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中草藥制劑對熱應激奶牛泌乳性能、抗氧化能力及免疫功能的影響

2015-02-23 01:50:33胡永靈葉世莉羅佳捷
草業學報 2015年1期
關鍵詞:中草藥水平

胡永靈,葉世莉,羅佳捷

(1.湖南環境生物職業技術學院,湖南衡陽421005;2.衡陽市富礦飼料添加劑公司,湖南衡陽421004;3.湖南農業大學動物科學技術學院,湖南長沙410128)

中草藥制劑對熱應激奶牛泌乳性能、抗氧化能力及免疫功能的影響

胡永靈1*,葉世莉2,羅佳捷3

(1.湖南環境生物職業技術學院,湖南衡陽421005;2.衡陽市富礦飼料添加劑公司,湖南衡陽421004;3.湖南農業大學動物科學技術學院,湖南長沙410128)

為探討復合中草藥制劑對熱應激奶牛泌乳性能、抗氧化能力及免疫功能的影響,選擇產奶中后期的健康中國荷斯坦奶牛20頭,按泌乳時間和產奶量相近的原則均分為A、B、C和D 4組。A組為對照組,飼喂基礎日糧;B、C和D組分別在每頭牛的基礎日糧中添加50,100和150 g/d水平的復合中草藥制劑。每天測定產奶量,在試驗的第1(添加復合中草藥制劑之前)、20和40天逐頭采集血樣,測定不同劑量復合中草藥制劑對熱應激奶牛血淋巴細胞凋亡率、血液抗氧化酶GSH-Px、CAT基因及血淋巴細胞凋亡相關基因Bcl-2、p53表達水平的影響。結果表明,B、C和D組的日產奶量較對照組分別提高了20.26%(P<0.05),24.20%(P<0.05)和16.98%(P>0.05);乳中體細胞數較對照組分別降低了21.68%(P<0.05),29.88%(P<0.05)和24.22%(P<0.05);奶牛血液抗氧化酶GSH-Px、CAT基因的表達水平分別比對照組提高了5.00%(P>0.05),13.00%(P<0.05),6.00%(P>0.05)和5.00%(P>0.05),16.00%(P<0.05),3.00%(P>0.05);奶牛血淋巴細胞平均凋亡率分別比A組降低了18.20%(P>0.05),17.86%(P>0.05)和12.51%(P>0.05);奶牛血淋巴細胞Bcl-2在20,40 d時均極顯著高于A組,全期的平均水平分別比對照組高出105.00%(P>0.05),113.00%(P>0.05)和57.00%(P>0.05);p53基因的表達水平在20,40 d時均極顯著低于A組,全期的平均水平分別比對照組降低了24.00%(P>0.05),28.00%(P>0.05)和20.00%(P>0.05)。試驗組中,C組奶牛的日產奶量、體細胞數、血液抗氧化酶活性、淋巴細胞凋亡相關基因表達等指標要優于B、D組;而血液淋巴細胞凋亡率指標為B組最好。說明復合中草藥制劑能有效改善熱應激奶牛的泌乳性能、抗氧化能力及免疫功能,且在本試驗條件下,每頭牛日糧中添加100 g/d水平的效果要優于50及150 g/d水平。

奶牛;中草藥;泌乳性能;抗氧化能力;免疫功能

奶牛養殖是我國畜牧業生產中的一個重要組成板塊,飼料營養與配制、生產環境是健康優質奶源的重要保障。近年來我國學者們在通過調整飼料組合、調制方法等來提高奶牛的生產性能等方面進行了大量的研究,也取得了豐碩的成果[1-3]。生產環境的變化特別是我國夏季炎熱高溫是一個普遍現象,當牛舍的溫濕指數(THI)大于72時,奶牛便處于熱應激狀態[4],而熱應激對奶牛的生產性能、繁殖性能及免疫性能等方面均有非常不利的影響[5-7],因此,探索減少或緩解熱應激的途徑一直是奶牛飼養業特別是南方奶牛飼養業的重大課題之一。天然中草藥是我國民間傳統瑰寶,其中一部分具有消炎、補充營養、改善機體免疫狀態、促進生長和提高飼料轉化率等多種功效,由于它無抗藥性和耐藥性,無藥物殘留和不良反應少,在畜禽養殖方面顯示出獨特的優勢[8]。近年來,有關學者對中草藥制劑在奶牛抗熱應激[9-12]、改善奶牛抗氧化性能[13-14]及免疫性能[15-16]等方面的作用效果進行了初步研究,但欠深入。有研究指出,人體抑癌基因(p 53)能通過促進機體細胞凋亡來削弱機體抗應激的能力[17],而抗細胞凋亡的B淋巴細胞瘤-2基因(Bcl-2)能有效提高機體對抗熱應激的能力[18];谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、過氧化氫酶(catalase,CAT)與超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)均是生物機體內重要的抗氧化酶,在清除自由基、H2O2和過氧化物以及減少羥基自由基形成等方面發揮著十分重要的作用[19-20],而中草藥制劑對奶牛體內抗氧化酶、細胞凋亡相關基因表達及淋巴細胞凋亡率的影響尚未見報道。本研究擬探索復合中草藥制劑對奶牛體內GSH-Px、CAT、Bcl-2、p53基因表達及淋巴細胞凋亡率的影響,為揭示中草藥制劑調控奶牛抗熱應激機理的理論研究及其在奶業安全生產中的應用提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗時間和地點

試驗在湖南省畜牧獸醫研究所奶牛原種場進行,試驗期為2013年6月7日至7月16日,其中,前7 d為預飼期。

1.2 中草藥添加劑的制備

由衡陽市某飼料添加劑有限公司研制生產并提供。根據中醫藥理論,選用具有清熱解暑、涼血解毒、益氣養陰、加強免疫機能的中藥材進行組方,包括王不留行、山藥、何首烏、益母草、山楂、澤瀉、菟絲子、蛇床子、漏蘆、白芍、烏藥和黃芪等,以我國中醫藥傳統的炮制方法為基礎,采用發酵工藝與現代微納米技術及工藝,將其制成3~5μm直徑顆粒的復合中草藥制劑。

1.3 試驗動物的選擇、分組及試驗設計

根據奶牛的產奶量和泌乳時間相近的原則選取20頭健康的泌乳中后期中國荷斯坦奶牛,隨機均分成A、B、C和D 4組,每組5個重復,每個重復1頭牛。A組為對照組,飼喂基礎日糧;B、C和D組分別在每頭牛的基礎日糧中添加50、100和150 g/d水平的中草藥制劑,預飼7 d,正式試驗期33 d。分組及處理見表1。

1.4 試驗日糧及飼養管理

奶牛基礎日糧及飼喂量主要為青貯玉米秸稈15 g/d、矮象草10 kg/d、啤酒糟8 kg/d及配合精料4 kg/d,精料參照《奶牛營養需要》(第7版)[21]配制,配方及營養成分見表2。試驗奶牛集中在一棟欄舍飼養,統一管理。試驗期間每天分別在5:30和15:00喂料,6:00和17:30擠奶,自由飲水,夜間運動場放牧。中草藥添加劑在喂料時添加至精料中,攪拌均勻;預試期前3 d添加量為正式期的1/3,后4 d為2/3。

1.5 環境溫濕度及產奶性能測定

在牛舍內兩側牛床上方距地面1.5 m高處懸掛溫濕度計,試驗期間每天于5:30和14:00記錄溫度和相對濕度,并計算溫濕指數。采用全封閉魚骨式擠奶廳系統流量計記錄每頭牛每天的產奶量;試驗結束時,按6∶4比例收集早、晚兩次奶樣,混合后用于測定乳脂率、乳蛋白率、體細胞數,在上海奶牛生產測定中心實驗室用全自動乳成分儀(丹麥,FOSS)測定。

1.6 采樣

在試驗期的第1,20和40天分別從供試奶牛的頸靜脈采血。每頭牛每次采血約為40 m L,分裝成4管(每管10 m L),用肝素鈉抗凝全血,其中2管馬上用牛淋巴細胞分離液(北京索萊寶公司)分離淋巴細胞,用凍存液懸浮后放入液氮保存。

1.7 基因表達分析

1.7.1 引物設計及合成 基因表達分析采用熒光定量RT-PCR法,根據網上(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)發表的基因序列,以Beta-actin m RNA作內參,根據GenBank中奶牛的GSH-Px、CAT、Bcl-2、p 53和Beta-actin的基因登陸序列(依次為NM001035386、NM174077、BTU92434、BC102440.1和BC142413),用Primer Premier 5.0軟件設計引物(表3)。引物均由上海生工生物工程技術服務有限公司合成。

1.7.2 血液總RNA及淋巴細胞RNA的提取 血液淋巴細胞用北京索萊寶科技有限公司生產的淋巴細胞分離液進行提取;總RNA的提取采用日本基因株式會社的ISOGEN-LS總RNA抽提試劑盒,并按其說明書操作。所有過程均在無菌操作臺上進行。

1.7.3 反轉錄cDNA 采用Revert Aid TM First Strand cDNA Systhesis Kit反轉錄試劑盒,按試劑盒說明書操作。

1.7.4 cDNA的RT-PCR反應體系 GSHPx、CAT、Bcl-2和p 53的熒光定量RT-PCR反應體系各成分及加樣量見表4。反應條件為:95℃預變性1 min,進行如下循環:95℃15 s,60℃15 s,72℃45 s;35個循環后,72℃延伸7 min,4℃保存。

1.7.5 RT-PCR產物的檢測與相對定量所得產物用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測條帶,條件為:90 V,60 min,凝膠電泳成像系統成像,以50 bp Marker作對照檢驗目標條帶大小是否與β-actin產物大小相同。本試驗中將cDNA樣品進行1,5,25,125,625,3125倍稀釋,對目的基因和內參基因進行PCR擴增,以cDNA稀釋倍數取對數值為橫坐標,△Ct值為縱坐標作圖,得到回歸線Y=0.0629X+6.058,R2=0.55,曲線斜率為0.0629,說明目的基因和內參基因擴增效率基本一致,可以用2-△△Ct法計算本試驗中基因相對表達量,即以對照組基因表達量為1倍,處理組表達量為相對于對照組的表達倍數。

1.8 淋巴細胞凋亡率的測定

將凍存的細胞放入水浴鍋(37℃)迅速解凍,1500 r/min離心10 min,吸除上清,加入1 m L冰浴預冷的磷酸鹽緩沖液(phosphate buffer solution,PBS)重懸細胞并轉移至1.5 m L離心管,再次離心并吸除上清,加入1 m L冰浴預冷的70%濃度的乙醇,反復吹打以避免細胞成團,固定24 h后離心并棄去上清,加入1 m L冰浴預冷的PBS重懸細胞,再次離心并吸除上清,加入0.5 m L碘化丙啶染色液(碧云天生物技術研究所)37℃避光孵育30 min后上流式細胞儀(Beckman Coulter,EPICS XL/-MCL)檢測。

1.9 數據處理與統計分析

數據用Excel進行初步處理后,再使用SPSS 17.0統計軟件進行成對樣本差異顯著性檢驗,結果用平均值±標準誤表示,檢驗誤差為5%和1%水平。

2 結果與分析

2.1 復合中草藥制劑對奶牛產奶性能的影響

由表5可知,不同劑量復合中草藥制劑的添加對于維持奶牛的產奶量具有明顯的效果,雖然整體產奶量均較試驗開始前有所下降,但3個試驗組奶牛的產奶量分別比對照組高出20.26%(P<0.05),24.20%(P<0.05)和16.98%(P>0.05),其中,B、C組達到顯著水平;復合中草藥制劑對乳脂率和乳蛋白率的影響不顯著(P>0.05),但對乳中體細胞數影響顯著,B、C和D組分別較對照組降低了21.68%(P<0.05),29.88%(P<0.05)和24.22%(P<0.05)。

2.2 復合中草藥制劑對奶牛血液抗氧化酶基因表達水平的影響

由表6可知,在添加復合中草藥制劑之前,各組奶牛血液GSH-Px基因的表達水平之間不存在顯著差異,添加了復合中草藥制劑之后,各試驗組奶牛血液GSH-Px基因的表達水平均呈現出上升的趨勢,3個試驗組在第20和40天時的表達水平較對照組分別高出6.00%(P>0.05),15.00%(P>0.05),4.00%(P>0.05)和10.00%(P>0.05),22.00%(P<0.05),10.00%(P>0.05),其中C組在第40天時的漲幅達到顯著水平;從整個試驗期的平均水平來看,3個試驗組比對照組分別高出5.00%(P>0.05),13.00%(P<0.05)和6.00%(P>0.05),C組達到顯著水平。說明復合中草藥制劑能有效提高熱應激奶牛血液抗氧化酶GSH-Px基因的表達水平。

各組奶牛血液CAT基因的表達水平在添加復合中草藥制劑前不存在顯著差異(表6)。在試驗的第20和40天,3個試驗組奶牛血液CAT基因的表達水平較對照組分別升高了8.00%(P>0.05),20.00%(P>0.05),4.00%(P>0.05)和9.00%(P>0.05),26.00%(P<0.05),6.00%(P>0.05),其中,C組在第40天時及全期的增幅達到顯著水平。從全期的平均水平來看,3個試驗組的漲幅分別達到5.00%(P>0.05),16.00%(P<0.05)和3.00%(P>0.05),C組與對照組之間存在顯著差異。說明復合中草藥制劑在提高熱應激奶牛血液抗氧化酶CAT基因的表達水平方面具有明顯的效果。

2.3 復合中草藥制劑對奶牛血液淋巴細胞凋亡率及其相關基因表達水平的影響

由表7可知,各組奶牛血淋巴細胞凋亡率在試驗開始之前不存在顯著差異,添加復合中草藥制劑之后,B、C組奶牛在第20天時的血淋巴細胞凋亡率較對照組顯著降低,降幅分別達到21.01%(P<0.05)和23.64%(P<0.05),到第40天時,3個試驗組奶牛的血淋巴細胞凋亡率較對照組分別降低了27.45%(P<0.01),27.36%(P<0.01)和24.55%(P<0.01),均達到極顯著水平;就整個試驗期而言,3個試驗組奶牛的血淋巴細胞凋亡率較對照組分別降低了18.20%(P>0.05),17.86%(P>0.05)和12.51%(P>0.05)。該結果表明復合中草藥制劑能有效降低熱應激奶牛外周血淋巴細胞的凋亡率。

各組奶牛血淋巴細胞Bcl-2基因表達水平在試驗開始之前不存在顯著差異(表8)。添加復合中草藥制劑后,3個試驗組奶牛血淋巴細胞Bcl-2基因的表達水平較對照組相比均有不同程度的降低,其中,B、C組在第20及3個試驗組在第40天時的增幅均達到極顯著水平(P<0.01),D組在第20天時的增幅也達到顯著水平(P<0.05),從整個試驗期的平均水平來看,B、C和D組較對照組的增幅分別達到105.00%(P<0.01),113.00%(P<0.01)和57.00%(P>0.05)。結果說明復合中草藥制劑對熱應激奶牛血淋巴細胞Bcl-2基因表達水平的影響非常顯著。

各組奶牛血淋巴細胞p 53基因的表達水平在添加復合中草藥制劑之前不存在顯著差異。試驗開始之后,B、C和D組在第20和40天時較對照組的降幅均達到極顯著水平(P<0.01),就整個試驗期的平均水平來看,3個試驗組較對照組分別降低了24.00%(P>0.05),28.00%(P>0.05)和20.00%(P>0.05)。說明復合中草藥制劑的添加能有效降低熱應激奶牛血淋巴細胞p53基因的表達水平。

3 討論

3.1 復合中草藥制劑對熱應激奶牛生產性能的影響

奶牛受熱應激的影響,直腸溫度、呼吸頻率和脈搏等3項生理常數指標均會顯著升高,這直接影響到奶牛的采食量,并最終導致產奶量的顯著下降[22]。在本研究中,測定的牛舍溫濕指數在整個試驗期一直大于72,說明奶牛一直處于熱應激狀態,各組奶牛的產奶量較試驗開始前也出現了不同程度的降低,其中,對照組的降幅達到30.42%,而復合中草藥制劑的添加對維持奶牛的產奶量表現出一定的效果,3個試驗組奶牛的產奶量較對照組分別高出了20.26%、24.20%和16.98%,這可能是由于復合中草藥制劑對奶牛熱應激有較好的緩解作用[23],能有效清除熱應激產生的過量自由基[24],增強奶牛機體抗氧化功能,進而提高采食量,改善奶牛的產奶性能。其中,B、C組的乳蛋白率和B、D組的乳脂率較對照組有所降低,但由于日產奶量的提高幅度較大,因此,總的乳脂產量和乳蛋白產量仍然較對照組有明顯的升高;但D組的乳脂率和C組的乳蛋白率又較對照組有所提高,這可能是因為奶牛個體之間的差異以及奶牛在熱應激條件下自行選擇采食的日糧結構組成存在差異,比如青飼料和精料的比例不同。另外,3個試驗組奶牛乳中體細胞數較對照組分別降低了21.68%、29.88%和24.22%,說明復合中草藥制劑能對熱應激奶牛起到一定的保健作用,增強機體的免疫能力,抑制炎癥的發生。

3.2 復合中草藥制劑對熱應激奶牛血液抗氧化酶基因表達水平的影響

基于抗氧化酶GSH-Px和CAT對機體抗氧化應激的重要性,本研究探索了復合中草藥制劑對熱應激奶牛血液GSH-Px和CAT基因表達的影響。GSH-Px、SOD和CAT一起構成了生物體內活性氧防御系統,機體對活性氧O2-的第1道防線是SOD,它將O2-轉化為過氧化氫和其他氫過氧化物;第2道防線是CAT和GSH-Px,其中CAT可清除過氧體系中的H2O2,而GSH-Px分布在細胞的胞液和線粒體中,可同時清除H2O2和氫過氧化物,從而有效地保護機體[25]。前人的研究表明,自由基數量的減少等能增強GSH-Px、SOD和CAT等抗氧化酶基因的表達水平,進而阻斷脂質過氧化鏈式反應,緩解膜脂質過氧化,提高機體抗氧化應激能力并減少細胞的損傷[26]。在本研究中,復合中草藥制劑的添加顯著提高了熱應激奶牛血液GSH-Px和CAT基因的表達水平,說明奶牛的抗氧化能力得到了顯著提高。這是由于復合中草藥制劑中富含黃酮類、多酚類和鞣質類化合物,黃酮類物質能通過酚羥基與自由基生成穩定的半醒自由基,通過抗氧化劑的還原作用直接給出電子而清除自由基;多酚類化合物是極好的氫或電子供體,結構穩定,不會引發新的游離基或者由于鏈反應而被迅速氧化,所以有很好的抗氧化效果;而鞣質類物質的抗氧化性主要體現在其通過還原反應降低環境中氧含量,或作為氫供體與環境中自由基結合,終止自由基引發的連鎖反應[24]。復合中草藥制劑中的抗氧化類化合物共同作用,促進過量自由基的清除,提高抗氧化酶基因的表達水平,并最終改善奶牛機體的抗氧化能力。

3.3 復合中草藥制劑對熱應激奶牛血淋巴細胞凋亡率及其相關基因表達水平的影響

有研究表明,熱應激能顯著增加奶牛[27-28]和藏獒[29]外周血淋巴細胞的凋亡率,但在熱應激初期奶牛具有一定的自身調節能力來減弱熱應激反應[30]。在本研究中,試驗期的奶牛一直處于熱應激狀態下,熱應激對奶牛淋巴細胞造成了極大的損傷,對照組奶牛在試驗第20和40天時的淋巴細胞凋亡率分別比試驗開始前升高了101.96%和116.11%,3個試驗組奶牛的淋巴細胞凋亡率也較試驗開始前有所升高,但復合中草藥制劑的添加對于降低淋巴細胞的損傷還是表現出了顯著的效果,凋亡率的平均水平較對照組分別降低了18.20%,17.86%和12.51%。Bcl-2是動物機體內重要的抗凋亡基因,能夠有效延長細胞周期[31];p53調控一些僅有BH3區域的蛋白,誘導細胞凋亡的功能十分顯著[32-33]。p 53作為促細胞凋亡因子,其高表達能減少Bcl-2的表達,促進細胞凋亡;而Bcl-2又能抑制p 53介導的細胞凋亡。當p 53基因失活時,引起Bcl-2家族基因調控失衡,凋亡抑制基因Bcl-2的表達水平升高,導致靶細胞不易誘發細胞凋亡[34],因而p53與Bcl-2家族基因的調控作用是相互聯系的。在本研究中,復合中草藥制劑的添加有效地降低了p53基因的表達并增加了Bcl-2基因的表達,因此,能有效的降低淋巴細胞的凋亡率,增強奶牛機體的細胞免疫和體液免疫能力,并最終減輕熱應激對奶牛機體造成的損傷。

3.4 復合中草藥制劑的劑量效應

在本研究中,綜合考慮各指標,給每頭牛添加100 g/d水平復合中草藥制劑的效果要好于50和150 g/d水平。總結其原因,100 g/d添加水平效果要優于50 g/d添加水平的原因可能是因為50 g/d的添加劑量還略為偏低,雖然也有比較明顯的效果,但還是趕不上100 g/d添加水平的效果;而150 g/d添加水平的效果不如100 g/d添加水平的原因可能是由于中草藥添加劑有一定的苦味,在炎熱的天氣條件下,較高劑量的攝入對奶牛會產生味覺上的刺激,會使奶牛機體產生一定程度的應激,盡管如此,它起到的正向功效還是不容忽視的。從實際使用效果及經濟收益方面來考慮,每頭牛100 g/d的添加水平最為適宜。

4 結論

復合中草藥制劑能有效改善熱應激條件下奶牛的泌乳性能;復合中草藥制劑能通過提高GSH-Px和CAT基因的表達水平在一定程度上改善奶牛機體的抗氧化性能;復合中草藥制劑能通過提高Bcl-2的表達水平并降低p53基因的表達水平來抑制熱應激奶牛外周血淋巴細胞的凋亡率,進而改善奶牛機體的免疫功能;在本研究條件下,給每頭牛添加100 g/d水平的效果最好。

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Effect of Chinese herbal medicine on milk production,antioxidant capacity and immunity of dairy cows

HU Yongling1*,YE Shili2,LUO Jiajie3
1.Hunan Environmental Biological Vocational and Technical College,Hengyang 421005,China;2.Hengyang Fukuang Feed Ad ditive Company,Hengyang 421004,China;3.College of Animal Science and Technology,Hunan Agricultural University,Changsha 410128,China

The effect of compound Chinese herbal medicine on milk performance,antioxidant capacity and immunity of dairy cows was studied in 20 healthy mid to late lactation Chinese Holstein cows.Based on lactationtime and milk yield,cows were divided into four equal size groups(A,B,C and D).Group A(control)was feed the base diet only(no herbal medicine),whereas group B,C and D were feed the basal diet supplemented with 50,100 and 150 g/d of the Chinese herbal medicine,respectively.The milk yield for each cow was measured daily.Blood samples for each cow under heat stress conditions were collected on the 1st,20th and 40th day following implementation of treatments to determine apoptosis rate of lymphocytes,GSH-Px,and gene expression of CAT and lymphocyte apoptosis related gene,Bcl-2,p53.Cows in group B,C and D produced 20.26%,24.20%and 16.98%more milk than those in group A(P<0.05),respectively.The somatic cell counts in milk from group B,C and D were 21.68%,29.88%and 24.22%(P<0.05)lower than that group A,respectively.The mean level of GSH-Px and CAT gene expression in group B,C and D was greater than that in group A by 5.00%(P>0.05),13.00%(P<0.05),6.00%(P>0.05)and 5.00%(P>0.05),16.00%(P<0.05),3.00%(P>0.05),respectively.The apoptosis rate of lymphocyte in cows from group B,C and D were 18.20%(P>0.05),17.86%(P>0.05)and 12.51%(P>0.05)lower than those in group A,respectively.The expression level of Bcl-2 in group B,C and D was 105.00%(P>0.05),113.00%(P>0.05)and 57.00%(P>0.05)higher than that in group A,respectively.Additionally,the expression level of p53 gene in groups B,C and D were 24.00%(P>0.05),28.00%(P>0.05)and 20.00%(P>0.05)lower than that in the control group,respectively.The gene expression level of Bcl-2 and p53 was significantly higher in groups(B,C and D)than that in control group after 20 and 40 days.Within the groups receiving Chinese medicine,milk yield,somatic number,antioxidase activity and expression level of lymphocytic apoptosis related genes were higher in group C than other groups,while the apoptosis rate of lymphocyte in group B was highest.This study suggested that compound Chinese herbal medicine can improve milk performance,antioxidant capacity and immunity of dairy cattle under heat stress.

dairy cattle;Chinese herbal medicine;milk performance;antioxidant capacity;immunity

10.11686/cyxb20150117 http://cyxb.lzu.edu.cn

胡永靈,葉世莉,羅佳捷.中草藥制劑對熱應激奶牛泌乳性能、抗氧化能力及免疫功能的影響.草業學報,2015,24(1):132-140.

Hu Y L,Ye S L,Luo JJ.Effect of Chinese herbal medicine on milk production,antioxidant capacity and immunity of dairy cows.Acta Prataculturae Sinica,2015,24(1):132-140.

2014-05-12;改回日期:2014-07-18

國家教育部、財政部支持的國家重點專業建設項目[2011(71)]和湖南省高等學校科學研究項目(11C0468)資助。

胡永靈(1969-),男,湖南衡陽人,副教授,碩士。E-mail:huyonglin19@163.com

*通訊作者Corresponding author.E-mail:962567227@qq.com

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