宮頸腺癌組織中C-erbB-2與E-cadherin蛋白的表達*

曹 靜，呂志排，黨秋紅，郝志偉，李道明

1)鄭州大學第三附屬醫(yī)院病理科 鄭州 450052 2)鄭州大學第一附屬醫(yī)院病理科 鄭州 450052

宮頸腺癌組織中C-erbB-2與E-cadherin蛋白的表達*

曹 靜1)，呂志排1)，黨秋紅1)，郝志偉1)，李道明2)#

1)鄭州大學第三附屬醫(yī)院病理科 鄭州 450052 2)鄭州大學第一附屬醫(yī)院病理科 鄭州 450052

#通信作者，男，1963年10月生，博士，主任醫(yī)師，研究方向：腫瘤病理，E-mail：lidaoming@zzu.edu.cn

C-erbB-2；E-cadherin；宮頸腺癌

目的：探討宮頸腺癌組織中C-erbB-2和E-cadherin蛋白的表達與宮頸腺癌患者臨床病理特征的關系。方法：應用免疫組化法檢測72例宮頸腺癌組織中C-erbB-2和E-cadherin蛋白的表達情況，分析二者與宮頸腺癌患者臨床病理特征的關系。結(jié)果：72例宮頸腺癌組織中，C-erbB-2高表達31例(43.1%)，E-cadherin低表達34例(47.2%)。C-erbB-2高表達和E-cadherin低表達與宮頸腺癌的分化程度、FIGO分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(P<0.05)。宮頸腺癌組織中C-erbB-2與E-cadherin的表達呈負關聯(lián)(rP=0.600，P<0.001)。結(jié)論：C-erbB-2高表達和E-cadherin低表達與宮頸腺癌的發(fā)展有關，可作為判斷宮頸腺癌生物學行為的重要參考指標。

宮頸腺癌占宮頸腫瘤的10%～15%，近些年其發(fā)病率有增長趨勢；宮頸腺癌的治療反應及生物學行為不同于宮頸鱗狀細胞癌，且預后較差[1]。C-erbB-2屬于酪氨酸激酶受體(receptor tyrosine kinase，RTK)家族，參與腫瘤的發(fā)生，并與腫瘤細胞增殖、浸潤、轉(zhuǎn)移密切相關[2]。上皮細胞鈣黏蛋白E-cadherin是一類介導同質(zhì)細胞黏附的鈣依賴性黏附分子，對維持正常細胞間的黏附力、抑制腫瘤細胞的侵襲有重要作用。有數(shù)據(jù)[3]顯示E-cadherin是腫瘤進展的關鍵蛋白，E-cadherin低表達常伴隨腫瘤細胞的去分化、極性消失，亦與腫瘤發(fā)生和浸潤有關。有學者[4]認為C-erbB-2過表達可以通過抑制E-cadherin的表達介導腫瘤演進和轉(zhuǎn)移。作者采用免疫組化法檢測宮頸腺癌組織中C-erbB-2和E-cadherin蛋白的表達情況，探討二者在宮頸腺癌的發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用及臨床價值。

1 材料與方法

1.1 材料 收集2009年1月至2013年12月鄭州大學第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科手術切除的宮頸腺癌組織標本72例，均經(jīng)病理證實。患者年齡35～76(58.1±9.3)歲，有完整的臨床資料且術前均未行放、化療。依據(jù)2009年版FIGO分期標準，Ⅰ期42例(ⅠA期7例、ⅠB期35例)，Ⅱ期16例(ⅡA期10例、ⅡB期6例)，Ⅲ期8例(ⅢA期2例、ⅢB期6例)，Ⅳ期6例(ⅣA期4例、ⅣB期2例)；組織學分級：低分化12例，中分化45例，高分化15例；術后病理證實有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者12例。

1.2 宮頸腺癌組織中C-erbB-2及E-cadherin蛋白表達的檢測 兔抗人C-erbB-2單克隆抗體及鼠抗人E-cadherin單克隆抗體購自上海基因科技有限公司，辣根過氧化物酶標記的En Vision試劑盒購自丹麥DaKo公司。采用En Vision法行免疫組化標記，操作步驟按試劑盒說明書進行：3 μm厚石蠟切片經(jīng)脫蠟、水化及預處理，阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，一抗孵育，En Vision孵育，蘇木素復染并封片。采用PBS代替一抗作陰性對照，已知陽性片作陽性對照。

1.3 結(jié)果判定 C-erbB-2及E-cadherin陽性染色呈棕黃色顆粒，均定位于胞膜。取10個高倍鏡視野，分別記錄陽性細胞的染色強度及所占百分比。C-erbB-2判定標準：無著色且陽性細胞百分比≤10%或陽性細胞百分比>10%且胞膜呈淺黃色、染色間斷，判定為低表達；陽性細胞百分比>10%且胞膜呈棕黃色或棕褐色、染色連續(xù)、環(huán)繞整個胞膜，判定為高表達。E-cadherin判定標準：無陽性細胞計0分；陽性細胞百分比<25%計1分，25%～計2分，51%～75%計3分，>75%計4分；無色計0分，淺黃色計1分，棕黃色計2分，棕褐色計3分。兩項指標評分相乘，0～2分為陰性，3～5分為(+)，6～8分為()，9～12分為()；陰性或(+)判定為低表達，()及()判定為高表達[5]。

1.4 統(tǒng)計學處理 應用SPSS 19.0處理數(shù)據(jù)。采用χ2檢驗比較不同臨床病理特征人群C-erbB-2及E-cadherin高(低)表達率的差異，采用Pearson列聯(lián)系數(shù)分析宮頸腺癌組織中2種蛋白表達的關系。檢驗水準α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 C-erbB-2及E-cadherin的表達與宮頸腺癌患者臨床病理特征的關系 見圖1。72例宮頸腺癌中，C-erbB-2高表達31例(43.1%)，E-cadherin低表達34例(47.2%)。宮頸腺癌分化越差、FIGO分期越高或出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，C-erbB-2高表達率越高，而E-cadherin低表達率越高(表1)。

圖1 宮頸腺癌組織中C-erbB-2蛋白高表達(A)、E-cadherin蛋白低表達(B)(En Vision,×200)表1 C-erbB-2及E-cadherin的表達與宮頸腺癌患者臨床病理特征的關系 例(%)

2.2 宮頸腺癌組織中C-erbB-2及E-cadherin表達的關系 宮頸腺癌組織中C-erbB-2及E-cadherin的表達呈負關聯(lián)(rP=0.600,P<0.001)(表2)。

表2 宮頸腺癌組織中C-erbB-2及E-cadherin表達的關系 例

3 討論

近些年來，宮頸腺性病變的發(fā)病率不斷升高，嚴重危害婦女的生命健康。C-erbB-2基因定位于染色體17q21，蛋白產(chǎn)物是一種相對分子質(zhì)量為185 000的酪氨酸激酶跨膜蛋白[6]。C-erbB-2是一種原癌基因，其蛋白產(chǎn)物是EGFR家族中的重要成員；C-erbB-2在正常宮頸組織中幾乎不表達[7]，C-erbB-2的高表達被認為與多種惡性腫瘤如胃癌、乳癌、結(jié)直腸癌等的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移密切相關[8]。有學者[9]認為C-erbB-2與erbB受體相互作用，參與配體調(diào)節(jié)EGF家族并促進腫瘤的進展。在人類腫瘤中，C-erbB-2的分子改變使激酶極度活躍，從而賦予癌細胞異常的、配體獨立的、失控的生長動力。該研究結(jié)果顯示，宮頸腺癌分化越差，F(xiàn)IGO分期越高或出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，C-erbB-2的高表達率越高，與上述研究相符，提示C-erbB-2的高表達與宮頸腺癌的發(fā)展有關。

E-cadherin是位于染色體16q22的鈣黏蛋白基因編碼的鈣依賴性跨膜糖蛋白。 E-cadherin的C末端必須與α、β、γ-catenin結(jié)合形成復合物，才能與肌動蛋白、細胞骨架相連，并形成偽足，使E-cadherin穩(wěn)定地錨于細胞膜上，發(fā)揮細胞黏附功能[10]。E-cadherin參與鈣離子依賴性的細胞間黏附能力的調(diào)節(jié)，對于維持正常組織結(jié)構(gòu)的完整性及極性、抑制腫瘤細胞的侵襲起關鍵作用。E-cadherin在正常宮頸組織中100%表達[11]，E-cadherin表達失調(diào)或缺失時，腫瘤細胞間的相互黏附力下降，彼此松動、分離，從原發(fā)灶脫落而發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移[12]。有學者[13]對宮頸鱗狀細胞癌組織中E-cadherin的表達情況進行研究，發(fā)現(xiàn)E-cadherin表達缺失是宮頸鱗狀細胞癌發(fā)生的重要分子事件。 此外，E-cadherin在胃癌、前列腺癌等腫瘤中均表現(xiàn)為表達下調(diào)[14-15]。該研究結(jié)果顯示，宮頸腺癌分化越差，F(xiàn)IGO分期越高或出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，E-cadherin的低表達率越高，與上述研究相符，提示E-cadherin的低表達與宮頸腺癌的發(fā)展有關。

Cheng等[16]的研究顯示，在人類卵巢癌細胞中，C-erbB-2在EGF誘導的E-cadherin下調(diào)中發(fā)揮潛在作用并增加腫瘤細胞的侵襲能力，EGF誘導EGFR和C-erbB-2相互作用，并活化C-erbB-2的表達。該研究結(jié)果顯示，宮頸腺癌組織中C-erbB-2與E-cadherin蛋白的表達呈負關聯(lián)，與上述研究相符，提示二者共同參與了宮頸腺癌的發(fā)展。

綜上所述，C-erbB-2高表達和E-cadherin低表達與宮頸腺癌的發(fā)展有關。探索C-erbB-2與E-cadherin在宮頸腺癌中的表達及作用，對于尋找藥物治療的新靶點及預后評估具有重要意義。

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Expressions of C-erbB-2 and E-cadherin in cervical adenocarcinoma tissue

CAOJing1),LVZhipai1),DANGQiuhong1),HAOZhiwei1),LIDaoming2)

1)DepartmentofPathology,theThirdAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052 2)DepartmentofPathology,theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052

C-erbB-2；E-cadherin；cervical adenocarcinoma

Aim: To explore the expressions and clinicopathology significance of E-cadherin and C-erbB-2 in cervical adenocarcinoma tissue. Methods: The expressions of E-cadherin and C-erbB-2 protein in 72 cases diagnosed as cervical adenocarcinoma were detected by immunohistochemical method, and their relations with clinicopathological parameters were analyzed. Results: Out of 72 cervical adenocarcinoma samples, the high level expression of C-erbB-2 was found in 31 cases(43.1%), while the low level expression of E-cadherin was found in 34 cases(47.2%). C-erbB-2 overexpression and E-cadherin reduced expression were related with differentiation degree, FIGO staging and lymph node metastasis of cervical adenocarcinoma(P<0.05). There was negative association between C-erbB-2 and E-cadherin protein expressions in cervical adenocarcinoma tissue(rP=0.600，P<0.001).Conclusion: C-erbB-2 overexpression and E-cadherin reduced expression may play important roles in the development of cervical adenocarcinoma, and could be used for judging its biological behavior.

10.13705/j.issn.1671-6825.2015.04.014

*河南省基礎與前沿技術項目 112300410155

R737.33