化療聯合DC-CIK治療中晚期胃癌研究

吳付兵,黃 雯,王康霞,王明元,徐方貴,黃春開,王 星

(南京軍區福州總醫院第一附屬醫院，福建 莆田 351100)

化療聯合DC-CIK治療中晚期胃癌研究

吳付兵,黃 雯,王康霞,王明元,徐方貴,黃春開,王 星

(南京軍區福州總醫院第一附屬醫院，福建 莆田 351100)

目的 觀察DC-CIK聯合化療治療中晚期胃癌的臨床療效以及安全性。方法 將52例中晚期胃癌患者隨機分為治療組和對照組，對照組采用吉西他濱和奧沙利鉑治療，治療組采用吉西他濱和奧沙利鉑聯合DC-CIK治療，觀察2組近期療效、生活質量、1年生存率以及不良反應發生情況。結果 治療組客觀緩解率為54%，疾病控制率為81%；對照組客觀緩解率為46%，疾病控制率為58%。2組客觀緩解率比較差異無統計學意義，而疾病控制率比較差異有統計學意義(P<0.05)。治療后，治療組KPS評分顯著高于對照組(P<0.05)。患者免疫力提高，而對照組免疫力進一步降低，2組治療后比較差異有統計學意義(P<0.05)。1年生存率2組比較差異無統計學意義，但是治療組有延長的趨勢。2組不良反應均為血液學毒性和消化道反應，但是治療組不良反應比對照組明顯減輕(P<0.05)。結論 DC-CIK聯合化療治療中晚期胃癌的臨床療效優于單純常規化療，而且可以提高疾病控制率和患者生活質量，減輕不良反應，值得推廣應用。

化療;DC-CIK;中晚期胃癌

近年來，隨著社會、環境、經濟以及生活方式的變化，惡性腫瘤發病率逐年提高，已經成為威脅生命的頭號殺手。胃癌是常見的消化道惡性腫瘤，發病率占據消化道惡性腫瘤首位，而且早期不易發現，確診時多已到晚期，失去手術的機會。而對于中晚期腫瘤患者而言，手術切除后患者生活質量、精神狀態以及生存率并沒有得到明顯改善，所以開發新的治療手段就顯得尤為重要。隨著分子生物學以及腫瘤免疫學的發展，生物治療已展現出越來越廣闊的前景。腫瘤的生物治療是一種依靠自身免疫系統的激活來抗癌的新型治療方式，其通過生物制劑或者自身的防御機制來激發、增強自身的免疫功能，從而達到抑制腫瘤生長或者根治的目的。治療法包括腫瘤的基因治療和免疫治療。其中免疫治療主要包括細胞因子療法、疫苗療法、單克隆抗體療法、免疫導向療法以及過繼免疫療法。DC-CIK療法是過繼細胞免疫療法的一種，具有增殖速度快、殺瘤活性高、殺瘤種類廣以及安全性高的特點[1-2]。目前在治療晚期非小細胞肺癌[3-4]急性髓細胞白血病[5]以及結直腸癌[6-7]中具有良好的臨床療效，成為腫瘤治療的有效手段，是繼手術、放化療之后的有效輔助治療方法，在改善患者的生活質量、增強免疫能力、改善精神狀態以及延長生存時間方面有著良好的應用前景。而采用DC-CIK和手術、放化療等手段聯合使用有利于提高腫瘤治療的綜合療效。本研究觀察了DC-CIK治療法聯合化療治療中晚期胃癌的療效以及安全性，現將結果報道如下。

1 臨床資料

1.1一般資料 選擇2013年5月—2014年3月來南京軍區福州總醫院第一附屬醫院腫瘤中心接受化療治療的中晚期胃癌患者52例，均經過病理、細胞學以及影像學檢驗確診，預計生存期>3個月，至少能完成3周期化療， KPS評分≥60分。化療前心肝腎以及尿常規正常，無低、高血壓病史，血常規、心電圖等結果提示無化療禁忌證。排除正在接受放化療或其他抗腫瘤治療者，同時存在其他惡性腫瘤及傳染病的患者、懷孕期及哺乳期婦女、對生物制品過敏者、伴有嚴重心肺肺腎功能不全及免疫功能降低者。將52例患者隨機分成2組：治療組26例，男13例，女13例；年齡40～65歲；按國際抗癌聯盟(UICC) 分期標準進行臨床分期：Ⅱ期13例，Ⅲ期8例，Ⅳ期5例。對照組26例，男14例，女12例；年齡45～68歲；臨床分期：Ⅱ期14例，Ⅲ期8例，Ⅳ期4例。2組患者性別、年齡、臨床分期等比較差異無統計學意義(P均>0.05),具有可比性。

1.2治療方法

1.2.1對照組 采用吉西他濱聯合奧沙利鉑化療。吉西他濱1 000 mg/m2，第1,8天，靜滴30 min；奧沙利鉑85 mg/m2靜滴，第1天。

1.2.2治療組 在常規化療的基礎上加上DC-CIK治療。采集患者外周血50～100 mL，采血當日患者飲食要清淡，采用血液成分分離機循環外周血，采集單核細胞，再將分離出的單核細胞放在超潔凈實驗室進行誘導、激活，定向培養出DC-CIK細胞，參照文獻[3]方法，待細胞成熟后，再將DC-CIK分次回輸到患者體內。每次回輸前2 d對培養液行涂板及細菌學培養，每次回輸細胞前1 h以凝膠法測細菌內毒素。每次輸注DC-CIK細胞不低于1×109個，4周為1個療程，每個療程輸入細胞總數>1×1010個，DC-CIK與化療不同時進行，一般間隔1～2周。2個療程后評價療效。

1.3觀察指標 ①觀察2組近期療效按WHO標準判定。完全緩解(CR)：可見的腫瘤病變完全消失，維持4周以上;或所有的癥狀、體征完全消失至少4周。部分緩解(PR)：腫瘤病灶的最大直徑及其最大的垂直橫徑的乘積縮小50%以上，其他病灶無增大，無新病灶出現，維持4周以上；或估計腫瘤大小減少大于等于50%，至少4周。穩定(SD)：腫瘤病灶的兩徑乘積縮小不足50%，或增大不超過25%，無新病灶出現，維持4周以上；或病情無明顯變化至少4周，估計腫瘤大小減少不足50%，增大不到25%。進展(PD)：腫瘤病灶的兩徑乘積增大25%以上或出現新病灶；或有新病變出現，或原有病變估計增大大于等于25%。以CR+PR計算客觀緩解率(RR)，以CR+PR+SD計算疾病控制率(DCR)。②觀察2組患者生活質量、免疫功能、不良反應情況以及1年生存率。生活質量采用KPS評分判定。治療前及治療結束后1周抽取2組患者外周血，檢驗輔助性T細胞(CD3+CD4+)、抑制性T細胞(CD3+CD8+)、NK細胞(CD3-CD56+)以及NKT細胞(CD3+CD56+)百分率。不良反應按WHO標準判定但不予分級。1年生存率指接受治療的患者經1年隨訪尚存活數所占的比例。

2 結 果

2.1近期療效 2組均完成2周期治療。治療組CR 1例，PR 13例，SD 7例，PD 5例，客觀緩解率54% ，疾病控制率81%；對照組CR 0例，PR 12例，SD 3例，PD 11例，客觀緩解率46%，疾病控制率58%。2組客觀緩解率比較差異無統計學意義(P>0.05)，疾病控制率比較差異有統計學意義(P<0.05)。

2.2生活質量 治療組和對照組治療前KPS評分均為(70±10)分。對照組化療后KPS評分為(75±10)分，與治療前比較差異無統計學意義(P>0.05)；治療組治療后KPS評分為(85±17)分，與治療前比較差異有統計學意義(P<0.05)。

2.3免疫力功能 治療前2組輔助性T細胞、NK細胞、抑制性T細胞及NKT細胞百分率比較差異無統計學意義(P均>0.05)。治療后治療組各指標均明顯改善(P均<0.05)，而對照組化療后僅輔助T細胞、NKT細胞百分率明顯降低(P均<0.05)。治療后2組各指標比較均有顯著性差異(P均<0.05)。見表1。

表1 2組治療前后免疫功能情況比較

注：①與治療前比較，P<0.05;②與對照組比較，P<0.05。

2.4不良反應 治療組骨髓抑制、惡心嘔吐、白細胞減少發生率均明顯低于對照組(P均<0.05)。但治療組在輸入細胞過程中及輸入后出現寒戰高熱2例，未出現心腎功能異常。見表2。

2.51年生存率 治療組中位生存期為11.5個月，其中12例尚在隨訪，1年生存率為46%；對照組中位生存期10.4個月，其中7例還在隨訪，1年生存率為27%。采用Kaplan-Meier方法繪制疾病無進展生存率曲線，經Log-rank檢驗，2組比較差異無統計學意義(P>0.05)，見圖1。

表2 2組不良反應發生情況比較 例

注：①與對照組比較，P<0.05。

圖1 2組1年生存率比較

3 討 論

腫瘤的免疫治療可與手術、放化療等治療手段聯合使用提高腫瘤治療的綜合療效，而且該治療方式是通過激發和增強自身的免疫力從而有效清除少量殘留的腫瘤細胞，防止腫瘤的復發。DC-CIK療法采用共培養樹突狀細胞(DC)和細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)進行治療。DC細胞來源于CD14+或者CD34+細胞，是一種抗原提呈細胞，可以向初始T淋巴細胞提呈抗原，激活抗原特異性的細胞毒T淋巴細胞反應[8]。DC是目前所知的功能最強大的抗原提呈細胞，是唯一能顯著刺激未致敏T細胞增殖的細胞，與單核巨噬細胞和B淋巴細胞相比其提呈抗原和刺激T細胞增殖的能力增大了100～1 000倍;而腫瘤的發生、轉移以及預后都與DC細胞的減少或者缺失有關。經過DC細胞治療后腫瘤部位會發現特異性T細胞的浸潤[9]。DC細胞在外周血或者人骨髓中為非成熟狀態，可由一些細胞因子如GM-CSF、IL-4和TNF-α刺激轉化為成熟狀態從而發揮作用。近年來，以DC細胞為基礎的免疫治療被認為是腫瘤免疫治療新的支撐點。CIK細胞是一種新型的免疫活性細胞，是一類對惡性腫瘤細胞具有高度殺傷能力的T淋巴細胞，主要效應細胞以同時表達CD3+(T細胞表面抗原)和CD56+(NK細胞表面標志)為特征，具有NK細胞非MHC限制性殺瘤活性和T淋巴細胞的抗腫瘤優點[10]。CIK在體外增殖速度快，細胞殺傷活力強，能精確地殺傷腫瘤細胞而不損傷任何正常組織，對多種耐藥腫瘤細胞同樣敏感，特別擅長清除殘留及轉移的微小病灶，防止癌細胞復發，同時也能夠提升患者免疫力；DC-CIK聯合治療比單純的CIK有更強的抗腫瘤效果[11]。單純的CIK細胞對腫瘤的近期療效明顯，但是遠期療效及殺傷腫瘤細胞的特異性不及DC，而DC細胞的近期療效相對較弱，所以采用DC-CIK共同治療具有較好的理論基礎。DC-CIK共治療細胞的增殖能力和殺死腫瘤能力均較單DC或者CIK有明顯增強，殺瘤譜更廣，對腫瘤的殺死高達71%，而且能夠提高自身抵抗力，間接殺死腫瘤細胞。且DC-CIK治療不良反應小，能增強患者自身的抵抗力，改善患者的身體狀況，提高生活質量，減輕患者的痛苦。張泉成等[12]研究發現DC-CIK療法聯合TACE及RFA治療小肝癌能夠提高患者術后的肝功能和免疫力，降低肝癌的復發率，延長患者生存期。郭偉偉等[13]也發現DC-CIK聯合TACE術治療原發性肝癌能夠取得良好的臨床療效，增強患者的免疫力，提高患者的生活質量。劉濤等[14]發現自體DC/CIK細胞治療宮頸癌臨床效果良好。

本研究結果顯示，治療組疾病控制率和KPS評分均明顯高于對照組。治療組治療后輔助T細胞及NK細胞百分率顯著提升，抑制T細胞的百分率顯著降低；而對照組輔助T細胞百分率顯著降低，抑制T細胞的百分率略有上升，NK細胞百分率幾乎不變。提示DC-CIK療法聯合化療提高了患者的免疫力，而單純化療患者的免疫力進一步降低。治療組1年生存率為58%，其中12例尚在隨訪；而對照組為46%，其中7例還在隨訪。2組的1年生存率比較差異無統計學意義，可能是病例數不多的原因。2組不良反應均為血液學毒性和消化道反應，但是治療組不良反應比對照組明顯減輕。以上結果和DC-CIK治療其他腫瘤的結果相似[15-16]，說明DC-CIK療法聯合化療治療中晚期胃癌具有良好疾病控制率，能夠改善生活質量，提高患者免疫力和生存率，減輕不良反應，值得臨床應用和推廣。

[1] Choudhury A,Palma M,Mellstedt H. The future of cancer vaccines for non-small-cell lung cancer:ongoing trials[J]. Clin Lung Ca,2008,9(1):37-44

[2] Tuyaerts S,Van-Meirvenne S,Bonehill A,et al. Expression of human GITRL on myeloid dendritic cells enhances their immunostimulatory function but does not abrogate the suppressive effect of CD4+CD25+regulatory T cells[J]. J Leukoc Biol,2007,82(1):93-105

[3] 張俊萍,毛光華,史天良,等. DC-CIK 聯合化療治療晚期非小細胞肺癌的臨床療效[J]. 中國腫瘤生物治療雜志,2011,18(4):424-429

[4] 蔡俊霞,譚潔,王彬,等. DC-CIK治療43例晚期非小細胞肺癌的近期療效觀察[J]. 現代腫瘤醫學,2014,22(1):67-70

[5] 董敏,孔德勝,趙紅麗,等. DC與CIK細胞治療難治復發急性髓細胞白血病的近期臨床觀察[J]. 現代生物醫學進展,2014,14(1):159-162

[6] 應敏剛,魏植強,鄭秋紅,等. 結直腸癌術后放化療聯合DC-CIK的療效分析[J]. 實用癌癥學雜志,2010,25(3):274-276

[7] 劉光藝,李洋,陳振海,等. DC-CIK細胞聯合全身靜脈化療治療晚期結直腸癌伴彌漫性肝轉移臨床療效分析[J]. 重慶醫科大學學報,2014,39(3):71-76

[8] NagarajS,ZiskeC,Schmidt-WolfIG.Humancytokine-inducedkillercellshaveenhancedinvitrocytolyticactivityvianon-viralinterleukin-2genetransfer[J].GenVaccinesTher,2004,2(1):12

[9] Lanzavecchia A,Sallusto F. Regulation of Tcell immunity by dendritic cells[J]. Cell,2001,106(3):263-266

[10] Peqqs KS,Quezada SA,Allison JP. Cancer immunotherapy: Co-stimulatory agonists and co-inhibitory antagonists[J]. Clin Exp Immunol,2009,157(1):9-19

[11] 董毅,朱太崗,李月紅,等. CIK細胞與DC-CIK細胞抗腫瘤效應的對照研究[J]. 中華全科醫學,2011,9(12):1844-1846

[12] 張泉成,潘國政,李國強,等. DC-CIK細胞治療聯合TACE及RFA治療小肝癌[J]. 世界華人消化雜志,2014,22(16):2237-2242

[13] 郭偉偉,劉莉,吳德華. DC-CIK細胞免疫治療聯合TACE術治療原發性肝癌[J]. 南方醫科大學學報,2014,34(5):674-678

[14] 劉濤,沈杰,何鳳,等. 自體DC/CIK細胞治療宮頸癌臨床療效分析[J]. 現代中西醫結合雜志,2014,23(8):813-815

[15] 文洽先,朱婭,許彬,等. DC-CIK聯合化療在晚期胰腺癌治療中的應用[J]. 現代中西醫結合雜志,2013,22(36):4065-4066

[16] 趙和泰,李丁,李江濤,等. DC-CIK 細胞治療中晚期惡性腫瘤的臨床療效分析[J]. 腫瘤藥學,2012,2(1):54-56

Study on DC-CIK combined with chemotherapy in the treatment of patients with advanced gastric cancer

WU Fubing, HUANG Wen, WANG Kangxia, WANG Mingyuan, XU Fanggui, HUANG Chunkai, WANG Xing

(The First Hospital Affiliated to PLA Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command, Putian351100,Fujian,China)

Objective It is to observe the clinical effect and safety of Dendritic cell-Cytokine induced killers (DC-CIK) combined with chemotherapy in the treatment of advanced gastric cancer. Methods 56 patients with advanced gastric cancer were randomly divided into two groups. The patients were treated by chemotherapy in gemcitabine combined with oxaliplatin in the control group, and were treated by routine chemotherapy combining with DC-CIK in the treatment group. After treatment, the therapeutic effect, life quality, 1-year survival and toxicities of the two groups were observed. Results The remission rate (RR) and disease control rate (DCR) were 54% and 81% in treatment and 46% and 58% in control group respectively. There was no significant difference in RR (P>0.05) but was significant difference in DCR between both groups (P>0.05). after treatment, the KPS score was 85±17 of treatment group and 75±10 of control group respectively, there was significant difference between the two groups (P<0.05). The immunity was improved in the treatment group and declined in the control group obviously; there was significant difference in the immunity between the two groups. Compare with control group, the 1-year survival of treatment group was not remarkable but its survival time was more than control group. The main toxicities were hematological toxicities and digestive tract reactions in two group, but the treatment group was lighter than control group (P<0.05). Conclusion DC-CIK combined with chemotherapy has significant clinical effect on advanced gastric cancer and does not have obvious toxic and side effect. Moreover it can improve the RR, survival and quality. So it is worth popularizing and applying on clinic.

chemotherapy; Dendritic cell-Cytokine induced killers; advanced gastric cancer

吳付兵，男，碩士，主治醫師，主要從事腫瘤的綜合治療。

王星，E-mail: wxing1972@126.com

莆田市科技計劃項目(莆市科2012S02(1))

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.03.005

R735.2

A

1008-8849(2015)03-0242-04

2014-07-25