肺癌并發(fā)肺結(jié)核患者化療前后外周血T淋巴細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)變化及臨床意義

劉　欣

(青島市胸科醫(yī)院胸二科，山東 青島 266043)

肺癌并發(fā)肺結(jié)核患者化療前后外周血T淋巴細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)變化及臨床意義

劉欣

(青島市胸科醫(yī)院胸二科，山東 青島 266043)

自20世紀(jì)80年代Kung等成功地研制出抗人T淋巴細(xì)胞且逐漸用于基礎(chǔ)及臨床免疫學(xué)以來(lái)[1]，T淋巴細(xì)胞亞群的研究逐漸變得廣泛與深入，而且已經(jīng)逐漸發(fā)展成為對(duì)人體免疫功能綜合狀況評(píng)價(jià)的一個(gè)重要方法[2]。相關(guān)臨床研究證實(shí)，很多原發(fā)或繼發(fā)疾病均存在外周血T淋巴細(xì)胞亞群異常[3-4]。所以，外周血T淋巴細(xì)胞亞群的檢測(cè)對(duì)探討疾病發(fā)病原因、發(fā)病機(jī)制以及協(xié)助臨床診療等方面均具有十分重要的臨床價(jià)值與臨床意義。本研究以肺癌并發(fā)肺結(jié)核患者為例，著重探討了化療前后患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化情況，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料回顧性分析2010年11月至2013年11月青島市胸科醫(yī)院收治的60例肺癌并發(fā)肺結(jié)核患者的臨床資料，其中男37例，女23例；年齡47～75歲，平均(60±8)歲；經(jīng)病理診斷，腺細(xì)胞肺癌39例，鱗癌21例；根據(jù)1997年國(guó)際抗癌聯(lián)盟公布修訂后的肺癌TNM國(guó)際分期法進(jìn)行分期，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期分別為17例、28例及15例。

1.2納入、排除標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理組織學(xué)證實(shí)的各期肺癌；②影像學(xué)檢查至少存在一個(gè)可測(cè)量的病灶作為目標(biāo)病灶；③外周血各項(xiàng)指標(biāo)均正常，且癌細(xì)胞未擴(kuò)散至外周血中；④肝、腎、心功能正常；⑤既往無(wú)化療史；⑥近3個(gè)月之內(nèi)未使用過(guò)任何免疫增強(qiáng)劑；⑦無(wú)其他免疫系統(tǒng)疾病[5]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①年齡>75歲；②自身系統(tǒng)免疫疾病史；③出現(xiàn)感染等明顯并發(fā)癥；④無(wú)治療指征者；⑤不能自愿簽署知情同意書(shū)者[6]。

1.3方法

1.3.1化療方法本組患者至少進(jìn)行2～3個(gè)周期的化療，主要采用足葉乙苷聯(lián)合順鉑化療方案：足葉乙苷(湖北巨順宏生物化工股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：961203)100 mg/m2，第1～3日靜脈滴注；順鉑(云南個(gè)舊生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：04080212)25 mg/m2,第l～3日靜脈滴注，同時(shí)給予相關(guān)輔助治療減輕消化道不良反應(yīng)。化療前及化療后2個(gè)或者3個(gè)周期分別作一次增強(qiáng)CT進(jìn)行目標(biāo)病灶檢查，至少化療2個(gè)周期對(duì)其療效進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1.3.2T細(xì)胞亞群檢測(cè)方法采集治療前后支氣管肺癌患者清晨外周靜脈血3 mL，取一定量的新鮮肝素鈉作為抗凝劑備用，采用鏈菌素親生物素-過(guò)氧化物酶聯(lián)法(S-P法)對(duì)T細(xì)胞亞群相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)分析，具體檢測(cè)方法完全按照試劑盒上的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。使用高倍鏡對(duì)經(jīng)染色的視野進(jìn)行仔細(xì)觀察，并在此視野下計(jì)數(shù)200個(gè)單核細(xì)胞；計(jì)數(shù)的200個(gè)單核細(xì)胞中，表面具有紅色標(biāo)志物則屬于陽(yáng)性細(xì)胞[7]。

1.4觀察指標(biāo)比較化療前后CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+、CD45RA+、CD45RA+絕對(duì)值、CD45RO+、CD45RO+絕對(duì)值及CD45RA+/RO+的變化。

2結(jié)果

2.1化療前后外周血T細(xì)胞亞群變化情況分析化療后CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平均顯著高于化療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1　肺癌并發(fā)肺結(jié)核患者化療前后外周血T細(xì)胞亞群變化情況比較　±s)

2.2化療前后CD45RA+/RO+變化情況分析化療后CD45RA+、CD45RA+絕對(duì)值、CD45RO+絕對(duì)值及CD45RA+/RO+水平均顯著高于化療前，CD45RO+水平顯著低于化療前,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，見(jiàn)表2。

化療時(shí)間例數(shù)CD45RA+(%)CD45RA+絕對(duì)值(×109/L)CD45RO+(%)CD45RO+絕對(duì)值(×109/L)CD45RA+/RO+化療前6049±120.8±0.246±100.59±0.231.2±0.5化療后6059±141.3±0.342±80.99±0.401.6±0.7t4.0295.5684.4596.6383.372P0.0320.0240.0280.0140.039

3討論

臨床上，對(duì)肺癌并發(fā)肺結(jié)核患者的早期確診率非常低，存在較大的漏診病例。對(duì)于大部分患者而言，前往醫(yī)院就診時(shí)病情就已處于中、晚期，所以大多數(shù)患者失去最佳就診時(shí)機(jī)[8]。癌細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生不具有癌瘤特征的免疫抑制性因子，從而患者機(jī)體的免疫功能顯著降低。對(duì)于外周血T淋巴細(xì)胞而言，代表T淋巴細(xì)胞總數(shù)的為CD3+細(xì)胞水平，而CD4+細(xì)胞主要為輔助性淋巴細(xì)胞，可分泌多種免疫抑制性因子，包括白細(xì)胞介素2和干擾素γ[9]。對(duì)于CD8+細(xì)胞而言，根據(jù)其功能可以分為殺傷性T細(xì)胞與抑制性T細(xì)胞兩種，這兩種細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生免疫應(yīng)答的抑制作用。CD4+與CD8+之間的比值則可作為衡量免疫功能的一個(gè)十分重要的指標(biāo)，當(dāng)該比值降低時(shí)，此時(shí)細(xì)胞免疫的平衡被打破，從而使機(jī)體的整個(gè)免疫系統(tǒng)的免疫功能被削弱[4]。

CD45也可以稱為“白細(xì)胞共同抗原”，是普遍存在于除成熟紅細(xì)胞、血小板以外的全部血細(xì)胞及其前體細(xì)胞表面的一種跨膜蛋白。CD45分子結(jié)構(gòu)主要包括3部分：膜外N末端區(qū)、跨膜區(qū)以及膜內(nèi)C末端區(qū)。膜外區(qū)共有5個(gè)功能區(qū)，通過(guò)其末端的4、5、6三個(gè)外顯子在基因轉(zhuǎn)錄過(guò)程中的不同排序可產(chǎn)生不同的異構(gòu)體。上述3個(gè)外顯子編碼的功能區(qū)分別為A、B、C，運(yùn)用特異性的McAb(單克隆抗體)能夠檢測(cè)出CD45RA、CD45RB、CDRC以及CD45RO+，其中CD45RO為ABC缺失。T淋巴細(xì)胞表達(dá)不同的CD45亞型與其功能差異存在一定的相關(guān)性，一般而言，CD45RO T淋巴細(xì)胞為記憶T淋巴細(xì)胞，CD45R 為原始細(xì)胞，兩者均為CD45在不用時(shí)期的不同的表型，其對(duì)疾病的進(jìn)展及預(yù)后具有評(píng)估作用[10]。

足葉乙苷的作用機(jī)制一般被認(rèn)為是抑制DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶。間接誘導(dǎo)DNA的斷裂，抑制細(xì)胞周期的S期和G2期，為細(xì)胞周期的特異性藥物，使細(xì)胞分裂停留在有絲分裂期。本研究結(jié)果顯示，化療后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD45RA+、CD45RA+絕對(duì)值、CD45RO+絕對(duì)值、CD45RA+/RO+及CD45RO+水平與化療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示足葉乙苷及順鉑聯(lián)合的化療方案對(duì)肺癌合并肺結(jié)核患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群產(chǎn)生較大的影響。此結(jié)果出現(xiàn)的原因可能在于：腫瘤組織能夠分泌出多種免疫抑制性因子，如白細(xì)胞介素10等，這些因子能夠有效降低抗原提呈細(xì)胞對(duì)腫瘤抗原的攝取、加工以及提取等，阻止其激活路徑，從而大大抑制了CD3+、CD4+、CD45+及CD8+細(xì)胞的成熟分化，使這兩種細(xì)胞數(shù)量銳減，而此時(shí)免疫反應(yīng)誘導(dǎo)及效應(yīng)較低，從而會(huì)對(duì)機(jī)體的免疫監(jiān)視作用具有較大的削弱作用。而上述幾種細(xì)胞因子水平的變化，則會(huì)引起其他外周血T淋巴細(xì)胞相關(guān)因子的變化(包括CD45RA+、CD45RA+/RO+及CD45RO+等)。蔣雷等[10]探討了肺癌化療前后細(xì)胞免疫功能的變化情況，結(jié)果顯示，CD3+、CD4+、CD8+及CD45RO+水平均較化療前發(fā)生了顯著變化(P<0.05)，本研究結(jié)果與之基本一致。江虹和李菊湘[11]選取胃癌、肺癌及結(jié)腸癌作為研究對(duì)象，并分析了3種癌癥患者化療前后外周血淋巴細(xì)胞水平的變化情況，結(jié)果顯示，CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD45RA+及CD45RA+/RO+均較化療前有顯著變化，本研究結(jié)果與之基本一致，由此可以證明，本研究中的結(jié)果具有普遍性。

綜上所述，肺癌并發(fā)肺結(jié)核患者化療后T淋巴細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)均發(fā)生明顯變化，從而為判定化療效果提供了一定的參考依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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摘要：目的探討肺癌并發(fā)肺結(jié)核患者化療前后外周血T淋巴細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)變化及臨床意義。方法回顧性分析2010年11月至2013年11月青島市胸科醫(yī)院收治的60例肺癌并發(fā)肺結(jié)核患者的臨床資料，化療方案為足葉乙苷聯(lián)合順鉑。采用鏈菌素親生物素-過(guò)氧化物酶聯(lián)法(S-P法)對(duì)患者化療前后外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化情況進(jìn)行比較。結(jié)果化療后CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平均顯著高于化療前(P<0.05)；化療后CD45RA+、CD45RA+絕對(duì)值、CD45RO+絕對(duì)值及CD45RA+/RO+水平均顯著高于化療前，但化療后CD45RO+水平顯著低于化療前(P<0.05)。結(jié)論肺癌并發(fā)肺結(jié)核患者化療后T淋巴細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)均發(fā)生明顯變化，從而為判定化療效果提供了一定的參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：肺癌；肺結(jié)核；T淋巴細(xì)胞亞群；臨床意義

Changes and the Clinical Significance of Peripheral Blood T Lymphocytes Relevant Indicators before and after Chemotherapy in Patients with Lung Cancer Complicated by TuberculosisLIUXin.(DepartmentTwoofThoracicMedicine,ThoracicHospitalofQingdao,Qingdao266043,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the changes and clinical significance of the peripheral blood T lymphocytes relevant indicators before and after chemotherapy of patients with lung cancer complicated by tuberculosis.MethodsRetrospective analysis on the clinical data of 60 patients with lung cancer complicated by pulmonary tuberculosis,who were admitted to the Qingdao Thoracic Hospital from Nov.2010 to Nov.2013,was done.Etoposide combined with cisplatin was the regimen for the patients.Streptavidin-biotin pro-peroxidase-linked method(S-P) was used to compare the changes in peripheral blood T lymphocyte subsets before and after the chemotherapy.ResultsAfter chemotherapy CD3+,CD4+,CD8+and CD4+/CD8+were significantly higher than before chemotherapy(P<0.05).After chemotherapy CD45RA+,CD45RA+absolute value,CD45RO+absolute value and CD45RA+/RO+were significantly higher than before chemotherapy,but after chemotherapy CD45RO+level was significantly lower than before chemotherapy(P<0.05).ConclusionT lymphocyte-associated indicators of patients with lung cancer complicated with pulmonary tuberculosis are changed significantly after chemotherapy,which provides a reference basis for determining the effect of chemotherapy.

Key words:Lung cancer; Tuberculosis; T lymphocyte subsets; Clinical significance

收稿日期：2014-09-15修回日期：2014-12-30編輯：伊姍

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.16.065

中圖分類號(hào)：R734

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-2084(2015)16-3054-03