乙肝病毒基因分型與HBV DNA及臨床表現的關系

李衛昆650041云南省昆明市第三人民醫院肝病三科

乙肝病毒基因分型與HBV DNA及臨床表現的關系

李衛昆
650041云南省昆明市第三人民醫院肝病三科

目的：探討乙肝病毒基因分型(C型和B型)與HBV DNA載量及臨床表現的關系。方法：2011-2013年收治慢性乙型肝炎、肝硬化患者160例，經檢測均為乙肝病毒(HBV)基因型；160例患者均進行基因分型，選測基因B型患者與基因C型患者對HBV DNA載量及臨床類型作比較。結果：160例患者中，基因B型64例(40%)，基因C型92例(57.5%)，其他類型4例(2.5%)；在HBV DNA載量方面及CHB和LC人數方面，C型均顯著高于B型，差異有統計學意義(P＜0.05)；C型肝損害嚴重程度高于B型。結論：乙肝病毒基因C型患者HBV DNA載量高，病情活動相對劇烈，易發展為重度肝損傷、重型肝炎、肝硬化。

乙型肝炎病毒；基因分型；HBV DNA

資料與方法

2011-2013年收治慢性乙型肝炎及肝硬化患者160例，經檢測均為乙肝病毒(HBV)基因型，其中慢性乙肝83例，乙肝肝硬化77例。160例患者中，男113例，女47例，平均年齡(55.5±15.6)歲。所有患者均按照病毒性肝炎診斷標準(第十次全國病毒性肝炎會議修訂)診斷為乙型肝炎，并排除其他類型肝炎病例。

方法：所有納入患者均記錄詳細個人信息，包括患者年齡、性別、體重、工作職務、病程、病史及臨床表現等，同時留取血清標本做基因分型檢測。同時接受肝功能、乙肝兩對半和HBV DNA定量檢測。選測基因B型患者與基因C型患者對HBV DNA載量及臨床類型作比較。①HBV DNA定量檢測方法：本次研究采用熒光定量PCR技術檢測HBV DNA載量，所采用試劑和質控液、標準液均購于儀器廠家。熒光定量基因擴增儀自帶分析軟件，可自行處理相關數據。按照HBV DNA＞103作為陽性判定標準，2次同為陽性，作為陽性者[1]。②HBV DNA基因分型方法：HBV基因分型采用微板核酸雜交試劑盒完成，檢驗對象均為HBV DNA定性檢測陽性者。具體操作方法：待測血清100 μL與等量處理液混勻，煮沸并離心，然后取上清液進行離心，最后進行預變性、循環和延伸。取擴增產物進行反應，結果按P/N值(標本OD值/陰性參照OD值)判定。雜交孔中，呈現陽性結果的孔顯示名稱，為所檢測標本的病毒基因型[2]。

基因分型觀察標準：P/N值＜3.0為陰性，P/N值≥3.0為陽性。

統計學方法：本次研究采用SPSS 18.0統計學軟件分析所有數據，以(±s)表示計量資料，并采用t檢驗；采用χ2檢驗計數資料。P＜0.05為差異有統計學意義。

結果

乙肝病毒基因分型的分布：檢測發現乙肝病毒基因B型64例(40.0%)，基因C型92例(57.5%)，其他類型4例(2.5%)。本次研究中，乙肝病毒基因B型及C型患者，構成比97.5%，其他型僅2.5%。B、C型比例16:23。

乙肝病毒基因分型與HBV-DNA載量之間的關系：在HBV DNA載量方面，C型顯著高于B型，差異具有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

乙肝病毒基因分型與臨床表現的關系：在慢性乙型肝炎(CHB)和肝硬化(LC)人數兩方面，C型均顯著高于B型，差異有統計學意義(P＜0.05)，提示C型肝損害嚴重程度高于B型，見表2。

討論

乙肝病毒在進化中，從未停止基因突變，且基因突變率較高，這主要是因為乙肝病毒的逆轉錄過程轉錄方式和缺乏校對酶所造成的。乙肝病毒所形成的不同基因型是其自然感染時變異特點的真實反映，也是病毒進化的結果。當前，已確定了8種乙肝病毒基因型，按A～H型命名。當前，乙肝病毒基因型中，主要為B型及C型，D型及混合型均在2%左右，本次研究中檢測160例患者，發現乙肝病毒基因B型64例(40.0%)，基因C型92例(57.5%)，其他類型4例(2.5%)。乙肝病毒基因B型和C型患者，構成比97.5%，其他型僅2.5%。B、C型比例16:23，約等于4:6。區映研等所作研究中發現基因分型分布B型29 例(26.9%)，C型51例(47.2%)，與本次研究結果存在一定差異，但是2次研究都顯示C型人數顯著高于B型，且高于其他型，造成數據差異的主要原因為研究對象的數量和個體差異[3]。

本次研究結果顯示，發現C型患者的各指標與B型差異有統計學意義(P＜0.05)，證明C型肝損害嚴重程度高于B型。同時，研究中還發現在HBV DNA載量方面及慢性乙型肝炎和肝硬化人數方面，C型均顯著高于B型，差異有統計學意義(P＜0.05)，說明C型乙肝病毒基因患者易發展為慢性乙型肝炎和肝硬化[4]。

本次研究針對B型和C型的結果顯示：①B型：HBV DNA載量相對較低，病情活動相對緩和，臨床類型普通慢性乙型肝炎占多數，肝硬化比例少。②C型：HBV DNA載量高，病情活動較為劇烈，肝硬化、重度肝損傷、重型肝炎比例大，普通慢性乙型肝炎比例少[5]。提示在乙肝病毒基因C型患者HBV DNA載量高，病情活動相對劇烈，易發展為重度肝損傷、重型肝炎、肝硬化；而B型與C型相反。在臨床診斷中，可根據患者的乙肝病毒基因分型，制定治療方案，做好早期預防措施，使患者病情進展減慢。

The relationship between HBV genotypes and HBVDNA and clinical manifestations

Li Weikun
The Third Hepatic Department,the Third People's Hospital of Kunming City,Yunnan Province 650041

Objective:To explore the relationship between HBV genotypes and HBV DNA and clinical manifestations.Methods: 160 cases of chronic hepatitis B,liver cirrhosis patients were selected from 2011 to 2013.They were hepatitis B virus(HBV) genotype through detection.160 patients were given the genotypes.We compared HBV DNA load and clinical type in genotype B patients and genotype C patients.Results:In 160 patients,genotype B was in 64 cases(40%);genotype C was in 92 cases(57.5%);the other type was in 4 cases(2.5%).In the HBV DNA load and CHB and the number of LC,C type was significantly higher than that of B type,and the difference was statistically significant(P＜0.05).Liver damage of type C was more severe than the B type. Conclusion:HBV DNA load of HBV genotype C patients was high.The activity of disease was relatively severe.It was easy for the development of severe liver injury,severe hepatitis,liver cirrhosis.

Hepatitis B virus;Genotyping;HBV DNA

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.8.66