照組相比有極顯著差異(P＜0.01)，即中華鳑鲏在相同劑量的缺氧水加入8.5、9mL黑果枸杞水浸液，其缺氧存活時(shí)間顯著延長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)組1、2、6與對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。即中華鳑鲏在相同劑量的缺氧水加入 7.5、8.0、10.0mL 黑果枸杞水浸液，其缺氧存活時(shí)間無(wú)明顯延長(zhǎng)。

(二)黑果枸杞水浸液對(duì)草金魚抗缺氧能力的影響。草金魚在密閉缺氧條件下不同濃度的黑果枸杞水浸液中的存活時(shí)間見表2。

表2 黑果枸杞水浸液對(duì)草金魚缺氧存活時(shí)間的影響(Mean±SD ，n=15)

從表2中的結(jié)果可以看出，實(shí)驗(yàn)組3、4與對(duì)照組相比均有顯著差異(P ＜0.05)，實(shí)驗(yàn)組3存活時(shí)間最長(zhǎng)，達(dá)到了156min。即草金魚在相同劑量的缺氧水加入8.5、9mL黑果枸杞水浸液，其缺氧存活時(shí)間顯著延長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)組1、2、5與對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，草金魚在相同劑量的缺氧水加入 7.5、8.0、9.5mL 黑果枸杞水浸液無(wú)明顯變化。

以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，不同劑量的黑果枸杞水浸液均可延長(zhǎng)中華鳑鲏、草金魚的存活時(shí)間，有的劑量達(dá)到顯著差異(P＜0.05)或極顯著差異(P＜0.01)。表明一定劑量的黑果枸杞水浸液可顯著提高魚類的抗缺氧能力。

三、分析與討論

近年來(lái)的研究證實(shí)黑果枸杞含有多糖、花色苷色素、甜菜堿、原青花素、黃酮等多種營(yíng)養(yǎng)成分，具有抗疲勞、耐缺氧、抗氧化、降血糖等作用。黑果枸杞中多糖能夠減輕小白鼠自由基的生成，促進(jìn)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化物的清除。維持高含量的肝糖原和肌糖原，它們是大強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)的主要來(lái)源之一。能夠減少運(yùn)動(dòng)后血乳酸的堆積，延緩疲勞發(fā)生。閆亞美等對(duì)黑果枸杞與5種果蔬(葡萄、樹莓、紫甘藍(lán)、藍(lán)莓和紫薯)中花色苷組成及體外抗氧化活性的比較研究，證實(shí)黑果枸杞總花色苷含量最高，其抗氧化活性的能力最強(qiáng)，增加延緩運(yùn)動(dòng)性疲勞和體能恢復(fù)的效果。吳秀香等就葡萄籽原花青素的耐缺氧作用、寶麗等就歐洲越桔花青素的耐缺氧作用進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，認(rèn)為原花青素的耐缺氧作用機(jī)制可能與增加大腦供血、降低心腦耗氧量、清除自由基和抑制脂質(zhì)過(guò)氧化等作用有關(guān)。鹽酸甜菜堿，其化學(xué)結(jié)構(gòu)與膽堿相似，作為甲基供體，在機(jī)體代謝中有著重要作用，具有減緩腫瘤的形成、降低應(yīng)激反應(yīng)、改善食欲等作用。朱玉云等的研究結(jié)果顯示，能明顯延長(zhǎng)異丙腎上腺素所致急性心肌缺氧小鼠的存活時(shí)間，甜菜堿對(duì)心肌缺血缺氧具有改善和保護(hù)作用。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，添加一定濃度的黑果枸杞水浸液能明顯延長(zhǎng)中華鳑鲏和草金魚在常壓密閉缺氧條件下的存活時(shí)間，提高其抗缺氧能力，因黑果枸杞中含有豐富的活性物質(zhì)，具有抗缺氧、耐疲勞等作用。

［1］暴鳳偉，郭武艷，邳馨，等.黑果枸杞的生物活性研究進(jìn)展［J］.中國(guó)執(zhí)業(yè)藥師，2014

［2］林麗，張裴斯，晉玲，等.黑果枸杞的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)藥房，2013

［3］余江琴，陳朋.黑果枸杞色素的研究進(jìn)展［J］.現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐，2014

［4］古麗達(dá)娜，賈琦珍，陶大勇，等.黑果枸杞色素對(duì)小鼠常壓耐缺氧及游泳耐力的影響［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2009

［5］江建紅，陳曉琴，張蔚佼.黑果枸杞果實(shí)多糖抗疲勞生物功效及其機(jī)制研究［J］.食品科技，2009

［6］馮薇，何恩鵬，陳曉琴.黑果枸杞果實(shí)多糖對(duì)小白鼠運(yùn)動(dòng)能力影響及量效研究［J］.干旱區(qū)研究，2009

［7］閆亞美，代彥滿，冉林武，等.黑果枸杞與5種果蔬中花色苷組成及體外抗氧化活性比較［J］.食品工業(yè)科技，2014

［8］劉增根，陶燕鐸，邵赟，等.柴達(dá)木枸杞和黑果枸杞中甜菜堿的測(cè)定［J］.光譜實(shí)驗(yàn)室，20l2

［9］吳秀香，李淑云，馬克玲.葡萄籽原花青素耐缺氧作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2005

［10］呂海英，林麗，潘云，等.黑果枸杞葉總黃酮抗氧化和降血脂成分測(cè)定［J］.新疆師范大學(xué)學(xué)報(bào)，2012

［11］陳曉琴.黑果枸杞果實(shí)多糖的制備與抗疲勞、降血糖生物功效的研究［D］.新疆師范大學(xué)，2007

［12］李彩霞，焦揚(yáng)，梁倩倩，等.黑果枸杞提取物抗氧化性研究［J］.食品工業(yè)科技，2006

［13］寶麗，姚新生，呂艷青，等.歐洲越桔花青素提取物對(duì)小鼠耐常壓缺氧能力的影響［J］.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2007

［14］朱玉云，高允生，張繼國(guó)，等.鹽酸甜菜堿對(duì)小鼠耐缺氧作用的影響［J］.泰山醫(yī)學(xué)院報(bào)，2004