D-檸檬烯抗癌機(jī)制的研究進(jìn)展

黃巧娟，孫志高*，龍 勇，孫 謙

（西南大學(xué)柑桔研究所，重慶 400712）

?

D-檸檬烯抗癌機(jī)制的研究進(jìn)展

黃巧娟，孫志高*，龍 勇，孫 謙

（西南大學(xué)柑桔研究所，重慶 400712）

摘 要：D-檸檬烯是一種天然的單萜烯，廣泛存在于柑橘、蔬菜及香料中，具有消炎、抑菌、抗腫瘤等多種功效。其中抗癌是D-檸檬烯的主要藥理活性之一，其抗癌機(jī)制主要包括化學(xué)預(yù)防作用、抑制細(xì)胞周期與誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡以及抑制腫瘤轉(zhuǎn)移與侵襲等。由于D-檸檬烯具有來源廣泛、安全性好、給藥方便等優(yōu)點(diǎn)，具有良好的開發(fā)前景和臨床應(yīng)用價值，亟待深入研究。

關(guān)鍵詞：D-檸檬烯；癌癥；抗癌機(jī)制；細(xì)胞凋亡

D-檸檬烯（D-limonene）又稱D-苧烯，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如圖1所示，是柑橘精油的主要成分，具有消炎、減痛、抑菌、預(yù)防和治療癌癥的作用[1-2]，可作為增香劑、抗氧化劑等添加到食品中[3]。近年來，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)D-檸檬烯還可作為空氣清潔劑、綠色提取劑和抗蟲劑的主要成分，并已取得階段性成果[4-6]。D-檸檬烯已被廣泛應(yīng)用于食品、農(nóng)藥、化工和醫(yī)藥等多個行業(yè)和領(lǐng)域中，其在癌癥防治中的作用引起了人們的廣泛關(guān)注和重視。

圖 11 D-檸檬烯化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig.1 Chemical structure of D-limonene

早在20世紀(jì)70年代，人們就發(fā)現(xiàn)D-檸檬烯具有抗腫瘤活性。1971年Homburger等[7]給小鼠注射D-檸檬烯或橙油時，發(fā)現(xiàn)它們能明顯降低苯并（rst）戊芬致癌物所誘發(fā)的腫瘤發(fā)生率。從此，人們對D-檸檬烯的抗癌活性進(jìn)行了廣泛的研究，并發(fā)現(xiàn)其抗癌功效具有廣譜性[8]，對乳腺癌、肝癌、結(jié)腸癌等均具有抑制作用（詳見表1），并能減輕各種癌癥帶來的損傷[9]。

綜合分析已報道的文獻(xiàn)，D-檸檬烯抗癌機(jī)制主要有化學(xué)預(yù)防作用、抑制細(xì)胞周期與誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、以及抑制腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移等，分別介紹如下。

1　化學(xué)預(yù)防作用

D-檸檬烯對化學(xué)因子引起的嚙齒類動物乳腺癌、淋巴癌、肺癌、胃癌、皮膚癌、肝癌以及致癌因子H-Ras突變誘發(fā)的大鼠乳腺腫瘤均具有化學(xué)預(yù)防作用[20,29-30]，其化學(xué)預(yù)防作用主要包括：抗氧化、抗炎癥及免疫調(diào)節(jié)等[26]。

表 11 D-檸檬烯對不同癌癥的影響Table 1 Effect of D-limonene on different cancerss

1.1抗氧化

自由基造成的氧化損傷對癌癥的產(chǎn)生及發(fā)展有著重要作用，抵抗氧化損傷能很好的預(yù)防癌癥[31]，而富含D-檸檬烯的精油提取物是一種良好的抗氧化劑[32]。Jayaprakasha等[33]發(fā)現(xiàn)，富含D-檸檬烯的金橘精油具有良好的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除能力、抗氧化能力和抗炎活性，使機(jī)體免受氧化損傷。

1.2抗炎癥

炎癥反應(yīng)與癌癥具有密切的關(guān)系，核轉(zhuǎn)錄因子-κB （nuclear transcription factor-kappa B，NF-κB）是聯(lián)系炎癥反應(yīng)與癌癥的中介分子之一[34]。促炎細(xì)胞因子如腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）及白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）在癌癥的啟動及發(fā)展階段起著重要作用[35]。通過抑制NF-κB活性干擾TNF-α或IL-6信號傳遞，能使癌癥的發(fā)生、發(fā)展得到很好的控制[36]。D-檸檬烯能抑制NF-κB信號通路[37]，從而預(yù)防炎癥及癌癥的發(fā)生。Kummer等[38]研究柑橘精油及檸檬烯對BALB/c小鼠的影響，發(fā)現(xiàn)當(dāng)用酵母聚糖誘導(dǎo)小鼠腹膜炎時，小鼠腹膜細(xì)胞會產(chǎn)生TNF-α及IL-6，而用柑橘精油及檸檬烯對小鼠進(jìn)行前處理的實(shí)驗(yàn)組TNF-α及IL-6的表達(dá)受到抑制。Chi Gefu等[39]研究也表明D-檸檬烯能抑制NF-κB的活性，從而抑制促炎性細(xì)胞因子的表達(dá)。

1.3免疫調(diào)節(jié)

D-檸檬烯對免疫系統(tǒng)的影響尚存爭議。有研究者[40]認(rèn)為檸檬烯能增強(qiáng)免疫應(yīng)答，促使免疫細(xì)胞產(chǎn)生抗體，新發(fā)展的細(xì)胞免疫療法即為通過增強(qiáng)機(jī)體的免疫應(yīng)答能力來抑制或消除腫瘤的新型生物技術(shù)，現(xiàn)已廣泛用于多種癌癥的治療[41]。Toro-Arreola等[18]認(rèn)為D-檸檬烯主要通過調(diào)控2,4-二硝基氟代苯（2,4-dinitro-1-fluorobenzene，DNFB）的超敏反應(yīng)、巨噬細(xì)胞的吞噬作用，以及滅菌活性等來調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，而不影響T細(xì)胞的活性。

而另一些研究者則認(rèn)為D-檸檬烯及其代謝物具有免疫抑制作用，Lappas等[42]研究發(fā)現(xiàn)D-檸檬烯能抑制CD3＋、CD4＋、CD8＋等T細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞干擾素-γ （interferon-γ，IFN-γ）、IL-2、TNF-α、IL-4和IL-13，并能調(diào)控CD25、CD69和CD40L等T淋巴細(xì)胞的活性，即D-檸檬烯通過影響T細(xì)胞調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)。此外，Imamura等[43]發(fā)現(xiàn)D-檸檬烯的代謝物紫蘇醇也具有免疫抑制作用，能抑制CD4＋細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ等細(xì)胞活素物質(zhì)。

2　抑制細(xì)胞周期和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡

2.1調(diào)控癌基因及相關(guān)蛋白的表達(dá)

體內(nèi)的致癌基因和抑癌基因調(diào)控著癌細(xì)胞的生長與凋亡，抑制致癌基因的表達(dá)及活化抑癌基因能有效抵抗癌癥的發(fā)生。常見的致癌基因有Bcl-2、c-myc、Ras、c-jun，抑癌基因有Bax、Cx32、Cx43、p53[44]。

Ras基因介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)的信號傳遞，對于細(xì)胞的增殖、分化、凋亡、惡性轉(zhuǎn)移起著重要作用，Ras蛋白必須進(jìn)行異戊二烯化修飾，并定位在細(xì)胞膜上才具有激活下游信號的能力[45]。目前發(fā)現(xiàn)修飾Ras蛋白的聚異戊二烯基團(tuán)主要有法尼基及二牛龍牛兒基。臨床實(shí)驗(yàn)表明，D-檸檬烯抑制Ras蛋白異戊二烯化修飾主要通過抑制法尼基轉(zhuǎn)移酶（FTase）的活性[46]，或抑制甲羥戊酸衍生的異戊二烯復(fù)合物與Ras蛋白或Ras相關(guān)蛋白的結(jié)合[47]而實(shí)現(xiàn)，從而使Ras蛋白無法附于細(xì)胞膜上而失去活性。D-檸檬烯作為一種新型的天然法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑逐漸成為抗癌研究的熱點(diǎn)。

細(xì)胞周期素D（cyclinD）是一種原癌基因，共有CyclinD1、CyclinD2、CyclinD3這3 個家族。CyclinD1通過促進(jìn)G1期向S期的轉(zhuǎn)變而促進(jìn)細(xì)胞周期、調(diào)節(jié)組織細(xì)胞增殖，并與個體發(fā)育及腫瘤形成等有關(guān)[48]。Miller等[49]在臨床研究中發(fā)現(xiàn)：每天服用2 g檸檬烯并持續(xù)2～6 周，乳腺癌腫瘤組織中Cyclin D1表達(dá)減少了22%（P=0.002），且細(xì)胞周期停滯于G1/S期，從而抑制細(xì)胞增殖。

Bax/Bcl-2與p53在促進(jìn)細(xì)胞凋亡中發(fā)揮重要作用。D-檸檬烯誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡常與Bax、Bcl-2及p53有關(guān)，Bax/Bcl-2升高有利于細(xì)胞凋亡，而p53基因能促使細(xì)胞停滯于G0/G1期。Jayaprakasha等[33]在D-檸檬烯抗癌機(jī)制的體外實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)D-檸檬烯能抑制前列腺癌細(xì)胞LNCaP的增殖，當(dāng)精油的質(zhì)量濃度為200 mg/L時，在24、48、72 h時其抑制率分別為55%、61%、63.4%，且Bax/Bcl-2升高，p53蛋白的表達(dá)增加。此外，D-檸檬烯還能有效抑制致癌因素如c-jun和c-myc在癌細(xì)胞中的過度表達(dá)[12,50]，從而抑制癌癥發(fā)生。

2.2阻斷細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（phosphatidylinositol 3 kinase（PI3K）/protein kinase B（Akt））通路通過影響下游多種效應(yīng)分子的活化狀態(tài)，抑制細(xì)胞凋亡、促進(jìn)細(xì)胞增殖，與多種人類腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[51]。線粒體通路是細(xì)胞凋亡的主要通路之一，其中Bcl-2家族基因的變化調(diào)控著線粒體外膜的通透性，控制細(xì)胞色素c的釋放。細(xì)胞色素c刺激Caspase-9進(jìn)而活化Caspase-3，從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。D-檸檬烯作用于癌細(xì)胞常抑制PI3K/Akt通路或促進(jìn)線粒體通路，最終誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[22,25]。此外，有研究者發(fā)現(xiàn)D-檸檬烯能抑制磷酸化的細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinase，p-ERK）的表達(dá)，從而切斷絲裂原激活的蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，或通過調(diào)節(jié)Ras-ERK途徑來抑制癌癥[20,24]。細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路對癌癥的影響重大，當(dāng)前仍需深入、系統(tǒng)地研究D-檸檬烯對各種信號傳導(dǎo)通路的作用，進(jìn)一步探明其機(jī)制。

3　抑制腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移

3.1抑制腫瘤新生血管的生成

腫瘤血管生成是原發(fā)腫瘤持續(xù)增殖和腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的首要條件，惡性腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移過程依賴于新生血管為其提供足夠的脈管系統(tǒng)，而新血管的生成依賴于血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的調(diào)節(jié)。有研究證明D-檸檬烯及其代謝產(chǎn)物紫蘇酸和紫蘇醇均具有抑制腫瘤新生血管的作用，但關(guān)于其對腫瘤細(xì)胞VEGF的表達(dá)和腫瘤新生血管的生成作用及機(jī)制的研究較少[6,52]。

3.2抑制轉(zhuǎn)移蛋白Fascin-1和COX-2的表達(dá)

Fascin-1是一種重要的胞質(zhì)蛋白，它決定著細(xì)胞微絲骨架的分布和活動，可能在細(xì)胞遷移、侵襲以及細(xì)胞間信息交流等過程中發(fā)揮作用[53]。研究表明D-檸檬烯通過下調(diào)Fascin-1蛋白表達(dá)，調(diào)控乳腺癌細(xì)胞微絲結(jié)構(gòu)，進(jìn)而抑制體外侵襲[28]。環(huán)氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）是一種膜結(jié)合蛋白，在炎癥和腫瘤中起重要作用。COX-2主要通過促進(jìn)腫瘤血管生成、增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移、抑制免疫功能及抑制細(xì)胞凋亡等機(jī)制而導(dǎo)致或促進(jìn)癌癥的發(fā)展[54]。Chaudhary等[20]發(fā)現(xiàn)D-檸檬烯能抑制COX-2的表達(dá)，降低鳥氨酸脫羧酶的活性，阻止胸腺嘧啶摻入DNA中，從而起到抑制癌癥的效果。

4　結(jié) 語

D-檸檬烯抗癌機(jī)制的研究已有一段時間，但由于D-檸檬烯的抗癌效應(yīng)常是幾種機(jī)制的綜合作用，具有復(fù)雜性，現(xiàn)仍未被人們完全明確和系統(tǒng)了解。比如D-檸檬烯對免疫調(diào)節(jié)的抗癌機(jī)制仍存在爭議。在光照下和空氣中，D-檸檬烯會分解成小分子氧化物進(jìn)而影響其安全性等，將D-檸檬烯應(yīng)用到臨床治療還有待進(jìn)一步研究。針對D-檸檬烯研究存在的上述缺陷或不足，結(jié)合當(dāng)前的新型制備和研究技術(shù)，對D-檸檬烯的深度利用提出以下幾點(diǎn)展望。

4.1安全性研究

D-檸檬烯作為天然植物提取物，其抗癌機(jī)理已成為當(dāng)今研究的熱點(diǎn)問題。經(jīng)體內(nèi)外及臨床實(shí)驗(yàn)證明，相對于傳統(tǒng)的抗癌藥物，D-檸檬烯具有綠色、安全、高效等優(yōu)點(diǎn)[53,55]，并被美國食品和藥物管理局（Food and Drug Administration，F(xiàn)DA）定義為一般公認(rèn)安全級（generally recognized as safe，GRAS）添加劑[56]，被美國食用香料與提取物制造商協(xié)會（Flavor and Extract Manufactures Association of the Unite States，F(xiàn)EMA）批準(zhǔn)食用[57]。然而，有研究表明在暴露的條件下，D-檸檬烯通過調(diào)節(jié)雄性小鼠體內(nèi)α2u-球蛋白的表達(dá)發(fā)揮細(xì)胞毒性作用[8]。而最近Mauro等[58]在倉鼠細(xì)胞V79中對暴露的D-檸檬烯進(jìn)行安全性實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)D-檸檬烯對細(xì)胞的毒性作用并不是因?yàn)橛绊懄?u-球蛋白的表達(dá)發(fā)生的，而是通過影響細(xì)胞分裂中紡錘體的形成及破壞染色體而導(dǎo)致細(xì)胞死亡，這也就否定了暴露的D-檸檬烯只對雄性小鼠發(fā)揮作用的說法。他們認(rèn)為，暴露的D-檸檬烯造成染色體破損可能是由于細(xì)胞內(nèi)活性氧（reactive oxygen species，ROS）的積累導(dǎo)致的細(xì)胞毒性作用。曾有研究者發(fā)現(xiàn)D-檸檬烯能促使癌細(xì)胞中ROS的增加，但對正常細(xì)胞沒有影響[33]，D-檸檬烯是否會造成正常細(xì)胞ROS的積累及其發(fā)生條件需進(jìn)行更多的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。

4.2與抗癌藥物聯(lián)用

D-檸檬烯與其他抗癌藥物聯(lián)合使用的研究已有較長歷史，已發(fā)現(xiàn)D-檸檬烯和普伐他汀（3-羥基-3-甲基戊二酸-輔酶A還原酶抑制劑）合用時能有效抵抗不同類型的癌癥，且無毒副作用[59-60]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，D-檸檬烯與某些抗癌藥物合用不僅可以增強(qiáng)抗癌效果，還能減輕抗癌藥物對正常細(xì)胞的副作用。比如，D-檸檬烯與紫杉萜聯(lián)合使用不僅能加強(qiáng)紫杉萜的抗癌能力，還能減輕紫衫萜單獨(dú)使用對正常細(xì)胞造成的副作用[26]。Russo等[28]研究發(fā)現(xiàn)D-檸檬烯與乙酸芳樟酯合用能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，而任一成分單獨(dú)使用不能抑制成神經(jīng)細(xì)胞瘤。Rehman等[61]也發(fā)現(xiàn)，D-檸檬烯能抑制阿霉素誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激和炎癥，但D-檸檬烯是否可以和阿霉素共同使用，從而達(dá)到增強(qiáng)抗癌作用并減輕藥物損傷的效果還需進(jìn)一步研究。D-檸檬烯與其他抗癌藥物聯(lián)合使用已顯示了明顯的優(yōu)勢，探討D-檸檬烯與其他藥物聯(lián)合使用的機(jī)制及尋找更多的抗癌藥物與D-檸檬烯聯(lián)合使用具有進(jìn)一步研究價值。

此外，近幾年對D-檸檬烯抗癌機(jī)制的研究主要集中在乳腺癌、結(jié)腸癌的研究上，而對其他癌癥研究較少，但D-檸檬烯對不同癌癥的抵抗機(jī)制既具有相似之處也存在差異。因此，還需加大力度研究D-檸檬烯對其他癌癥比如肺癌、淋巴癌等的抵抗機(jī)制，以擴(kuò)大其抗癌譜，提高其利用價值。

參考文獻(xiàn)：

[1]王偉江. 天然活性物質(zhì)單萜: 檸檬烯的研究進(jìn)展[J]. 中國食品添加劑, 2005(1): 33-37.

[2]d’ALESSIO P A, OSTAN R, BISSON J F, et al. Oral administration of d-limonene controls inflammation in rat colitis and displays antiinflammatory properties as diet supplementation in humans[J]. Life Sciences, 2013, 92(24/26): 1151-1156.

[3]KIMBALL D A. Citrus processing: a complete guide[M]. Gaithersburg, MD: Aspen, 1999: 223-238.

[4]GIATROPOULOS A, PAPACHRISTOS D P, KIMBARIS A, et al. Evaluation of bioefficacy of three citrus essential oils against the dengue vector Aedes albopictus (Diptera: Culicidae) in correlation to their components enantiomeric distribution[J]. Parasitology Research, 2012, 111(6): 2253-2263.

[5]KROL S, NAMIESNIK J, ZABIEGALA B. α-Pinene, 3-carene and d-limonene in indoor air of Polish apartments: the impact on air quality and human exposure[J]. Science of the Total Environment, 2014, 468: 985-995.

[6]CHIDAMBARA MURTHY K N, JAYAPRAKASHA G K, PATIL B S. D-limonene rich volatile oil from blood oranges inhibits angiogenesis and metastasis and induces cell death in human colon cancer cells[J]. Life Sciences, 2012, 91(11/12): 429-439.

[7]HOMBURGER F, TREGER A, BOGER E. Inhibition of murine subcutaneous and intravenous benzo(rst)pentaphene carcinogenesis by sweet orange oils and d-limonene[J]. Oncology, 1971, 25: 1-10.

[8]WHYSNER J, WILLIAMS G M. d-Limonene mechanistic data and risk assessment: absolute species-specific cytotoxicity, enhanced cell proliferation, and tumor promotion[J]. Pharmacology & Therapeutics, 1996, 71(1): 127-136.

[9]KAPOOR S. d-Limonene an emerging antineoplastic agent[J]. Human & Experimental Toxicology, 2013, 32(11): 1228-1228.

[10]曲明陽, 鄭永勝, 邢光明, 等. 右旋檸烯對人乳腺癌細(xì)胞微絲結(jié)構(gòu)及體外侵襲能力的影響[J]. 中國醫(yī)藥指南, 2010, 8(11): 5-7.

[11]ASAMOTO M, OTA T, TORIYAMA-BABA H, et al. Mammary carcinomas induced in human c-Ha-ras proto-oncogene transgenic rats are estrogen-independent, but responsive to d-limonene treatment[J]. Cancer Science, 2002, 93(1): 32-35.

[12]GIRI R K, PARIJA T, DAS B R. d-limonene chemoprevention of hepatocarcinogenesis in AKR mice: inhibition of c-jun and c-myc[J]. Oncology Reports, 1999, 6(5): 1123-1127.

[13]PARIJA T, DAS B R. Involvement of YY1 and its correlation with c-myc in NDEA induced hepatocarcinogenesis, its prevention by d-limonene[J]. Molecular Biology Reports, 2003, 30(1): 41-46.

[14]KAJI I, TATSUTA M, IISHI H, et al. Inhibition by D-limonene of experimental hepatocarcinogenesis in Sprague-Dawley rats does not involve p21rasplasma membrane association[J]. International Journal of Cancer, 2001, 93(3): 441-444.

[15]路小光, 馮秉安, 戰(zhàn)麗林, 等. 右旋檸烯誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞凋亡[J]. 中華腫瘤雜志, 2003, 25(4): 325-327.

[16]LU Xiaoguang, ZHAN Libin, FENG Bingan, et al. Inhibition of growth and metastasis of human gastric cancer implanted in nude mice by d-limonene[J]. World Journal of Gastroenterology, 2004, 10(14): 2140-2144.

[17]王玲, 張秀珍. D-檸檬烯對人胃癌MGC803細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J].生命科學(xué)儀器, 2009, 7(1): 26-28.

[18]del TORO-ARREOLA S, FLORES-TORALES E, TORRESLOZANO C, et al. Effect of D-limonene on immune response in BALB/c mice with lymphoma[J]. International Immunopharmacology, 2005, 5(5): 829-838.

[19]徐耀庭, 李勁松, 顧煒, 等. D-檸檬烯誘導(dǎo)人膀胱癌細(xì)胞周期阻滯及凋亡的研究[J]. 中國醫(yī)學(xué)工程, 2010, 18(3): 6-9.

[20]CHAUDHARY S C, SIDDIQUI M S, ATHAR M, et al. D-Limonene modulates inflammation, oxidative stress and Ras-ERK pathway to inhibit murine skin tumorigenesis[J]. Human & Experimental Toxicology, 2012, 31(8): 798-811.

[21]高大, 肖鎮(zhèn), 呂愛娥. D-檸檬烯對K562細(xì)胞增殖及凋亡的影響[J]. 中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志, 2006, 14(6): 1120-1122.

[22]JI Jun, ZHANG Li, WU Yuanyuan, et al. Induction of apoptosis by d-limonene is mediated by a caspase-dependent mitochondrial death pathway in human leukemia cells[J]. Leukemia & Lymphoma, 2006, 47(12): 2617-2624.

[23]JAYAPRAKASHA G K, MURTHY K N, UCKOO R M, et al. Chemical composition of volatile oil from Citrus limettioides and their inhibition of colon cancer cell proliferation[J]. Industrial Crops and Products, 2013, 45: 200-207.

[24]賈書生, 董新舒. 右旋檸烯對人結(jié)腸癌LS174T細(xì)胞p-ERK和p-AKTs表達(dá)的影響[J]. 實(shí)用腫瘤學(xué)雜志, 2013, 27(2): 101-104.

[25]JIA Shusheng, XI Guangpeng, ZHANG Ming, et al. Induction of apoptosis by D-limonene is mediated by inactivation of Akt in LS174T human colon cancer cells[J]. Oncology Reports, 2013, 29(1): 349-354.

[26]RABI T, BISHAYEE A. d-Limonene sensitizes docetaxelinduced cytotoxicity in human prostate cancer cells: generation of reactive oxygen species and induction of apoptosis[J]. Journal of Carcinogenesis, 2009, 8(1): 1-9.

[27]NAKAIZUMI A, BABA M, UEHARA H, et al. d-Limonene inhibits N-nitrosobis(2-oxopropyl)amine induced hamster pancreatic carcinogenesis[J]. Cancer Letters, 1997, 117(1): 99-103.

[28]RUSSO R, CIOCIARO A, BERLIOCCHI L, et al. Implication of limonene and linalyl acetate in cytotoxicity induced by bergamot essential oil in human neuroblastoma cells[J]. Fitoterapia, 2013, 89: 48-57.

[29]KARLSON J, BORG-KARLSON A K, UNELIUS R, et al. Inhibition of tumor cell growth by monoterpenes in vitro: evidence of a Rasindependent mechanism of action[J]. Anti-Cancer Drugs, 1996, 7(4): 422-429.

[30]MILLER J A. Development and validation of a novel assay to quantify d-limonene in human fat biopsy samples[D]. Tucson, Arizona: The University of Arizona, 2007.

[31]宮蕓蕓. 氧化損傷與癌癥的發(fā)生和預(yù)防[J]. 國外醫(yī)學(xué): 衛(wèi)生學(xué)分冊, 2000, 27(1): 11-14.

[32]JIMENEZ M, GUZMAN A P, AZUARA E, et al. Volatile compounds and antioxidative activity of Porophyllum tagetoides extracts[J]. Plant Foods for Human Nutrition, 2012, 67(1): 57-63.

[33]JAYAPRAKASHA G K, MURTHY K N C, DEMARAIS R, et al. Inhibition of prostate cancer (LNCaP) cell proliferation by volatile components from Nagami kumquats[J]. Planta Medica, 2012, 78(10): 974-980.

[34]LU Haitian, OUYANG Weiming, HUANG Chuanshu. Inflammation, a key event in cancer development[J]. Molecular Cancer Research, 2006, 4(4): 221-233.

[35]MANN A P, VERMA A, SETHI G, et al. Overexpression of tissue transglutaminase leads to constitutive activation of nuclear factor kappaB in cancer cells: delineation of a novel pathway[J]. Cancer Research, 2006, 66(17): 8788-8795.

[36]陳素芹, 李君, 夏金英. 核轉(zhuǎn)錄因子κB在炎性相關(guān)癌癥中的作用[J].臨床薈萃, 2010, 25(16): 1471-1473.

[37]SALMINEN A, LEHTONEN M, SUURONEN T, et al. Terpenoids: natural inhibitors of NF-κB signaling with anti-inflammatory and anticancer potential[J]. Cellular and Molecular Life Sciences, 2008, 65(19): 2979-2999.

[38]KUMMER R, FACHINI-QUEIROZ F C, ESTEVAO-SILVA C F, et al. Evaluation of anti-inflammatory activity of Citrus latifolia Tanaka essential oil and limonene in experimental mouse models[J]. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, 2013, doi: 10.1155/2013/859083.

[39]CHI Gefu, WEI Miaomiao, XIE Xianxing, et al. Suppression of MAPK and NF-κB pathways by limonene contributes to attenuation of lipopolysaccharide-induced inflammatory responses in acute lung injury[J]. Inflammation, 2013, 36(2): 501-511.

[40]RAPHAEL T J, KUTTAN G. Immunomodulatory activity of naturally occurring monoterpenes carvone, limonene, and perillic acid[J]. Immunopharmacology and Immunotoxicology, 2003, 25(2): 285-294.

[41]陳孜孜. 細(xì)胞免疫療法抗癌的研究進(jìn)展[J]. 中國中醫(yī)藥咨訊, 2012, 4(4): 74.

[42]LAPPAS C M, LAPPAS N T. D-Limonene modulates T lymphocyte activity and viability[J]. Cellular Immunology, 2012, 279(1): 30-41.

[43]IMAMURA M, SASAKI O, OKUNISHI K, et al. Perillyl alcohol suppresses antigen-induced immune responses in the lung[J]. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2014, 443(1): 266-271.

[44]PATIL S D, CHAUDHARI M A, SAPKALE P V, et al. A recent review on anticancer herbal drugs[J]. Journal of Drug Discovery and Therapeutics, 2013, 1(6): 77-84.

[45]國風(fēng), 岑建農(nóng), 陳子興, 等. 洛伐他汀對NB4細(xì)胞ras基因P21Ras膜結(jié)合作用影響的體外試驗(yàn)[J]. 中國病理生理雜志, 2002, 18(4): 389-391.

[46]GELB M H, TAMANOI F, YOKOYAMA K, et al. The inhibition of protein prenyltransferases by oxygenated metabolites of limonene and perillyl alcohol[J]. Cancer Letters, 1995, 91(2): 169-175.

[47]SHINOMIYA M, KAWAMURA K, TANIDA E, et al. Neurite outgrowth of PC12 mutant cells induced by orange oil and d-limonene via the p38 MAPK pathway[J]. Acta Medica Okayama, 2012, 66(2): 111-118.

[48]高鵬. 細(xì)胞周期素D與細(xì)胞癌變[J]. 國外醫(yī)學(xué): 腫瘤學(xué)分冊, 1998, 25(2): 72-75.

[49]MILLER J A, LANG J E, LEY M, et al. Human breast tissue disposition and bioactivity of limonene in women with early-stage breast cancer[J]. Cancer Prevention Research, 2013, 6(6): 577-584.

[50]SATOMI Y, OHARA K, YAZAKI K, et al. Production of the monoterpene limonene and modulation of apoptosis-related proteins in embryonic-mouse NIH 3T3 fibroblast cells by introduction of the limonene synthase gene isolated from Japanese catnip (Schizonepeta tenuifolia)[J]. Biotechnology and Applied Biochemistry, 2009, 52(3): 185-190.

[51]黃秀蘭, 崔國輝, 周克元. PI3K-Akt信號通路與腫瘤細(xì)胞凋亡關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 癌癥, 2008, 27(3): 331-336.

[52]楊慧科, 李玉蘭, 劉慧冬, 等. D-limonene對小鼠移植腫瘤生長及淋巴管生成的影響[J]. 中國臨床解剖學(xué)雜志, 2007, 25(1): 57-59.

[53]SUN Jidong. D-Limonene: safety and clinical applications[J]. Alternative Medicine Review, 2007, 12(3): 259-264.

[54]杜加錄, 符兆英. 環(huán)氧合酶-2促進(jìn)腫瘤發(fā)生發(fā)展機(jī)制的研究進(jìn)展[J].延安大學(xué)學(xué)報: 醫(yī)學(xué)科學(xué)版, 2012(1): 16-19.

[55]MILLER J, HAKIM I A, LOPEZ A M, et al. Safety and feasibility of topical application of limonene as a massage oil to the breast[J]. Journal of Cancer Therapy, 2012, 3(5): 749-754.

[56]NAGOURNEY R A. Oral limonene: combined prenylation inhibitor therapy of cancer[J]. Journal of Medicinal Food, 1998, 1(2): 83-88.

[57]唐曉蓉. 檸檬烯提取方法的研究進(jìn)展[J]. 四川醫(yī)學(xué), 2011, 32(8): 1300-1302.

[58]MAURO M, CATANZARO I, NASELLI F, et al. Abnormal mitotic spindle assembly and cytokinesis induced by d-limonene in cultured mammalian cells[J]. Mutagenesis, 2013, 28(6): 631-635.

[59]KAWATA S, NAGASE T, YAMASAKI E, et al. Modulation of the mevalonate pathway and cell growth by pravastatin and d-limonene in a human hepatoma cell line (Hep G2)[J]. British Journal of Cancer, 1994, 69(6): 1015-1020.

[60]NAGOURNEY R A. GARLIC: medicinal food or nutritious medicine?[J]. Journal of Medicinal Food, 1998, 1(1): 13-28.

[61]REHMAN M U, TAHIR M, KHAN A Q, et al. d-Limonene suppresses doxorubicin-induced oxidative stress and inflammation via repression of COX-2, iNOS, and NF-κB in kidneys of Wistar rats[J]. Experimental Biology and Medicine, 2014, 239(4): 465-476.

Recent Progress in Research on Anticancer Mechanism of D-Limonene

HUANG Qiaojuan, SUN Zhigao*, LONG Yong, SUN Qian
(Citrus Research Institute, Southwest University, Chongqing 400712, China)

Abstract:D-Limonene, widely present in citrus, vegetables and spices, is a natural monoterpene. It plays an important role in many physiological processes, such as reducing inflammation, minimizing bacterial growth, and inhibiting cancer development. Anticancer effect is the major function of D-limonene by participating in chemical prevention, cell-cycle inhibition, induction of apoptosis, and defense against cancer proliferation and invasiveness. D-Limonene has great prospects for clinical application for its wide distribution, excellent safety, and convenient administration. Therefore, it is worthy of further exploration.

Key words:D-limonene; cancer; anticancer mechanism; apoptosis

doi:10.7506/spkx1002-6630-201507044

中圖分類號：TS255.1

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：1002-6630（2015）07-0240-05

*通信作者：孫志高（1964—），男，副研究員，本科，研究方向?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品貯藏與加工。E-mail：cpro@cric.cn

作者簡介：黃巧娟（1989—），女，碩士研究生，研究方向?yàn)槭称坊瘜W(xué)與營養(yǎng)學(xué)。E-mail：hqj1027003283@163.com

基金項(xiàng)目：2012年度國家星火計(jì)劃項(xiàng)目（2012GA811001）

收稿日期：2014-04-04