賴氨大黃酸通過調控miRNA表達水平抑制HBV增殖*

張榮花，王密斯，王 琳，馮雪研，郝曉方，甄永占，李 琳，陳 靜，章廣玲,2△

(1.華北理工大學基礎醫學院病原生物學與免疫學教研室，河北唐山 063000；2.河北省唐山市慢性病臨床基礎研究重點實驗室 063000)

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·論 著·

賴氨大黃酸通過調控miRNA表達水平抑制HBV增殖*

張榮花1，王密斯1，王 琳1，馮雪研1，郝曉方1，甄永占1，李 琳1，陳 靜1，章廣玲1,2△

(1.華北理工大學基礎醫學院病原生物學與免疫學教研室，河北唐山 063000；2.河北省唐山市慢性病臨床基礎研究重點實驗室 063000)

目的 研究賴氨大黃酸在體外對乙型肝炎病毒(HBV)增殖及病毒抗原表達的影響及分子機制，為研究賴氨大黃酸抗HBV作用機制奠定初步的實驗依據。方法 將HepG2.2.15細胞分為實驗組(分別加入5、10、20、40、80 μmol/L賴氨大黃酸)及不加賴氨大黃酸的對照組，分別培養24、48 h收獲上清液，采用四唑氮化合物(MTS)法檢測細胞的增殖活性，采用ELISA法檢測HBsAg和HBeAg的表達水平，實時定量PCR(RT-PCT)檢測其中HBV DNA的拷貝數及miR-210、miR-185、miR-199a-3p、miR-370、miR-196a、miR-184、miR-217的表達水平。miR-210、miR-185、miR-199a-3p、miR-370、miR-196a、miR-184、miR-217反義鏈(ASO)分別轉染HepG2.2.15細胞后，MTS法檢測細胞的增殖活性，ELISA法檢測HBsAg和HBeAg的表達水平。結果 在沒有對HepG2.2.15細胞的增殖活性產生影響的情況下，賴氨大黃酸抑制了HBsAg的產生和HBV的增殖。20 μmol/L的賴氨大黃酸明顯促進了miR-210、miR-185、miR-199a-3p的表達，而抑制了miR-370的表達，與對照組相比較，差異具有統計學意義(P<0.05)。結論 賴氨大黃酸可能通過影響細胞內miRNA的表達抑制HepG2.2.15細胞中HBV的增殖和HBsAg的產生。

賴氨大黃酸； 乙型肝炎病毒； 乙型肝炎病毒表面抗原； miRNA

乙型肝炎病毒(HBV)是一種可引起人類急、慢性肝炎的DNA病毒。雖然有高活性的乙肝疫苗，而且已廣泛使用了20多年，但HBV的感染仍然是一個危害全球健康的重大疾病。全球有超過3.5億的HBV感染者，而且每年急慢性HBV感染致死人數約有一百萬。……