血小板活化標志物CD62P、CD63在糖尿病患者早期腎臟微血管病變中的表達

李云婷，張雷雷，張巧麗

（1.河北醫科大學第二醫院檢驗科，河北 石家莊050000；2.河北省食品質量監督檢驗研究院食品部，河北 石家莊050000）

糖尿病腎病是2型糖尿病最常見的并發癥，是糖尿病主要微血管病變之一。據統計30%～40%糖尿病患者可能發生糖尿病腎病，進而發展成為終末期腎臟疾病［1］；因其發生機制復雜，早期缺乏明顯的癥狀和體征，容易錯過最佳的治療時間而最終導致腎衰竭，因此臨床早期全面診斷顯得尤為重要。近年有研究發現糖尿病腎病患者血小板活化顯著高于不伴腎病者，且2型糖尿病早期患者開始出現血小板活化，抗血小板活化藥物對2型糖尿病有一定的療效［2］，均提示血小板的活化與糖尿病腎病的形成有關。本研究觀察2型糖尿病并發早期腎病患者血小板膜糖蛋白CD62P、CD63的表達情況，旨在探討其在糖尿病腎病早期微血管病變發展過程中的臨床價值。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 根據1999年WHO的糖尿病診斷標準［3］選擇河北醫科大學第二醫院2013年5月—2014年5月收治的2型糖尿病患者98例，男性47例，女性51例，年齡30～70歲。其中單純糖尿病組48例，男性23例，女性25例，年齡30～65歲，平均（57.56±7.22）歲；早期糖尿病腎病組50例，男性24例，女性26例，年齡40～70歲，平均（59.36±5.73）歲。早期糖尿病腎病入選標準：患者出現微量白蛋白尿（Uaer 20～200μg／min，臨床診斷為早期糖尿病腎病），且排除其他腎臟疾病及糖尿病急性并發癥，近期無糖尿病酮癥酸中毒等。正常對照組為同期來院查體的無糖尿病史的健康體檢者49例，男性27例，女性22例，年齡30～75歲，平均（57.2±5.45）歲。3組性別、年齡差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

所有受檢者在近半個月內未服用抗血小板藥物和抗凝藥物。

1.2 研究方法 所有受檢者空腹抽取靜脈血6mL。其中3mL靜脈血，枸櫞酸鈉抗凝，輕輕顛轉混勻5次以上，各取5μL全血分別加入CD62PFITC／CD63-FITC單抗10μL，室溫下避光反應20min后，立刻加入含1%多聚甲醛1mL固定血小板，應用美國BD公司FACSCantoⅡ型流式細胞儀測定。CD62P、CD63，主要試劑由Bioscience公司提供；另外3mL靜脈血用于β2微球蛋白（β2 microglobulin，β2-MG）的測定，β2-MG 采用膠乳增強免疫比濁法，試劑由北京科美生物技術有限公司提供。

1.3 統計學方法 應用SPSS13.0統計軟件進行數據分析，計量資料以±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用q檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義

2 結 果

早期糖尿病組CD62P、CD63陽性表達率高于正常對照組和單純糖尿病組；單純糖尿病組CD62P、CD63陽性表達率高于正常對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）；早期糖尿病腎病組和單純糖尿病組β2-MG高于正常對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）。見表1。

表1 3組CD62P、CD63、β2-MG比較Table 1 CD62P，CD63andβ2-MG levels in three groups（±s）

表1 3組CD62P、CD63、β2-MG比較Table 1 CD62P，CD63andβ2-MG levels in three groups（±s）

＊P＜0.01與正常對照組比較 ＃P＜0.01與單純糖尿病組比較（q檢驗）

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3 討 論

糖尿病腎病主要指糖尿病性腎小球硬化癥，一種以微血管損害為主的腎小球病變。在正常人的循環血液中，血小板基本處于非活化狀態，非活化的血小板在受到各種理化因素（如高血糖）的刺激下，可被激活成活化血小板，血小板活化可表現為膜內、膜表面及血漿中有一些特定的血小板糖蛋白成分發生改變，這些糖蛋白即為血小板活化標志物。目前，已發現與糖尿病有關的血小板活化標志物包括CD62P、CD63（又稱α顆粒膜蛋白GMP140）等。

CD63為血小板溶酶體顆粒膜蛋白，活化時經脫粒反應而表達于血小板膜表面，介導中性粒細胞對活化內皮的黏附。CD62P屬于選擇素家族黏附分子，表達于血小板α顆粒膜表面。當血小板活化時α顆粒迅速與血小板膜融合而在血小板膜表面表達成為血小板活化的特異標志［4-6］。CD62P、CD63在正常情況下不表達或低水平表達，當長期處于高血糖等狀態時，2型糖尿病腎病患者體內存在代謝紊亂，體內升高的血清同型半胱氨酸通過氧化應激損傷血管內皮細胞，可致微血管基底膜增厚，增加血小板黏附，易于形成血栓，增加糖尿病血管病變患病率［7-8］。同時也存在炎癥、水腫、硬化、出血、血栓等病理變化。

β2-MG主要由淋巴細胞分泌，是一種低分子量的蛋白質，可自由經腎小球濾入原尿，幾乎全部在近端小管被重吸收并分解破壞［9］，可反映腎小球的濾過功能，是早期診斷腎小球病變的敏感指標［10］。但特異性差，其他炎癥、中毒等均可升高。有研究顯示DN患者CD62P、CD63陽性率較血清β2-MG陽性率明顯增高，可更敏感地反映腎小管早期損害［11-12］。

本研究結果表示，單純糖尿病組的CD62P、CD63的陽性表達率高于正常對照組，早期糖尿病腎病組CD62P、CD63的陽性表達率高于單純糖尿病組。李穎等［6］研究發現糖尿病腎病患者CD62P、CD63的表達水平高于正常對照組；血小板活化與糖尿病腎病的形成有關，其原因可能是在糖尿病腎病中，由于血小板功能亢進而誘發高凝狀態，血小板功能改變先于微血管病變的發生且活化程度隨著微血管病變的發展而加強。糖尿病腎病患者血小板活化顯著高于不伴腎病者。抗血小板活化藥物對糖尿病腎病有一定的療效［2］。均提示血小板的活化與糖尿病腎病的形成有關［11-12］。

綜上所述，血小板的活化在糖尿病腎病發生發展中發揮著重要作用，因此在糖尿病診療中，除積極控制血糖外，還應考慮使用抗血小板活化藥物，抑制血小板活化，以阻止細胞浸潤、炎癥、腎小球病變，改善微循環障礙，阻止糖尿病的腎臟損害。我們認為，CD62P、CD63不僅可早期預測糖尿病患者腎臟微血管病變的發生發展，而且CD62P、CD63可能成為糖尿病早期腎病微血管病變的一個新的檢測及治療靶點。

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