分析循環內皮細胞與CRP對2型糖尿病合并冠心病的診斷價值

張養華

鄒城市人民醫院檢驗科，山東鄒城 273500

分析循環內皮細胞與CRP對2型糖尿病合并冠心病的診斷價值

張養華

鄒城市人民醫院檢驗科，山東鄒城 273500

目的對2型糖尿病合并冠心病患者血清CRP與循環內皮細胞水平進行研究，分析循環內皮細胞與CRP對2型糖尿病合并冠心病患者診斷價值。方法對2012年1月—2014年6月該院收治的35例2型糖尿病合并冠心病患者進行研究，以35例不合并糖尿病的冠心病患者以及31例健康體檢者作為對照，對患者的外周血循環內皮細胞數量以及血清CRP水平進行測定。結果3組中2型糖尿病合并冠心病組CEC含量及CRP水平最高，單純冠心病組次之，而健康對照組CEC含量最低，P＜0.05。結論血管病變是糖尿病慢性并發癥之一,血管內皮損傷導致糖尿病血管病變，極易累及冠狀動脈，檢測CRP和CEC的聯合動態，不僅有利于診斷糖尿病合并冠心病，還可以指導干預炎癥反應和內皮細胞保護劑的使用等臨床綜合治療手段，以降低并防止心腦血管并發癥的發生。

糖尿病；冠心病；循環內皮細胞；C反應蛋白

2 型糖尿病作為一種全身代謝性疾病，其中一個慢性并發癥就是血管病變。血管病變對患者的壽命和生存質量有嚴重的影響[1],經常伴隨有微血管和大血管病變，容易累及冠狀動脈。2型糖尿病患者的冠心病發病率要高于正常人2～4倍，因為冠心病而引發的死亡在糖尿病患者中占75%，C反應蛋白（CRP），是一類炎癥標志物，且已經被證實可以在健康人群中作為發生未來冠狀動脈事件的檢測指標。通過循環內皮細胞（CEC）數量的改變可以直接判斷血管內皮的損傷。該研究通過觀測2型糖尿病合并冠心病患者的血清CRP以及外周血循環內皮細胞數量的改變與2型糖尿病合并冠心病患者的相關性，探討其在微血管病變的發病機制中的作用以及意義，選取該院2012年1月—2014年6月期間收治的35例2型糖尿病合并冠心病患者為研究對象，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院收治的2型糖尿病合并冠心病患者35例，男19例，女16例，年齡43～74歲，平均（53.7±11.5）歲，其中15例為穩定性心絞痛，7例為陳舊性心肌梗死，14例為不穩定性心絞痛。單獨患有冠心病的組35例，其中男20，女15例，年齡44～75歲，平均（54.1±12.1）歲，其中13例為穩定心絞痛，8例為陳舊性心肌梗死，14例為穩定心絞痛。健康對照組31例，男16例，女15例，年齡45～73歲，平均（53.9±12.5）歲。

1.2 CEC鑒定

首先配制密度為1.050(35%)的percoll液，把采集來的每份靜脈血均勻混合，然后用相同量的生理鹽水進行稀釋后備用，在每支試管內注入35%percoll液2 mL,將稀釋后的靜脈血沿管壁緩慢鋪于35%percoll液上,離心后,吸取上層和中層液1 mL于小試管內,將小試管離心后棄上清,并于每個小試管加生理鹽水0.5 mL震蕩混勻即得細胞懸液。等CEC懸液離心后，再選取沉淀制成圖片，風干后利用冷乙醇進行固定，最后通過免疫組織化學法檢測，用CD34把特異的內皮細胞標記出來。CD34的染色結果表面特異的內皮細胞在胞漿和胞膜有標記，顏色變為棕黃色，進一步的還可以證明被標記的細胞是內皮細胞。

1.3 CRP測定

通過免疫散射速率比濁法可以進行CRP測定，具體過程是通過全進口試劑全自動特種蛋白分析儀來完成的。

1.4 統計方法

2 結果

不同組別的CEC含量2型糖尿病合并冠心病組的35例患者中CEC含量為（8.5±2.3）個/0.9 uL，單純冠心病組35例為（7.1±3.2)個/0.9 uL，對照組31例為（3.5±2.1）個/0.9 uL。2型糖尿病合并冠心病組CEC含量最高，單純冠心病組次之，健康對照組CEC含量最低，3組之間CEC含量經統計學處理，差異有統計學意義（P＜0.05）。

不同組別CRP水平2型糖尿病合并冠心病組的35例患者中CRP水平為（6.4±2.1）mg/L，單純冠心病組35例為（4.7±1.9）mg/L，對照組31例為（2.3±1.3）mg/L。2型糖尿病合并冠心病組CRP水平最高，單純冠心病組次之，健康對照組CRP水平最低，3組之間CRP水平經統計學處理，差異有統計學意義（P＜0.05）。

3 討論

循環內皮細胞計數是目前評價血管損傷的惟一、特異而且直接的指標[2]。來源于血管內皮細胞。血管EC的新陳代謝會產生一些循環內皮細胞，在病理情況下使CEC的數目稍微增加，從而直接表現為EC的脫落性損傷。在研究過程中發現，與對照組相比，糖尿病合并冠心病患者的CEC數量較高，且外周血CEC數目的增加直接導致了血管內皮損傷，其一方面是促使冠心病的主要因素，其更為主要的是可能與長期高血糖因素有關。在高糖狀態下，內皮細胞膜上的特異受體與糖化終末端產物相結合，引發了內皮細胞的氧化應激，形成氧自由基，造成內皮細胞損傷，具體表現為內皮細胞的恢復延遲、增值周期延長，從而出現細胞凋亡。另外高血糖還會增加抑制內皮細胞增殖的各類血清蛋白的敏感度，從而使CEC增高。現階段的一些研究中認為高血糖本身并不會造成糖尿病血管損傷，而是通過胰島素抵抗（IR）的胰島素血癥所引起的。內皮細胞損傷之后可以激活血小板和血凝系統，形成微血栓，完全的釋放內皮素和血管生物活性等物質，從而影響血流動力和血管張力，破壞血管屏障，增加血管內皮的通透性，形成一系列的病理改變。以上所示均是因為內皮細胞的改變而造成的糖尿病微血管病變的原因。該研究資料顯示2型糖尿病合并冠心病組CEC含量最高，而健康對照組CEC含量最低。

C反應蛋白是以白細胞介素－6為主的細胞因子刺激肝細胞所分泌的一種非糖基化聚合蛋白，機體組織受到損傷或發生炎癥時C反應蛋白可增高[3]。胰島素抵抗和炎癥反應呈正相關關系。2型糖尿病是由于免疫性疾病以及各種因子介導的炎癥反應，和體內的炎癥有關，是2型糖尿病發病機制的一個媒介。相關研究表明，CRP是一種在細胞因子和所有炎癥介質中預測未來心血管危險的重要炎癥標志物。通告該研究發現，在糖尿病合并冠心病患者的體內存在明顯的慢性炎癥，而引起升高的原因可能是胰島素抵抗導致各種分泌物的增加，這就導致了肝臟內的CRP增加，同時動脈樣硬化也會伴有炎癥，這些炎癥的出現也會導致CRP水平升高。已發現CRP在新發現或已診斷為糖尿病的患者中含量明顯增加，而在僅空腹血糖異常或非糖尿病中含量一般正常[4]。該研究資料顯示2型糖尿病合并冠心病組CRP水平最高，健康對照組CRP水平最低。

冠心病的一個重要發病因素就是糖尿病，在現階段已引起國內外學者的高度重視。而且糖尿病的并發癥還有很多，包括大血管、小血管和微血管病變，這也是導致糖尿病致殘、致死的最重要的原因，冠狀動脈病變是2型糖尿病的常見并發癥。通過該研究發現2型糖尿病合并冠心病患者CEC數量和CRP水平呈現出正相關的關系。CRP可以在一定程度上影響血管內皮功能。高血糖可以刺激胰島細胞產生白介素-6，該物質可以促進肝臟CRP的產生，使血管內皮縮血管物質進行釋放，增加內皮細胞的通透性，使血管內皮細胞受到的損害進一步增強，導致CEC數量增加。CRP還可以增加和血管內皮細胞相粘附的蛋白質基因的表達，使血管內皮的功能受到更加嚴重的損害，也就進一步形成動脈粥樣硬化。CRP和CEC還可以影響糖尿病合并冠心病患者血管內皮損失，其二者的協同作用可能在血管病變之中有重要的影響，對CEC和CRP的聯合動態檢測不僅有利于診斷糖尿病合并冠心病，還可指導預炎癥反應和使用內皮細胞保護劑等臨床綜合治療手段，以預防以及減少心腦血管并發癥。

[1]胡智,劉英明.伐他汀對2型糖尿病患者血管內皮細胞的保護作用研究[J].實用心腦肺血管病雜志，2010,18(2):115.

[2]孔令希,陳建權,陳玉芹,等.停用不同劑量辛伐他汀片對糖尿病腦梗死患者血管內皮功能及血清循環內皮細胞計數的影響[J].河北中醫, 2014,36(5):795.

[3]黃銀娥.血清超敏C-反應蛋白與糖尿病并發腦血管意外的相關性研究[J].2013,26(4):229-230.

[4]Ford ES.Body mass index，diabetes，and C－reactive proteinamong U.S. adults[J].Diabetes Care，1999,22（12）：1971.

R587.1 [文獻標識碼]A [文章編號]1672-4062（2015）01（a）－0053-02

張養華（1974-），女，山東鄒城人，本科，主管技師，主要從事臨床檢驗工作。

2014-10-08）