復方石斛對高脂血癥大鼠脂質代謝和肝臟的影響

徐小婷，徐應淑，高健美，王 森，張云麗

（遵義醫學院，貴州 遵義 563000）

復方石斛對高脂血癥大鼠脂質代謝和肝臟的影響

徐小婷，徐應淑，高健美，王 森，張云麗

（遵義醫學院，貴州 遵義 563000）

目的探討復方石斛對高脂血癥大鼠脂質代謝和肝臟的影響。方法將雄性SD大鼠60只隨機分為6組，即正常組、模型組、辛伐他汀組（10 mg／kg）和復方石斛高、中、低劑量（14．4，7．2，3．6 g／kg）組，各10只。觀察肝臟的病理變化，檢測和分析血清血脂。結果復方石斛可顯著降低高脂血癥大鼠血中總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平，提高高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平；光鏡觀察，模型組大鼠的肝組織切片中肝細胞胞質內出現張力較大的空泡；正常組肝組織結構正常；各給藥組肝組織切片中空泡現象減少。結論復方石斛能調節高脂血癥大鼠的血清血脂和改善肝臟脂肪變性。

復方石斛；高脂血癥；脂質代謝；肝臟脂肪變性

高脂血癥是由于脂肪代謝或運轉異常而使血漿中1種或多種脂質水平高于正常范圍。高血脂會加大血液的黏度，危害冠狀動脈，形成粥樣硬化，導致冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（簡稱冠心病）、心肌梗死、高血壓、脂肪肝等疾病，總膽固醇（TC）每增高1 mmol／L，缺血性腦卒中發病率會增加20%[1-2]。高脂血癥的發病率在正常人群中為20% ～30%，并有年輕化趨勢[3]。臨床常用藥物雖有調脂作用，但同時伴有胃腸道反應、肝腎損傷和停藥反應。中藥治療高脂血癥具有高效、低毒、多靶點及多效應的特點，且注重運用不同功效的藥物整合后對身體進行調理，既符合人體的生理規律，又能標本兼治[4]。本研究中通過建立高脂血癥大鼠動物模型，觀察自擬復方石斛對大鼠血脂及肝臟脂肪病變的影響，以為臨床應用提供試驗依據和理論指導。

1 材料與方法

1．1 動物、試劑與儀器

動物與飼料：SD大鼠60只，雄性，體重（200±20）g，由第三軍醫大學大坪醫院實驗動物中心提供，合格證號 SCXK（渝）2012-0005。喂養的高脂飼料和普通飼料均由本實驗室加工，高脂飼料處方為2%膽固醇，1%膽酸鈉，0．1%丙硫氧嘧啶，10%豬油，10%蛋黃粉，76．9%普通飼料。

藥物、試劑和主要儀器：金釵石斛（貴州赤水），山楂、決明子、丹參和銀杏葉均購自四川新荷花中藥飲片股份有限公司，經遵義醫學院藥劑教研室王森副教授鑒定均符合2010年版《中國藥典（一部）》相關要求，藥材經10倍量70%乙醇冷凝回流2 h，再用10倍量的水冷凝回流2 h，2次的提取液混合并過濾，濃縮；高劑量每1 mL相當于原藥材1．44 g，中劑量相當于0．72 g，低劑量相當于 0．36 g；辛伐他汀片（山東鑫齊藥業有限公司，批號為20140319）；TC、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）試劑盒（北京北化康泰臨床試劑有限公司，批號分別為20130116，20130723，20130718，20140801）；膽固醇（上海藍季科技發展有限公司，批號為130720）；脫氧膽固醇（北京奧博星生物技術有限公司，批號為 20140416）；水合氯醛（成都市新都區木蘭鎮工業開發區，批號為20130513）；豬油（市售）；其他試劑均為分析純。RE-2000E型旋轉蒸發器（上海羌強儀器設備有限公司），Muultiskan Spectrum全波長酶標儀（Therom公司）；臺式高速離心機（H1650-W型）。

1．2 方法

取SD大鼠60只，適應實驗室環境1周后，隨機分為正常組（A組）、模型組（B組）、辛伐他汀組（C組）和復方石斛低劑量組（D組）、中劑量組（E組）、高劑量組（F組），各10只。A組大鼠用普通飼料正常喂養，其余組大鼠給予高脂飼料喂養，C，D，E，F組分別給予相應劑量的藥物，每日均以10 mL／kg的劑量喂養，連續喂養8周。第8周末，禁食不禁水12 h，7%水合氯醛5．0 mL／kg腹腔麻醉大鼠。從腹主動脈取全血，靜置1．5 h，以3 500 r／min的速率離心15 min，分離血清，-20℃冰箱中保存，用于相關指標檢測。斷頸處死大鼠，立即摘取肝臟（拍照），觀察其形態、大小、顏色及質地，并用預冷的生理鹽水漂洗，濾紙拭干稱重（計算肝臟指數），取肝左葉相同部位若干塊，用10%中性甲醛溶液固定，做病理組織切片。按試劑盒說明書檢測血清TC，TG，LDL-C，HDL-C的含量。取10%甲醛溶液固定的肝組織塊，修整后，經乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋后，4 μm切片，進行HE染色，光鏡下觀察肝臟的病理學變化，并拍照。

1．3 統計學處理

2 結果

解剖時肉眼觀察肝臟形態發現，大鼠均有正常的肝臟形態。A組大鼠肝臟成暗紅褐色，表面光滑，明亮有光澤。與A組比較，B組大鼠肝臟腫脹，顏色大多為黃褐色或泛白。D，E，F組的肝臟大小、顏色均趨于A組。光鏡下的肝臟組織，經HE染色后，細胞漿呈紅色，細胞核呈藍紫色。A組大鼠肝索排列整齊，肝竇清晰，肝細胞大小一致，細胞核清晰，胞漿均勻；B組大鼠肝索排列紊亂，肝竇變小或消失，肝細胞部分渾濁、腫脹，部分萎縮變小，有大量大小不一的空泡狀脂滴，將胞核推擠向一側；各給藥組的脂肪變性與B組比較，有不同程度減輕，其空泡數量及大小明顯減少及減小。結果見表1和圖1。

表1 各組大鼠血脂指標比較（，n=10）

表1 各組大鼠血脂指標比較（，n=10）

注：與B組比較， P＜0．05；與A組比較， P＜0．05。

組別A組B組C組D組E組F組體重（g）403．08±17．98 435．22±18．69 399．33±11．70 417．44±18．53 412．89±28．65 409．57±26．52肝重（g）7．68±0．58 13．19±0．46 11．20±0．65 11．62±0．95 11．72±0．55 11．28±1．31肝臟指數（%）1．91±0．14 3．03±0．10 2．81±0．15 2．87±0．22 2．84±0．15 2．75±0．27 TC（mmol／L）0．93±0．30 2．04±0．17 1．57±0．39 1．96±0．39 1．76±0．27 1．87±0．21 TG（mmol／L）0．34±0．27 0．55±0．31 0．50±0．25 0．51±0．39 0．45±0．36 0．49±0．27 LDL-C（mmol／L）0．92±0．31 1．61±0．29 1．12±0．29 1．37±0．41 1．25±0．45 1．16±0．21 HDL-C（mmol／L）2．08±0．27 2．18±0．22 1．81±0．38 1．97±0．42 1．81±0．49 1．87±0．49

圖1 光學顯微鏡下的肝臟病理組織學檢查（×400）

3 討論

高脂血癥為常見的多發性疾病，與糖尿病、肥胖、脂肪肝、高血壓、動脈粥樣硬化等疾病的形成密切相關[5]。本研究以調理肝、腎、脾功能平衡為目的，選用山楂、決明子、丹參、銀杏葉及金釵石斛配伍進行調脂作用研究。其中山楂歸肝、脾經，有消食健胃、活血散瘀、化瘀降濁的功效，為君藥；丹參、銀杏葉歸肝經，有活血祛瘀、通絡調脂的功效，為臣藥；決明子、金釵石斛歸肝、腎經，清肝益腎，滋陰清熱，有化濁調脂功效，為佐藥。諸藥合用，標本兼治，攻補兼施，共奏活血化瘀、健脾益腎、清肝化濁之功效。

采用長期給予高脂飼料建立的高脂血癥大鼠模型，形成率高，死亡率低，抵抗力強，與人患病機制較相似[6-7]。連續給藥8周后，B組的肝重、肝臟指數均高于A組，其中E、F組的肝臟指數與B組相比，顯著下降，說明復方石斛有降低肝內脂質的作用。B組大鼠的血中TC，TG，LDL-C的含量明顯高于A組，HDL-C含量明顯低于A組。C，D，E，F組的TC和LDL-C與B組比較，均有顯著性差異，其中，只有D組的TC與A組有顯著性差異；C，E，F組的TG與B組比較，有明顯差異，但E組與A組有顯著性差異，說明復方石斛有降低血清TG的作用，但不明顯；血清中的HDL-C，只有D組和B組有顯著性差異。可見，復方石斛對血清中的TC和LDL-C降低作用較明顯。

本研究結果顯示，E，F組大鼠血清TC，TG，LDL-C與B組比較，下降顯著；在光鏡下，D，E，F組的脂肪變性與B組相比，有不同程度減少，說明復方石斛有調節高脂血癥大鼠血脂代謝水平，預防或減輕其肝組織脂肪變性的作用。

[1]劉永蘭，趙喜榮，李 燕．高脂血癥的危害及其預防對策[J]．中國醫學創新，2012，9（26）：150-151．

[2]陳名杰，李向平．代謝綜合征血脂異常的特點及治療研究進展[J]．心血管病學進展，2011，32（1）：104-107．

[3]唐沙玲．高脂血癥中醫研究進展[J]．內科，2008，3（1）：129-132．

[4]莊瑞豐．中藥降血脂作用研究進展[J]．河北醫藥，2009，31（9）：1 119-1 121．

[5]盧錕剛，樂智勇，陳桂林，等．決明子、丹參、苦丁茶、絞股藍不同組分配伍的降血脂作用[J]．中國實驗方劑學雜志，2012，18（9）：191-195．

[6]李淑珍，李 進．黑果枸杞總黃酮降血脂作用[J]．時珍國醫國藥，2012，32（5）：1 072-1 074．

[7]楊蓮芳，石敏娟，高錦誠，等．苦丁茶對酒精性脂肪肝模型大鼠脂質代謝的影響[J]．中國藥業，2014，23（19）：30-32．

Influence of Compound Caulis Dendrobii on Lipid Metabolism and Liver in Rats with Hyperlipidemia

Xu Xiaoting,Xu Yingshu,Gao Jianmei,Wang Sen,Zhang Yunli
(Zunyi Medical University,Zunyi,Guizhou,China 563000)

Objective To investigate the influence of Compound Caulis Dendrobii on lipid metabolism and liver in rats with hyperlipidemia．Methods 60 male SD rats were randomly divided into 6 groups,the normal group,model group,simvastatin group(10 mg／kg) and Compound Caulis Dendrobii high,medium and low(14．4,7．2,3．6 g／kg)dose group．The pathological changes of liver was observed, the serum lipid was tested and analyzed．Results Compound Caulis Dendrobii can significantly reduce hyperlipidemia rats blood TC, TG,LDL-C levels,improve the level of HDL-C;under light microscopy observation,model group rats liver biopsy of liver cells in tension larger vacuoles in cytoplasm;normal group of normal liver tissue results;each dosage group decreased liver biopsy hollow bubble phenomenon．Conclusion Compound Caulis Dendrobii can adjust the serum lipid of hyperlipidemia rats and improve liver steatosis．

Compound Caulis Dendrobii;hyperlipidemia;lipid metabolism;liver steatosis

R285.5；R289.5

A

1006-4931(2015)21-0030-03

徐小婷（1990-），女，漢族，在讀碩士研究生，研究方向為新藥研究與開發，（電話）0852-8609321；徐應淑（1976-），女，土家族，教授，主要從事新藥研究與開發工作，本文通訊作者，（電子信箱）xuyingshu1976＠126．com。

2015-05-07)

貴州省科技廳資助項目，項目編號：赤中藥科合[2013]號；貴州省中醫藥管理局資助項目，項目編號：QZYY2012-52。