血脂異常患者頸動脈內中膜厚度與血清基質金屬蛋白酶-9的相關性分析

劉 瑤 金 巖

1.遼寧省撫順市中醫院功能科，遼寧撫順 113008；2.遼寧省撫順市中心醫院內分泌科，遼寧撫順 113008

近年來，隨著人民生活水平的提高及生活方式的改變，膳食結構發生變化，攝入含脂物質過多，年輕化高血脂人群逐年增加。由于長期高血脂是促進動脈血管壁粥樣硬化的重要因素，且頸動脈壁的粥樣硬化改變與心腦血管疾病間有著重要的關系，因此，血脂異常人群動脈粥樣硬化早期診斷具有重大意義。研究顯示，高脂血癥患者血清基質金屬蛋白酶（matrix metalloprotease，MMP）水平顯著高于正常人，血清MMP-9可作為反映高脂血癥患者早期動脈粥樣硬化的血清學指標之一。頸動脈內中膜厚度 （intima-me-diathickness，IMT）增厚是頸動脈粥樣硬化的一個早期標志。因此，本研究利用頸動脈超聲檢測血脂異常的人群頸動脈IMT及血清MMP-9水平，分析頸動脈IMT與血清MMP-9水平的相關性。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2013年9月～2014年6月于遼寧省撫順市中醫院（以下簡稱“我院”）體檢的健康志愿者101名（對照組），男 56名，女 45名，年齡 33～71 歲，平均（54.5±12.0）歲。血脂異常患者110例（血脂異常組），男67例，女 43例，年齡 35～78歲，平均（53.1±13.5）歲。血脂異常診斷標準按2007年《中國成人血脂異常防治指南》[1]標準執行：三酰甘油 （TG）≥1.7 mmol/L，總膽固醇（TC）≥5.18 mmol/L，低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）>3.37mmol/L，高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）<1.04mmol/L。排除標準：患有高血壓、冠心病、糖尿病、肝腎功能不全、惡性腫瘤、急性感染、腦血管意外或外周血管疾病、創傷或手術2周以內；試驗前4周內服用降脂藥物；頸動脈圖像不清晰。

1.2 頸動脈內中膜厚度檢測

使用PHILIP IU22和阿洛卡а10型彩色多普勒超聲診斷儀，探頭頻率5～10 MHz。受檢者取仰臥位，充分暴露頸部，下頜微仰，頭稍偏向檢查區對側，探頭置于頸部，上至下頜角處，下至鎖骨上縱橫切面掃查頸總動脈、頸內動脈、頸外動脈，觀察其走形、分叉、血管內壁、內中膜厚度、有無斑塊。記錄血管內徑、斑塊大小和位置、血流參數及頸動脈IMT。

正常頸動脈管壁的聲像圖表現為：內膜層為一細線樣連續光滑的等回聲帶；中膜平滑肌層為低回聲暗帶；外膜層清晰而明亮的強回聲帶，為疏松結締組織構成。測3個點的IMT：①頸總動脈主干（頸總動脈分叉水平下方1.0～1.5 cm范圍）；②頸總動脈分叉部；③頸內動脈起始處。測量兩側共6點值然后取平均值。將IMT≥1.0 mm定義為IMT增厚，局限性≥1.5 mm定義為斑塊。按斑塊的回聲特征分類：均質性回聲斑塊和不均質回聲斑塊。均質性回聲斑塊是指斑塊內部回聲均勻一致，表現為低回聲、等回聲和強回聲。不均質回聲斑塊是指斑塊內部有20%以上面積的回聲不一致。

1.3 實驗室檢查

所有受試者采血前24 h禁酒及高脂飲食，清晨空腹采靜脈血，標本3 h內送檢，采用全自動生化分析儀測定 TC、TG、LDL-C、HDL-C、空腹血糖（BS）、血肌酐（Bcr）等指標。載脂蛋白AⅠ、載脂蛋白B采用免疫透射比濁法檢測，載脂蛋白AⅠ/載脂蛋白B比值由應用軟件自動計算。血清MMP-9的測定采用雙抗體夾心酶聯免疫法（enzyme linked mi munosorbent assay，ELISA）。

1.4 統計學方法

采用SPSS 17.0統計學軟件進行數據分析，計量資料數據用均數±標準差（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗；計量指標間相關性的檢驗采用直線相關分析；以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料比較

對照組和血脂異常組性別、年齡、空腹血糖、血尿酸、血壓等指標差異均無統計學意義（P>0.05）；血脂異常組三酰甘油、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇明顯高于對照組，血脂異常組高密度脂蛋白膽固醇低于對照組，差異有高度統計學意義（P<0.01）。見表1。

2.2 兩組頸動脈內中膜厚度及斑塊形成情況比較

與對照組相比，血脂異常組受檢者IMT明顯高于對照組，差異有高度統計學意義（P<0.01）。同時，IMT增厚率和斑塊形成率也明顯高于對照組，差異有統計學意義（P<0.01或P<0.05）。見表2。

表1 兩組一般情況比較（±s）

表1 兩組一般情況比較（±s）

注：1 mm Hg=0.133 kPa

2.82±0.97 3.59±1.03 12.907<0.01 1.56±0.41 0.93±0.21 8.901<0.01 1.53±0.64 0.89±0.53 14.531<0.01 121.8±11.5 123.1±12.3 1.096 0.274 85.8±8.7 86.7±7.8 0.059 0.861 60.3±15.4 125.7±18.3 37.967<0.01低密度脂蛋白膽固醇（mmol/L）高密度脂蛋白膽固醇（mmol/L）載脂蛋白AⅠ/載脂蛋白B收縮壓（mm Hg）舒張壓（mm Hg）血清基質金屬蛋白酶-9（μg/L）對照組（n=101）血脂異常組（n=110）t/χ2值P值4.35±1.17 5.52±1.21 10.967<0.01組別 總膽固醇（mmol/L）對照組（n=101）血脂異常組（n=110）t/χ2值P值56（55.4）67（60.9）45（44.6）43（39.1）54.5±12.0 53.1±13.5 0.798 0.426 22.2±1.6 27.2±2.2 21.087<0.01 5.6±0.4 5.7±0.6 0.702 0.496 324.7±76.7 323.2±94.8 1.095 0.273 1.34±0.74 2.03±1.38 13.836<0.01組別 年齡（歲） 體重指數（kg/m2） 空腹血糖（mmol/L） 血尿酸（mmol/L） 三酰甘油（mmol/L）性別[n（%）]男女0.646 0.421

表2 兩組頸動脈內中膜厚度及斑塊形成情況比較

2.3 血脂異常人群頸動脈內中膜厚度與血清基質金屬蛋白酶-9的相關性

血脂異常人群中，左頸動脈內中膜厚度與MMP-9呈正相關（r=0.158，P=0.008）；右頸動脈內中膜厚度與 MMP-9 呈正相關（r=0.164，P=0.007）。

3 討論

頸動脈IMT是指頸動脈內膜內表面至中膜外表面之間的垂直距離，是動脈粥樣硬化的亞臨床標志，與腦血管疾病的發病有關。近年來，大量資料表明，高血脂因素是造成血管壁硬化度明顯增高的首要獨立危險因素。多數研究認為，脂質代謝異常是頸動脈內中膜增厚最重要的危險因素[2-3]。還有研究顯示，隨著血清 TC、LDL-C、載脂蛋白 B、載脂蛋白 B/載脂蛋白AⅠ水平升高，頸動脈內中膜增厚程度也明顯加重[4]。同時研究還指出，高脂血癥與顱外段頸動脈粥樣硬化斑塊形成及狹窄存在顯著的相關性[5]。血脂水平上升以后，直接引起血液黏稠度加大，凝結度增強，從而打破血管中血液層流流動的狀態，血液中的小分子和小顆粒特別容易沉積到血管內壁上，這些沉積物對內皮細胞產生損傷，同時也是血栓形成動脈內中膜增厚的初始原因。許多研究認為，脂質代謝異常是動脈粥樣硬化最重要的危險因素，來自世界各地不同人群的流行病學調查表明，低密度脂蛋白增高是頸動脈粥樣硬化病患者頸動脈內中膜增厚的一個主要原因[6]。因此，為了避免分析頸動脈內中膜增厚與疾病關系時產生混雜，本研究篩選出單純血脂異常（除外高血壓、高血糖及有吸煙史者）和對照組進行分析。

頸動脈超聲檢查是一種無創檢查，它通過檢測頸動脈IMT觀測血管內膜和中層體積的改變，從而反映頸動脈血管壁結構改變。利用超聲技術檢測頸動脈IMT可為心腦血管疾病的早期防治提供依據[7]。頸動脈超聲可以清晰準確地觀察頸動脈血管管腔及各層動脈結構，精確測量IMT，發現和鑒別斑塊形成、管腔狹窄與閉塞等異常情況，為動脈粥樣硬化的預測和診斷提供了重要信息[8-9]。同時，相對其他影像學檢查，頸動脈超聲檢查是一種簡捷、價廉、可重復性高的檢查方法，還具有可以直接顯示血流充盈、檢測血流動力學參數等優勢，因此在臨床上已被廣泛應用。本研究利用頸動脈超聲觀察血脂異常人群頸動脈IMT情況，發現血脂異常患者的頸動脈IMT明顯高于正常人，提示所入選的血脂異常患者可能存在早期動脈粥樣硬化。

在動脈粥樣硬化形成的最早期，循環中血小板和單核細胞黏附于損傷的內皮或內皮下組織，同時釋放大量細胞因子刺激血管壁細胞產生MMPs。MMPs是一組同源的以鋅、鈣依賴的蛋白水解酶，以無活性酶原形式分泌。正常情況下，MMPs可以維持細胞外基質成分的合成與降解保持動態平衡。MMP-9是MMPs的重要成員，主要由成纖維細胞、炎性細胞、心肌細胞等合成與分泌。MMP-9是明膠酶中的一種，參與炎性反應，MMP-9有許多作用底物，如Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅺ型膠原、纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、明膠、彈性蛋白、蛋白聚糖的核心蛋白等，細胞因子及其受體也是MMP-9作用的底物。正常情況下MMP-9處于低表達狀態。MMP-9是降解Ⅳ、Ⅴ型膠原最主要成員之一，當MMP-9酶原被激活后，通過降解細胞外基質，使循環中單核細胞更易進入內膜層，并被激活轉化為巨噬細胞。MMP-9的表達還能促進中膜平滑肌細胞的遷移和增生，從而促進血管重構疾病的形成和發展[10]。MMP-9是通過釋放生長因子和誘導鈣黏素脫落促使β連環蛋白易位至細胞核，充當轉錄因子促進平滑肌增殖。而平滑肌細胞向內膜遷移、增生和轉化，是導致血管內膜增厚和動脈粥樣硬化斑塊形成的重要原因[11]。研究結果顯示，頸動脈IMT增厚與血清MMP-9水平呈正相關[12]。同時，MMP-9的過度表達除了影響細胞基質間的連接和基質重組外還影響管徑。研究結果顯示，隨著動脈狹窄程度的增加，MMP-9在血清中的表達也隨之升高[13]。本研究對血脂異常患者進行血清MMP-9檢測，發現在血脂異常人群中，頸動脈內中膜增厚與血清中MMP-9呈正相關，提示檢測患者血清中的MMP-9升高可以提示動脈內中膜增厚，提示動脈粥樣硬化的形成。研究顯示，增加的MMP-9活性可能是通過轉化生長因子-β的激活來增加膠原沉積[14]。

本研究發現，血脂異常的人群頸動脈內中膜增厚具有臨床意義，頸動脈內中膜增厚是動脈粥樣硬化的早期表現，且其增厚與血清中MMP-9水平呈正相關。由于動脈粥樣硬化是心腦血管疾病的重要致病因素之一，因此，血脂異常的人群應定期行頸動脈超聲檢查，確定頸動脈硬化的程度和范圍，同時檢測MMP-9，為臨床醫生及早發現患者動脈粥樣硬化和判斷硬化程度提供重要信息，有助于臨床醫生制訂合理的調節和防治方案，減少心腦血管疾病的發病率及病死率。

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