刺頭復葉耳蕨生藥鑒定學研究

李輝敏，吳 萍，江 和

(九江學院基礎醫學院，江西九江 332000)

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刺頭復葉耳蕨生藥鑒定學研究

李輝敏，吳 萍，江 和

(九江學院基礎醫學院，江西九江 332000)

[目的]對刺頭復葉耳蕨進行生藥學研究，為開發利用該資源提供參考依據。[方法]分別從基源、性狀、顯微特征方面對刺頭復葉耳蕨進行了系統的鑒別研究。[結果]描述了原植物形態特征、藥材性狀特征、橫切面及粉末顯微特征。[結論]這些特征可作為刺頭復葉耳蕨的鑒別依據。

刺頭復葉耳蕨; 生藥學研究; 性狀;顯微鑒別

刺頭復葉耳蕨(ArachniodesexilisChing)為鱗毛蕨科復葉耳蕨屬植物，廣泛分布于世界熱帶和亞熱帶濕潤區域，以亞洲東部和東南部種類最為豐富，我國主要分布于長江流域以南地區及山東、河南等省，具有清熱利濕、抗菌消炎、鎮靜作用，民間習取其根部入藥，用于治療急性黃疸型肝炎、關節炎、腰腿疼、痢疾、燙火傷等[1]。為了更好地鑒別、開發利用刺頭復葉耳蕨，該研究對其進行了基源鑒別、性狀鑒別、顯微鑒別研究，從而為今后刺頭復葉耳蕨的質量標準制訂提供研究基礎。

1 材料與方法

1.1 材料全草采自江西省九江市星子縣，由九江學院基礎醫學院高春華教授鑒定為鱗毛蕨科(Dryopteridaceae)復葉耳蕨屬(Arachniodes)刺頭復葉耳蕨(ArachniodesexilisChing)。樣本保存于九江學院基礎醫學院藥學標本室，標本編號為F1205；水合氯醛、稀甘油等均為分析純(AR)，天津科密歐化學試劑公司。

1.2 儀器FCI30/B型中草藥粉碎機(上海中藥機械廠)，KL-UP-IV-20型超純水機(成都唐氏康寧科技發展有限公司)，RM2016型切片機(德國徠卡)，AB300型數碼成像顯微系統(Motic)。

1.3 方法

1.3.1基源鑒定。取采自廬山周邊地域復葉耳蕨屬的植物，利用植物分類方法及查閱文獻[2]進行原植物鑒別。

1.3.2性狀鑒定。取干燥藥材根莖，觀察其特征，并對其外觀性狀進行描述。

1.3.3顯微鑒定。

1.3.3.1制片。取刺頭復葉耳蕨葉柄莖、根及葉片，分別進行徒手制片、組織石蠟切片及粉末制片，以便對該植物的顯微特征進行觀察。①徒手制片。分取刺頭復葉耳蕨葉柄莖及根的橫切面，進行徒手切片，將薄片置于潔凈的載玻片上，滴加水合氯醛試液加熱透化后，滴加稀甘油，蓋上蓋玻片，制成顯微裝片進行觀察[3]。取刺頭復葉耳蕨葉片，以鑷子內側的尖端刺破葉片，夾住材料向外撕取，撕下的一層薄膜立即放到有水的干凈玻片上，加水合氯醛試液加熱透化后，滴加稀甘油，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察葉表皮細胞的形態，氣孔類型等。②石蠟切片。取組織進行固定后經沖洗、用遞升濃度的乙醇等脫水、用二甲苯等透明、用石蠟浸蠟，然后用石蠟將組織包埋成蠟塊，再經切片機切片后染色而制成切片[4]。③粉末制片。取60目刺頭復葉耳蕨根莖粉末少許，置于潔凈的載玻片上，滴加1～2滴醋酸甘油試液，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察細胞中的不溶性物質。另取粉末少許，置于潔凈的載玻片上，用滴加水合氯醛加熱透化除去細胞中的油脂、淀粉等后裝片，在顯微鏡下觀察。

1.3.3.2顯微特征觀察。取刺頭復葉耳蕨葉柄莖、根及葉片的組織切片與粉末片，利用顯微鏡來觀察刺頭復葉耳蕨的組織結構、細胞性狀及內含物，并對顯微特征描述，從而制定顯微鑒別依據。包括組織鑒定和粉末鑒定。

2 結果與分析

2.1 基源鑒定利用植物分類方法及查閱文獻進行原植物鑒別可知，本品植株高50～60 cm。葉柄長40 cm，粗約2 mm，禾稈色，基部密被深棕色、披針形鱗片，向上疏被黑褐色同樣鱗片。葉片闊卵形，長22 cm、寬12 cm，頂部略狹縮呈三角形，長漸尖頭，基部闊楔形，充分三回羽狀；羽片8對，基部一對對生，向上的互生，有柄，斜展，基部一對最大，三角形，長10 cm，下部寬6 cm，尾狀漸尖頭，基部圓楔形，二回羽狀；分離小羽片12對，互生，有短柄，基部一對斜上，上部的開展，基部下側一片小羽片伸長，披針形，長6 cm，寬2 cm，漸尖頭，基部闊楔形，羽狀；末回小羽片10對，有短柄，斜長圓形，下部的長1 cm，寬約5 mm，漸尖頭，基部斜楔形，深羽裂，裂片具芒刺，基部上側一片小羽片闊披針形，長3.5 cm，基部寬1.5 cm，漸尖頭，羽狀；第二對羽片披針形，略呈鐮刀狀，長9 cm，基部寬2.5 cm，漸尖頭，二回羽狀；基部下側一(二)片較同側第二(三)片為小，基部上側一片至伸達第三對羽片的基部。葉干后紙質，棕綠色，光滑，葉軸、羽軸和小羽柄下面有相當多褐色或棕色、披針形小鱗片。葉可分成營養葉和孢子葉2種。孢子囊群每小羽片6～8對(末回小羽片或裂片2～5對)，略近中脈；囊群蓋深棕色，宿存(圖1)。生長習性，生山谷林下，海拔180～520 m。

2.2 性狀鑒定根據對干燥藥材外觀性狀的觀察，可知本品根莖呈不規則扁圓形，長4～35 cm，直徑2～6 mm；根莖表面深黃棕色，可見彎曲棕色須根及淺棕色鱗片；質硬而脆，斷面不規則，淺灰白色，并具粉性；氣微，味澀(圖2)。

2.3 顯微鑒別

2.3.1葉柄莖顯微特征。刺頭復葉耳蕨葉柄莖顯微特征具有特異性，其橫切面可見分體中樞5，維管組織呈有限外韌型，其中有2個分體中樞木質部呈喇叭狀(圖3。)。有的薄壁細胞可見含細小的砂晶。

2.3.2葉顯微特征。由圖4可見，刺頭復葉耳蕨葉的表面薄壁細胞長方形，呈波狀彎曲，下表面氣孔周圍副位細胞4～5個，多為不定式，偶見不等式。在表皮細胞外壁有角質層，胞壁可見紋孔，氣孔分布密，保衛細胞中含葉綠體；葉片邊緣可見梯紋導管。

2.3.3根莖橫切面顯微特征。 根莖徒手制片難度大，因根莖含有大量的淀粉，難以有根莖全面的橫切面圖，無法可見根莖有多少個分體中樞；石蠟切片也未觀察到根莖全面的橫切面圖。但從切片的部分(圖5)可知根莖具有周韌型維管束，作為物種的鑒定依據不充分。

2.3.4根莖的粉末顯微特征。取本品粉末少量，置載玻片上，滴加少量的水合氯醛加熱透化，再加數滴稀甘油，蓋上蓋玻片，在鏡下觀察可見螺紋、梯紋導管，有不規則紅棕色的細胞色素塊(圖6)；另取潔凈的載玻片，加少量樣品粉末，滴加醋酸甘油試液，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察可見具明顯的細胞后含物淀粉粒，其直徑<10 μm(圖7)。

3 討論

該研究通過對刺頭復葉耳蕨的基源、性狀及顯微特征的研究觀察，為該植物的基礎研究提供了依據，便于科學準確地鑒別該草藥，為刺頭復葉耳蕨的深入研究奠定了生藥學基礎，從而有利于今后對其的綜合開發利用。

在顯微鑒別制片操作當中，石蠟切片操作復雜，過程較長，對操作技術要求較高，一步不慎易導致前功盡棄，且處理過程會引起組織塊或多或少的收縮，切片時受環境濕度、溫度等影響較大，而徒手制片操作相對簡單、快速，無需貴重切片機，可觀察到植物組織活體結構及自然色澤，應用廣泛，為植物顯微鑒別常用的制片方法。從顯微鑒別結果可知，刺頭復葉耳蕨葉柄橫切面的組織結構特殊，對于刺頭復葉耳蕨的鑒定有一定的科學意義，從葉柄橫切面可觀察到分體中樞為5，維管組織有限外韌型，上端3個分體中樞環列，下端2個分體中樞較大，形態各異，在其木質部形成明顯具拖尾的喇叭形。而供藥用的根莖，由于含有豐富的淀粉類物質，不利于徒手制片進行鑒別，所含分體中樞整體形態難以判斷，顯微特征特異性并不突出，因此該部位不適應于對該植物物種的鑒定。由此可認為選擇刺頭復葉耳蕨葉柄橫切面的顯微特征作為鑒別標準對于刺頭復葉耳蕨的鑒定更具有科學意義。而這種情況在鱗毛蕨科其他藥用植物的鑒定中也曾出現過，如綿馬貫眾藥用部位為其根莖，而藥典采用其葉柄橫切面顯微特征作為顯微鑒別的標準[5]。刺頭復葉耳蕨葉的組織形態，如表皮細胞形態、氣孔類型及粉末形態特征均可作為輔助鑒定的依據。

[1] 周道年，阮金蘭，蔡亞玲.復葉耳蕨地上部分黃酮類化合物[J].中國藥學雜志，2008，43(16)：1218-1220.

[2] 高發全.淺論幾種植物分類方法[J].陜西林業科技，1990(2)：25-27.

[3] 楊漢民，賈敬芬.怎樣制作植物徒手切片[J].植物雜志，1978(4)：17.

[4] 吳立人.生藥學實驗[M].2版.北京：中國醫藥科技出版社，2012：17-23.

[5] 國家藥典委員會.中國藥典.Ⅰ部[S].北京：化學工業出版社，2010：231-232.

Pharmacognostic Study onArachniodesexilisChing

LI Hui-min, WU Ping, JIANG He

(Basic Medical College of Jiujiang University, Jiujiang, Jiangxi 332000)

[Objective] To conduct pharmacognostic study ofArachniodesexilisChing and thus to afford reference for development and utilization of the resource. [Method] Macroscopic and microscopic identification were used to identifyArachniodesexilisChing. [Result] The morphological feature of original plant, character of crude drug, microscopic characters of transverse section, powder were described. [Conclusion]The study could be applied to identifyArachniodesexilisChing.

ArachniodesexilisChing; Pharmacognostical study; Shape and properties; Microscopic identification

江西省教育廳資助項目(GJJ12737)；江西省衛生廳資助項目(2012A014)。

李輝敏(1974- )，女，江西九江人，副教授，博士，從事中藥藥效物質基礎與質量控制研究。

2014-11-21

S 567

A

0517-6611(2015)01-029-04

鳴 謝 九江學院基礎醫學院高春華教授在該研究整個過程中提供的幫助與指導。