血小板微粒在心血管疾病中的研究進展

梁　鵬(綜述)，周新華，陳開祥(審校)

(蚌埠醫學院附屬連云港醫院暨連云港市第二人民醫院急診科，江蘇 連云港 222000)

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血小板微粒在心血管疾病中的研究進展

梁鵬△(綜述)，周新華※，陳開祥(審校)

(蚌埠醫學院附屬連云港醫院暨連云港市第二人民醫院急診科，江蘇 連云港 222000)

摘要：血小板微粒是血小板在活化和凋亡過程中產生的一種微顆粒，其膜上表達有多種活性標志物，使其具有重要的生物學活性。血小板微粒不僅具有很強的促凝活性，而且還有一定的抗凝、抗炎及介導細胞間信息傳遞的作用；其與心血管疾病的發生、發展密切相關，尤其與急性心肌梗死等血栓栓塞性疾病的關系更為密切。隨著對血小板微粒認識的不斷深入，其有可能成為心血管疾病新的診療靶點。

關鍵詞：血小板微粒；心血管疾??；血栓栓塞性疾病

血小板微粒是血小板活化、凋亡等生物學活動時釋放的直徑< 0.5 μm的一類超微膜狀囊泡，于1967年被Wolf[1]發現并描述。研究發現其在健康人的血液中含量很低，但在高凝狀態下含量明顯升高[2]。多項研究[3-8]證實，血小板微粒具有很強的促凝作用，同時在抗凝、炎癥及細胞間的相互聯系中也擔當著重要的角色。隨著研究的不斷深入，其他的生物學性能也將不斷被人們發現并認識。血小板微粒的研究對進一步認識止血的生理病理過程以及心血管疾病，尤其是血栓栓塞性疾病的防治具有重要的臨床意義[3]?，F主要綜述其在心血管疾病中的有關研究及其影響因素。

1血小板微粒

1.1血小板微粒的產生血小板微粒的形成和釋放機制目前尚不是十分清楚，但普遍認為血小板微粒主要通過血小板活化和凋亡兩個途徑產生。血小板激活后，其微管游離端會向膜外延伸，在其周圍形成末端帶有芽狀突起的偽足，這些偽足會穿過纖維蛋白網與相鄰的血小板或纖維蛋白末端連接，此時，偽足末端的芽狀突起脫落，形成的顆粒物質，即為血小板微粒。在血小板凋亡時，通過激活依賴于pho相關的激酶ROCK1，促使血小板膜中肌球蛋白輕鏈的磷酸化和肌動蛋白絲偶聯的斷裂，從而導致膜骨架的重排及出芽，最終產生血小板微粒。

1.2血小板微粒的生物學性能血小板微粒具有重要的生物學性能。①血小板微粒具有促凝作用，血小板微粒是血小板活化過程中產生的，同時其表面也會表達多種受體標志物，而這些受體標志物在病理情況下會顯現促凝活性，產生很強的促凝血作用[4-5]。這些標志物主要是其膜表面的磷脂(主要是磷脂酰絲氨酸)和具有促凝活性的蛋白(如組織因子)，磷脂酰絲氨酸為FⅩa和FⅨa的生成提供了催化表面；研究發現[6]，血小板微粒膜上磷脂酰絲氨酸形成的陰離子磷脂表面，能明顯增強組織因子組裝和催化活性，導致血小板膜釋放更多的凝血酶，這種正反饋引起血小板的減少和血液的高凝狀態。②血小板微粒不僅具有促凝作用還具有一定的抗凝作用，血小板微粒可通過抑制蛋白C激活FVa通路抑制凝血功能。③血小板微粒具有一定的促炎作用，能激活中性粒細胞等炎癥細胞并增強其作用，還能刺激內皮細胞使細胞因子白細胞介素(interleukin,IL)8、IL-6等表達上調，細胞間黏附分子1也明顯增加，臨床研究[7]中也發現風濕性關節炎患者外周血中血小板微粒含量明顯增加，這也有力地說明血小板微粒與炎癥反應存在一定的相關性。④研究表明，血小板微粒作用于不同細胞間能傳遞彼此生物學信號，增強偶聯，形成聚集體，增強其凝血、促炎等活性，并影響不同細胞及因子的生物學功能[8]。

1.3血小板微粒的檢測血小板微粒的檢測方法有以下幾種：①電子顯微鏡觀察法，該方法可直接觀察血小板微粒的內部結構和形態；②放射免疫標記法，該方法復雜繁瑣，且產生射性污染物，已很少應用；③酶聯免疫吸附測定法，該方法可測定大小不一的血小板微粒，但易受可溶性抗原干擾；④流式細胞儀法，該法操作簡單，能準確測定血小板微粒表達的蛋白，為目前經典的檢測方法[9]。因流式細胞儀有局限性，Strasser等[10]提出了酶聯免疫吸附測定聯合依賴磷脂的促凝血凝固試驗來測定血小板微粒的活性，但仍需慎重探究。

2血小板微粒在心血管疾病中的研究進展

2.1血小板微粒與冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(冠心病)冠心病是指冠狀動脈粥樣硬化使血管腔狹窄、堵塞或痙攣引起的心肌缺血缺氧性心臟病，冠狀動脈易損斑塊破裂后形成的血栓是急性冠狀動脈綜合征發生的主要因素。Suades等[11]證實血小板微粒作為一類促凝因子對受損冠狀動脈內血栓形成起一定的作用。

當冠狀動脈的供血不能滿足心肌的需氧量從而引起心肌急劇的、暫時的缺血缺氧時，即可發生心絞痛。心絞痛發作時可有左心室收縮力和收縮速度降低、射血速度減慢、左心室收縮壓下降、心搏量和心排出量降低等病理生理的變化，微觀上也存在著一定的變化如心肌的缺氧、應激、凝血狀況、各種因子的活化等，已研究證實這一病理生理過程有炎性因子及各種活化的血液成分參與[12]。Stepien等[13]對比了12例心肌梗死患者、10例穩定型心絞痛患者以及9例健康對照組的循環血中血小板微粒數、P-選擇素和IL-6水平，發現心肌梗死組的血小板微粒數、P-選擇素和IL-6水平明顯高于穩定型心絞痛組，且兩組均高于對照組，說明炎性因子及血小板微粒參與了斑塊活動。但是關于穩定型心絞痛與不穩定型心絞痛之間血小板微粒是否存在差異，目前研究較少。在我國，根據心絞痛的診斷標準及分類，臨床工作中接診的多為不穩定型心絞痛，穩定型心絞痛的患者分散在醫院以外，知曉率和就診率均非常低，這也許是這一臨床研究受限的一個重要原因。

血小板微粒與凝血、血栓形成有密切關系，而心血管疾病中一個典型的血栓栓塞性疾病就是心肌梗死，本病的發病基礎是炎癥及免疫反應的激活導致易損斑塊的破裂，繼而引起血小板的活化形成血栓[14]。心肌梗死患者血循環內不僅血小板活化數量增加，而且血小板微粒數量也增加，檢測循環中血小板微粒水平可能對易損斑塊的預測及早期識別本病有重要的指導意義[15]。鄧新立等[16]分別對心肌梗死患者服用阿司匹林前和服用阿司匹林24 h后的血樣本進行研究，以20 μmol/L ADP為激活劑檢測血小板微粒表達的血小板激活復合物-1和CD62P水平，結果與正常對照組比較差異有統計學意義，說明心肌梗死與血小板微粒有一定的關聯性。不僅如此，Porto等[17]還對ST段抬高型心肌梗死患者外周循環的血小板微粒水平和冠狀動脈局部的血小板微粒水平作一比較，此外還檢測了冠狀動脈血栓溶解后的心肌梗死溶栓(thrombolysis in myocardial infarction，TIMI)血流分級、校正的TIMI分級、血栓分級、心肌顯色分級及90 min ST段回落幅度，結果提示局部的血小板微粒水平顯著高于外周循環，并且與血流TIMI分級、校正的TIMI分級、心肌顯色分級及90 min ST段回落幅度呈負相關，與血栓分級呈正相關；這個試驗更加有力地說明血小板微粒與ST段抬高型心肌梗死冠狀動脈血栓的關系密切，特別是與微血栓的關系。血小板微粒水平與心肌顯色分級、定量評估具有相關性，也提示血小板微粒可能與急性心肌梗死的梗死面積有關，但是Jung等[18]在其試驗中以CD31+/CD42-微粒代表血小板微粒，對急性心肌梗死后1周的患者采用冠狀動脈MRI檢查評估梗死面積，試驗結果得出兩者并不具有相關性，這一假說未得到證實。

2.2血小板微粒與高血壓由于交感神經系統亢進、鈉水潴留、腎素-血管緊張素-醛固酮系統的激活、細胞膜離子通道轉運異常、胰島素抵抗等引起血壓的升高，長期高血壓引起的全身小動脈痙攣硬化，包括管壁的增粗、管腔的狹窄，以及會出現微血管的扭曲變形，順應性降低等，這些改變都可能增加血小板的活化，導致血小板微粒水平的動態改變。趙燕等[19-20]采用流式細胞儀及單克隆抗體標記的方法檢測了60例高血壓患者和20例健康對照組的血循環中血小板膜表面糖蛋白CD62P、血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa進行檢測，以20 μmol/L ADP為激活劑，結果顯示高血壓組膜蛋白的百分率顯著高于對照組。此外他們還研究了阿司匹林、氯吡格雷、阿托伐他汀對高血壓患者血小板微粒的影響，發現其均可有效地降低血小板微粒的水平。

2.3血小板微粒與心房顫動心房顫動是臨床最常見的心律失常之一，心房顫動發生的機制也有頗為豐富的研究。血小板微粒是否參與目前尚不清楚，心房顫動時的高心室率、低射血分數以及低氧、炎癥、氧化應激等都能引起血小板的活化和凋亡，從而導致血小板微粒的釋放，血小板微粒放大了促凝作用，也增強細胞微粒間的黏附聚集，這可能也是心房顫動患者易形成血栓的機制之一。Choudhury等[21]對70例心房顫動患者進行研究，發現心房顫動患者循環內血小板微粒水平高于健康對照組。Wang等[22]利用AD-1單克隆抗體酶聯免疫吸附測定方法檢測90例中國兒童循環血中微粒水平，還檢測IL-1β、P-選擇素等指標，這些兒童分為持續性非瓣膜心房顫動、陣發性非瓣膜心房顫動和健康對照組，試驗結果顯示這些檢測指標在心房顫動組均較對照組升高，差異有統計學意義，IL-1β與P-選擇素的檢測結果經過統計學分析具有相關性，這說明在非瓣膜性心房顫動中炎性因子參與血小板的活化。

2.4血小板微粒與心臟瓣膜病血小板微粒與心臟瓣膜病可能也有關聯。Azzam和Zagloul[23]對20例伴有心房顫動的風濕性二尖瓣狹窄患者進行了研究，發現二尖瓣狹窄患者循環中血小板微粒水平顯著高于健康對照組，雖然這些患者伴有的心房顫動會引起血小板微粒水平的升高，但是研究中還發現，血小板微粒水平與二尖瓣狹窄的嚴重程度呈正相關,提示了血小板微粒與風濕性二尖瓣狹窄有關聯，但血小板微粒是否與所有類型的心臟瓣膜病有關還有待更多的專家學者探討研究。

2.5血小板微粒與先天性心臟病先天性心臟病的患者長期處于血流動力學紊亂的狀態，致肺循環的血容量增大，肺毛細血管壓力升高、內皮破壞、再生等，血流動力學的改變引起血流剪切力的增加使血液中的微成分更易被激活。Ismail和Youssef[24]對53例先天性心臟患兒和30例健康兒童血液中的微成分經行檢測，其中先天性心臟病的患兒中23例為紫紺型，30例為非紫紺型，研究結果顯示，紫紺組血友病因子抗體、血紅蛋白、血細胞比容和D-二聚體的水平明顯高于非紫紺組；紫紺組血小板微粒和P-選擇素的表達高于非紫紺組并且均高于對照組，血小板微粒水平與血細胞比容具有正相關性；但是紫紺組血小板計數、聚集、血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa的表達比非紫紺組下降，血小板聚集與血細胞比容呈負相關。這一試驗結果提示血小板微粒水平增高和血小板活化低聚集參與了先天性心臟病患者的異常凝血。血小板微粒多為血小板活化、凋亡產生的，多作為血小板活化的標準，并且具有增強其聚集性的作用，而本研究中血小板高活化低聚集的狀態如何解釋，這其中的機制還需要更多學者參與研究。

3血小板微粒與經皮冠狀動脈介入術

經皮冠狀動脈介入(percutaneous coronary intervention，PCI)術目前是治療冠心病病變血管狹窄或堵塞的主要手段之一，能對病變血管進行診斷加治療是其重要特點，極大地改善了患者的預后。但是通過冠狀動脈造影置入支架后，被激活的血小板能高表達多種表位，這些表位能使血小板與白細胞、內皮細胞之間形成聚集性，形成更多的血小板微粒，增強促凝、炎癥等作用，而這些過程最終導致PCI術后亞急性血栓的形成，有研究也提示血小板微粒參與了血管的再堵塞[25]。Nagy等[26]對比了裸支架植入組手術早期(支架置入15 min)和單純的冠狀動脈造影檢查組的血小板微粒水平，且支架置入組患者術前已服用阿司匹林抗血小板藥物進行預處理，結果顯示支架置入組血小板微粒水平顯著升高。Biasucci等[27]也發現PCI術后循環中血小板微粒水平較術前升高。這兩個試驗結果提示血小板微?？梢栽谝欢ǔ潭壬献鳛榉从砅CI術后血小板活化的指標。那么回歸到臨床實踐，這一指標雖然可在一定程度上反映PCI術后血小板的活化，但與PCI術后血栓的形成、無復流的發生是否一定具有相關性，能否作為PCI術后血流分級的預測指標和無復流發生風險的評估指標，還有待更多的研究。

4小結

血小板微粒由血小板活化或凋亡時產生，具有重要的生物學作用。在心血管方面，血小板微粒在該領域多種疾病中的作用也在不斷地被發現，特別是在血栓栓塞性疾病方面，但其具體的作用機制仍不是十分清楚；抑制血小板微粒的形成可能成為治療某些心血管疾病的新策略，但需要更多的循證醫學證據支持；相信針對血小板微粒的深入研究，將為心血管疾病尤其是血栓栓塞性疾病的特異性治療及預防提供更多的理論依據。

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The Research Development of Platelet Microparticle in Cardiovascular DiseaseLIANGPeng,ZHOUXin-hua,CHENKai-xiang.(DepartmentofEmergency,theAffiliatedLianyungangHospitalofBengbuMedicalCollege，theSecondPeople′sHospitalofLianyungang,Lianyungang222000,China)

Abstract:Platelet microparticle is generated with the activation and apoptosis of platelet,the membrane of which has a variety of active markers，rendering important biological activities.The microparticle not only has strong procoagulating character,but also anticoagulating,anti-inflammatory and mediatiing information transmission between cells.It′s closely related to cardiovascular diseases,especially with acute myocardial infarction and other thromboembolic diseases.With the deepening of understanding of platelet microparticles,it′s expected to become a new diagnostic and therapeutic target for cardiovascular diseases.

Key words:Platelet microparticle； Cardiovascular diseases； Thromboembolic disease

收稿日期：2014-10-16修回日期：2014-12-25編輯：相丹峰

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.13.014

中圖分類號：R541.4

文獻標識碼：A

文章編號：1006-2084(2015)13-2340-04